TTYH1基因沉默对肺癌SPC-A-1BM细胞侵袭性的影响研究

发布时间：2021-03-10 00:38

　　目的:探讨Tweety家族成员1（tweety-homolog 1,TTYH1）基因在正常肺组织细胞株16HBE和高骨转移性人肺腺癌细胞株SPC-A-1BM中的基因表达情况;并进一步探究沉默TTYH1基因对肺癌细胞株SPC-A-1BM的侵袭能力及其对基质金属蛋白酶9（Matrix metalloproteinases 9,MMP9）表达的影响。方法:本实验首先通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（Quantitative Real-time reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR）技术检测TTYH1基因在肺癌SPC-A-1BM细胞和正常肺组织16HBE细胞中的表达情况,分析两种细胞中TTYH1表达水平是否存在差异。其次通过RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术合成小干扰RNA序列（siRNA）靶向沉默TTYH1基因。实验共分为3组:1组为空白对照组（无siRNA干扰组,non-siRNA组）,2组为阴性对照组（TTYH1非特异性siRNA阴性对照干扰组,siRNA-NC组）,3组为实验组（TTY... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

HBE细胞株和SPC-A-1BM细胞株中TTYH1mRNA表达情况

图2 FAM标记的siRNA转染SPC-A-1BM细胞72小时（20×）A 沉默 TTYH1 基因下调肺癌 SPC-A-1BM 细胞 TTYH1、MM 表达实验已证实，TTYH1在肺癌SPC-A-1BM细胞株中的表达明显高于正常E细胞株。设置空白对照组、阴性对照组及实验组肺腺癌SPC-A-1BM细量的PBS、siRNA-NC及siRNA-TTYH1转染后72h，应用qRT-PCR对 mRNA及MMP9 mRNA表达量进行检测，同样根据各组所得的Ct值作为内参，应用2-△△Ct法进行三组间TTYH1 mRNA及MMP9 mRNA的相较。以空白对照组的TTYH1 mRNA相对表达量为参考值（即non-siRN mRNA的相对表达量的变化倍率F=1），实验组及阴性对照组的TT对表达量的变化倍率分别为0.35±0.02、0.98±0.02，抑制率分别为65%、NA-TTYH1显著抑制了TTYH1 mRNA的表达（P<0.01），而阴性对照组

阴性对照组相比较的统计学差异A B图3 沉默TTYH1基因对SPC-A-1BM细胞TTYH1 mRNA、MMP9 mRNA表达水平的影响4 siRNA 沉默 TTYH1 基因下调 SPC-A-1BM 细胞 TTYH1、MMP9 蛋白表达上述实验证明，siRNA沉默TTYH1基因后TTYH1 mRNA表达下调，并可下调


本文编号：3073747