miR-129-5p靶向LARP1基因调控肺癌细胞顺铂耐药

发布时间：2021-03-04 13:58

　　目的探讨miR-129-5p能否通过调控La相关蛋白1（LARP1）表达,从而调节肺癌细胞对顺铂（DDP）的敏感性。方法通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和蛋白质印记（Western blot）检测肺癌细胞A549和肺癌顺铂耐药细胞A549/DDP中miR-129-5p、LARP1以及多药耐药相关蛋白1（MRP1）的表达水平。将A549/DDP分为对照组（NC）、miR-con组、miR-129-5p组、si-con组和si-LARP1组、miR-129-5p+pcDNA-con组、miR-129-5p+pcDNA-LARP1组。细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞存活率和对顺铂的半数抑制浓度（IC50）。Western blot检测细胞周期蛋白D1（CyclinD1）和MRP1蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验和Western blot检测验证miR-129-5p和LARP1的靶向调控关系。结果与A549细胞相比,A549/DDP细胞中miR-129-5p的表达水平降低,LARP1和MRP1的表达水平升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。与miR-con组比较,miR-... 

【文章来源】：西部医学. 2020,32(09)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

Western Blot检测LARP1、CyclinD1、MRP1蛋白的表达

与A549细胞比较,A549/DDP细胞中miR-129-5p的表达水平显著降低,LARP1 mRNA和LARP1蛋白、MRP1 mRNA和MRP1蛋白的表达水平显著升高(P <0.05),见表1、图1。2.2 过表达miR-129-5p抑制A549/DDP增殖,提高其对顺铂的敏感性

与NC组和si-con组比较,si-LARP1组A549/DDP细胞LARP1的表达水平显著降低(P<0.05),表明沉默LARP1的A549/DDP细胞株构建成功。与NC组和si-con组比较,si-LARP1组A549/DDP细胞CyclinD1和MRP1蛋白的表达水平显著降低,细胞存活率显著降低,细胞对顺铂的IC50显著降低(P均 <0.05)。见表3、图3。图3 Western Blot检测LARP1、CyclinD1和MRP1蛋白的表达

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3063337