彩叶芋‘红桃K’遗传转化体系的优化及AtPAP1基因与玉米Lc基因的导入
发布时间：2021-03-07 20:17
彩叶芋（Caladium bicolor）为单子叶植物纲天南星科五彩芋属的多年生草本植物,其叶片常嵌有彩色斑点或彩色叶脉,是重要的观叶植物,适于温室栽培观赏,因此筛选培育彩叶芋新材料或新品种,是提高市场竞争力的有效途径。由于花青素苷对彩叶植物叶色多彩的形成起主要作用,利用分子育种调控彩叶植物中花青素苷的合成,有望快速获得新材料或新品种。有研究表明,在花青素苷合成途径中,转录因子通过MYB-bHLH复合物或者MYB-bHLH-WD40复合物（MBW复合物）直接调控结构基因的转录与表达,从而影响花青素苷在植物中的分布和含量。本研究优化了彩叶芋‘红桃K’的遗传转化体系,通过农杆菌介导的叶盘法,将植物表达载体pC1300-PAP1+Lc导入彩叶芋‘红桃K’中,探究MYB型转录因子AtPAP1基因与bHLH型转录因子玉米Lc基因的异源表达对转基因彩叶芋的表型变化,为进一步的园林绿化育种提供技术支持与理论参考。主要研究结果如下:（1）优化了‘红桃K’的遗传转化体系。以彩叶芋‘红桃K’为材料,探索了与遗传转化相关的参数,筛选抗生素浓度、抑菌抗生素浓度、预培养时间、农杆菌侵染时间、共培养时间、共培养基...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
花青素苷的生物合成途径及关键节点[18]
西南大学硕士学位论文优化转化体系；利用农杆菌介导的叶盘法，将植物表达载体 pC1300-PAP1+Lc 导入彩叶芋‘红桃 K’中，探究 MYB 型转录因子 AtPAP1 基因与 bHLH 型转录因子玉米 Lc 基因的异源表达对转基因彩叶芋的表型变化与影响，为进一步的彩叶植物育种提供技术支持与理论参考，为本实验室今后利用基因工程技术改变彩叶芋叶色奠定基础。2.2 研究技术路线
图 3-1 不同浓度的潮霉素对彩叶芋‘红桃 K’叶盘再生的影响Fig.3-1 Effectsof Hyg concentrations on leaf discs regeneration of Caladium bicolor ‘Hongtao K3.3.2 羧苄青霉素浓度的确定羧苄青霉素对农杆菌有抑制作用，试验将‘红桃 K’叶盘置于附加不同浓度的羧苄青霉素愈伤诱导培养基中，以不加羧苄青霉素的培养基做对照。经 4 周观察与统计，发现羧苄青霉素浓度在 300mg/L-700mg/L 之间时，对彩叶芋红桃 K 外植体的影响以及愈伤形成不显著，与对照比较无明显差别（如表 3-3），表明羧苄青霉素在 300mg/L-700mg/L 之间对彩叶芋‘红桃 K’形成愈伤没有明显影响。由图 3-2 可以看出，随着培养时间的增加，彩叶芋‘红桃 K’叶盘成活数量呈现略微下降的趋势，并且不是所有成活的叶盘都形成了愈伤组织，从试验的观察中发现没有形成愈伤的叶盘切口处没有出现膨大现象。试验结果表明，羧苄青霉素在周内对彩叶芋外植体没有严重危害，但随着外植体在羧苄青霉素中的时间增加，存在羧苄青霉素抑制彩叶芋外植体正常生长的可能。根据这一试验判断，可以在筛选中选用羧苄青霉素作为抑菌抗生素。为防止筛选培养时农杆菌的过度生长，使用羧苄青霉素的浓度不能过低，综合本试验获
【参考文献】：
期刊论文
[1]农杆菌介导陆地棉棕彩选1号茎尖遗传转化[J]. 高俊山,许磊,陈文,沈知临,蔡永萍,林毅. 核农学报. 2017(10)
[2]珙桐MYB转录因子DiMYB1基因的克隆及表达分析[J]. 戴鹏辉,任锐,曹福祥,刘志明,李萌. 植物生理学报. 2016(08)
[3]以蝴蝶兰种子萌发的原球茎为受体的遗传转化体系构建[J]. 张和臣,董晓宇,王利民,张晶,孟月娥,符真珠,李艳敏. 河南农业科学. 2016(08)
[4]转杜仲几丁质酶基因EuCHIT1番茄提高对灰霉病的抗性[J]. 郭林霞,董旋,赵德刚. 植物生理学报. 2016(05)
[5]基于花青素苷合成和呈色机理的观赏植物花色改良分子育种[J]. 戴思兰,洪艳. 中国农业科学. 2016(03)
[6]利用“微创刷”法获得抗草甘膦转基因大豆[J]. 荣非,王罡,季静,王萍,董歆,高海伶,曹越平,邱丽娟. 大豆科学. 2015(02)
[7]黄瓜遗传转化体系优化及表皮毛基因Gl的转化[J]. 李月,赵俊龙,杨绪勤,杨俊俊,潘俊松,何欢乐,蔡润. 上海交通大学学报(农业科学版). 2014(06)
[8]农杆菌介导的华南型黄瓜遗传转化体系的初步研究[J]. 杨宏,刘小俊,梁根云,房超,刘独臣,蔡鹏,李跃建. 西南农业学报. 2014(04)
[9]植物花青素合成代谢途径及其分子调控[J]. 贾赵东,马佩勇,边小峰,杨清,郭小丁,谢一芝. 西北植物学报. 2014(07)
