LRRFIP1基因干扰对脂多糖诱导的支气管上皮细胞炎症、氧化应激和细胞凋亡的影响

发布时间：2021-02-28 04:02

　　目的探讨富亮氨酸重复序列相互作用蛋白1（LRRFIP1）基因对脂多糖（LPS）诱导的支气管上皮细胞炎症、氧化应激和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法使用LPS处理人支气管上皮细胞株16HBE,并利用Lipofectamine 2000试剂将siLRRFIP1转染到16HBE细胞,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测LRRFIP1 mRNA表达;免疫印迹试验（Western blot）检测LRRFIP1、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved caspase-3）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、p65、磷酸化p65（p-p65）、IκBα和IκBα和磷酸化IκBα（p-IκBα）蛋白表达;噻唑蓝（MTT）检测细胞活力;试剂盒检测细胞丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脱氢酶（LDH）水平和炎症因子白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）分泌;流式细胞术检测细胞凋亡。结果LPS诱导的16HBE细胞中L... 

【文章来源】：免疫学杂志. 2020,36(10)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞和试剂
    1.2 细胞培养与处理
    1.3 q RT-PCR检测LRRFIP1 m RNA表达
    1.4 细胞的转染与处理
    1.5 Western blot检测LRRFIP1、CyclinD1、Cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、p65、p-p65、IκBα和p-IκBα蛋白表达
    1.6 MTT检测细胞活力
    1.7 试剂盒检测细胞氧化应激和炎症因子分泌
    1.8流式细胞术检测细胞凋亡
    1.9 统计学分析
2 结果
    2.1 LRRFIP1在LPS诱导的支气管上皮细胞16HBE中的表达
    2.2 抑制LRRFIP1对LPS诱导的支气管上皮细胞16HBE细胞活力
    2.3 抑制LRRFIP1对LPS诱导的支气管上皮细胞16HBE细胞氧化应激
    2.4 抑制LRRFIP1对LPS诱导的支气管上皮细胞16HBE中炎症因子分泌的影响
    2.5 抑制LRRFIP1对LPS诱导的支气管上皮细胞16HBE凋亡的影响
    2.6 抑制LRRFIP1对LPS诱导的支气管上皮细胞16HBE中NF-κB信号通路的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]花青素通过Nrf-2/HO-1信号通路调控哮喘气道炎症[J]. 刘宇彤,车楠,李莉,李良昌,马立光.  免疫学杂志. 2019(01)
[2]欧前胡素通过p38MAPK/NF-κB途径改善哮喘小鼠气道炎症[J]. 赵雨喆,咸哲民,姜京植,王重阳,李俊峰,李良昌,李燕,朴红梅,延光海.  免疫学杂志. 2018(09)
[3]虫草素抑制脂多糖诱导的支气管上皮细胞炎症反应[J]. 邓霞,郑丹丹,庄琼馨,柳星星,钱粉红.  江苏大学学报(医学版). 2017(02)



本文编号：3055287