冬虫夏草线粒体基因特异性片段筛选与PCR鉴定研究

发布时间：2021-03-15 01:42

　　冬虫夏草Ophiocordyceps是麦角菌科真菌冬虫夏草菌（Ophiocordyceps sinensis（Berk.）Sacc.）寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫虫体的干燥复合体,具有补肺益肾、止血化痰的功效。冬虫夏草疗效显著,野生资源稀少和市场需求量大的矛盾,导致市售冬虫夏草假冒伪劣的现象层出不穷。冬虫夏草的准确鉴别是保障临床用药安全的关键。本研究以整个冬虫夏草线粒体基因为研究对象,筛选在线粒体基因上可以鉴别虫草与其他物种的特异性片段,最终从虫草线粒体基因组中筛选出cob和cox1两个特异性基因,为进一步筛选虫草分子鉴定和物种进化方面的理想分子标记提供了理论依据。并且利用线粒体基因cob和cox1序列建立了冬虫夏草的SS-PCR快速鉴定的方法,进一步考察了此方法的准确性。最后考察了滤纸法对冬虫夏草和中药材DNA提取的适应性,为冬虫夏草和中药材的现场快检提供了理论依据。本研究以冬虫夏草线粒体基因cob和cox1序列的部分片段为靶标,设计筛选出4对冬虫夏草特异鉴定引物9f、21f、30f、35f,这4对引物仅能特异扩增冬虫夏草DNA,不能扩增其它混伪品DNA,检测限低至5ng。通... 

【文章来源】：成都中医药大学四川省

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

基于cob基因的系统发育树

基于cox1基因的系统发育树

对特异引物的扩增电泳图


本文编号：3083333