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蜡梅花香相关基因BEAT的克隆和功能初步探究

发布时间:2021-03-10 12:18
  蜡梅(Chimonanthus praecox L.)冬天开花,香气怡人,广泛应用于切花和园林种植。芳香是蜡梅最为重要的观赏特征,其中乙酸苄酯是蜡梅的主要香气成分之一。本实验室前期对花香物质测定,发现芳香的H93株系乙酸苄酯含量较高,而无香的SW001株系不含乙酸苄酯。本文在实验室前期基础上,以蜡梅芳香的H93和无香的SW001株系为研究材料,比较2个材料3个时期乙酸苄酯含量的差异。筛选转录组库中控制乙酸苄酯合成的差异表达基因CpBEAT5、CpBEAT8,通过实时定量表达分析,结合乙酸苄酯释放量差异,寻找基因表达与花香释放之间的联系。另外将蜡梅CpBEAT5、CpBEAT8转入早花烟草,初步探究该基因的功能。主要研究结果如下:1.芳香株系H93中能检测到乙酸苄酯,但在无香株系SW001任何花期都未发现挥发物中有乙酸苄酯。在H93中不同花期乙酸苄酯的含量变化趋势与底物苯甲醇的含量变化趋势一致,在盛花期两者出现了最大值,与蜡梅花香总挥发物在盛花期达到最高峰现象相同。而在SW001中虽没检测到乙酸苄酯,但在末花期挥发物中存在微量的苯甲醇。2.经蛋白序列比对,CpBEAT5、CpBEAT8在... 

【文章来源】:华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:79 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

蜡梅花香相关基因BEAT的克隆和功能初步探究


花朵释放挥发性化合物种类可划分为三大类:萜类化合物,苯丙素/苯环形和脂肪酸衍生物(Joelleetal2014)

苯丙烷,途径,挥发性


图 2 苯环型和苯丙烷化合物的合成途径(Joelle et al 2014)Fig. 2 Schematic representation of the VOC phenylpropanoid/benzenoid biosyntheticpathway(Joelle et al 2014)5 植物 BAHD 酰基转移酶家族研究进展植物中需要经过很多修饰过程,才能完成次生代谢活动(John et al 2006)基化反应对其具有重大意义。酰基 CoA 和含硫、含氧、含氮的化合物在 BA作用下可形成许多物质,包括抵御病原微生物对植物造成伤害作用的物质的花青素、挥发性脂类(John et al 2006)。BAHD 的名称来源于该家族中有代表的酶。B 是指从仙女扇中克隆获得的参与挥发性酯类化合物合成的O-乙酰基转移酶(BEAT);A 是指从三花龙胆中克隆获得的参与花青素类基化的花青素羟化肉桂酰基转移酶(AHCT);H 是指从香石竹中克隆获得

形态变化,花被片,盛花期,称重


图 3 H933 和 SW001 在开花过程中的形态变化1:H93 露瓣期 ;2:H93 盛开期 ;3:H93 末花期;4:SW001 露瓣期 ;5:SW001 盛开期 ;6:SW001末花期;Fig.3 Flower morphological of H93 & SW001of different flowering periods: petal baring period of H93; 2: profuse flowering period of H93; 3 :final flowering period of H93; 4: petalbaring period of SW001; 5: profuse flowering period of SW001; 6 :final flowering period of SW001在吴昌陆等方法(吴昌陆等 1995)基础上,将蜡梅花分为露瓣期、盛花期、末三个时期,露瓣期, 花蕾显著增大,黄色;盛花期,花被片张开,未散粉;末,花已散粉,花被片逐渐萎缩。采取 H93 株系三个时期鲜花于事先已称重的l 样品瓶,每个样品为 3 朵,每个时期重复测定 3 个样品。3 朵取完后立即用封密封,并用天平进行称重。

【参考文献】:
期刊论文
[1]植物来源BAHD酰基转移酶家族研究进展[J]. 刘雨雨,莫婷,王晓晖,史社坡,刘晓,屠鹏飞.  中国中药杂志. 2016(12)
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[3]玉簪属植物花香研究[J]. 刘倩,孙国峰,张金政,李晓东.  中国农业科学. 2015(21)
[4]蜡梅SAMT基因在烟草中的遗传转化及其功能分析[J]. 庞宏东,向林,赵凯歌,李响,杨楠,陈龙清.  北京林业大学学报. 2014(05)
[5]蜡梅属品种国际登录工作紧锣密鼓[J]. 陈龙清.  中国花卉园艺. 2014(09)
[6]蜡梅科植物研究进展[J]. 陈龙清.  中国园林. 2012(08)
[7]蜡梅花挥发油成分的GC-MS分析[J]. 熊敏,周明芹,向林,吴华,陈龙清.  华中农业大学学报. 2012(02)
[8]花香代谢与调控研究进展[J]. 孔滢,孙明,潘会堂,张启翔.  北京林业大学学报. 2012(02)
[9]蜡梅花转录组数据分析及次生代谢产物合成途径研究[J]. 杨楠,赵凯歌,陈龙清.  北京林业大学学报. 2012(S1)
[10]文心兰不同花期及花朵不同部位香气成分的变化[J]. 张莹,李辛雷,王雁,田敏,范妙华.  中国农业科学. 2011(01)

博士论文
[1]蜡梅花香相关基因的克隆与功能分析[D]. 向林.华中农业大学 2009
[2]中国兰花挥发及特征花香成分研究[D]. 彭红明.中国林业科学研究院 2009

硕士论文
[1]蜡梅花挥发物组分测定及芳樟醇合成酶启动子分析[D]. 李莹莹.华中农业大学 2015
[2]蜡梅花挥发性组分与花色色素分析[D]. 余莉.华中农业大学 2013



本文编号:3074647

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