[10]观赏植物分子育种研究进展[J]. 戴思兰,黄河,付建新,洪艳. 植物学报. 2013(06)
博士论文
[1]葡萄风信子MYB和bHLH转录因子对花青苷合成的调控研究[D]. 陈凯利.西北农林科技大学 2017
[2]烟草花青素合成相关基因及转录因子基因的克隆与功能验证研究[D]. 白延红.西北农林科技大学 2012
硕士论文
[1]AtPAP1基因在烟草中的过表达及花青素合成调控[D]. 武东玲.河南农业大学 2014
[2]夏堇组织培养与基因转化研究[D]. 梁峥.西北农林科技大学 2013
本文编号：3069739
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
花青素苷的生物合成途径及关键节点[18]
西南大学硕士学位论文优化转化体系；利用农杆菌介导的叶盘法，将植物表达载体 pC1300-PAP1+Lc 导入彩叶芋‘红桃 K’中，探究 MYB 型转录因子 AtPAP1 基因与 bHLH 型转录因子玉米 Lc 基因的异源表达对转基因彩叶芋的表型变化与影响，为进一步的彩叶植物育种提供技术支持与理论参考，为本实验室今后利用基因工程技术改变彩叶芋叶色奠定基础。2.2 研究技术路线
图 3-1 不同浓度的潮霉素对彩叶芋‘红桃 K’叶盘再生的影响Fig.3-1 Effectsof Hyg concentrations on leaf discs regeneration of Caladium bicolor ‘Hongtao K3.3.2 羧苄青霉素浓度的确定羧苄青霉素对农杆菌有抑制作用，试验将‘红桃 K’叶盘置于附加不同浓度的羧苄青霉素愈伤诱导培养基中，以不加羧苄青霉素的培养基做对照。经 4 周观察与统计，发现羧苄青霉素浓度在 300mg/L-700mg/L 之间时，对彩叶芋红桃 K 外植体的影响以及愈伤形成不显著，与对照比较无明显差别（如表 3-3），表明羧苄青霉素在 300mg/L-700mg/L 之间对彩叶芋‘红桃 K’形成愈伤没有明显影响。由图 3-2 可以看出，随着培养时间的增加，彩叶芋‘红桃 K’叶盘成活数量呈现略微下降的趋势，并且不是所有成活的叶盘都形成了愈伤组织，从试验的观察中发现没有形成愈伤的叶盘切口处没有出现膨大现象。试验结果表明，羧苄青霉素在周内对彩叶芋外植体没有严重危害，但随着外植体在羧苄青霉素中的时间增加，存在羧苄青霉素抑制彩叶芋外植体正常生长的可能。根据这一试验判断，可以在筛选中选用羧苄青霉素作为抑菌抗生素。为防止筛选培养时农杆菌的过度生长，使用羧苄青霉素的浓度不能过低，综合本试验获
【参考文献】：
期刊论文
[1]农杆菌介导陆地棉棕彩选1号茎尖遗传转化[J]. 高俊山,许磊,陈文,沈知临,蔡永萍,林毅. 核农学报. 2017(10)
[2]珙桐MYB转录因子DiMYB1基因的克隆及表达分析[J]. 戴鹏辉,任锐,曹福祥,刘志明,李萌. 植物生理学报. 2016(08)
[3]以蝴蝶兰种子萌发的原球茎为受体的遗传转化体系构建[J]. 张和臣,董晓宇,王利民,张晶,孟月娥,符真珠,李艳敏. 河南农业科学. 2016(08)
[4]转杜仲几丁质酶基因EuCHIT1番茄提高对灰霉病的抗性[J]. 郭林霞,董旋,赵德刚. 植物生理学报. 2016(05)
[5]基于花青素苷合成和呈色机理的观赏植物花色改良分子育种[J]. 戴思兰,洪艳. 中国农业科学. 2016(03)
[6]利用“微创刷”法获得抗草甘膦转基因大豆[J]. 荣非,王罡,季静,王萍,董歆,高海伶,曹越平,邱丽娟. 大豆科学. 2015(02)
[7]黄瓜遗传转化体系优化及表皮毛基因Gl的转化[J]. 李月,赵俊龙,杨绪勤,杨俊俊,潘俊松,何欢乐,蔡润. 上海交通大学学报(农业科学版). 2014(06)
[8]农杆菌介导的华南型黄瓜遗传转化体系的初步研究[J]. 杨宏,刘小俊,梁根云,房超,刘独臣,蔡鹏,李跃建. 西南农业学报. 2014(04)
[9]植物花青素合成代谢途径及其分子调控[J]. 贾赵东,马佩勇,边小峰,杨清,郭小丁,谢一芝. 西北植物学报. 2014(07)
[10]观赏植物分子育种研究进展[J]. 戴思兰,黄河,付建新,洪艳. 植物学报. 2013(06)
博士论文
[1]葡萄风信子MYB和bHLH转录因子对花青苷合成的调控研究[D]. 陈凯利.西北农林科技大学 2017
[2]烟草花青素合成相关基因及转录因子基因的克隆与功能验证研究[D]. 白延红.西北农林科技大学 2012
硕士论文
[1]AtPAP1基因在烟草中的过表达及花青素合成调控[D]. 武东玲.河南农业大学 2014
[2]夏堇组织培养与基因转化研究[D]. 梁峥.西北农林科技大学 2013
本文编号：3069739
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