白囊耙齿菌锰过氧化物酶基因的表达和酶学分析

发布时间：2021-03-15 10:48

　　将源于白囊耙齿菌（Irpex lacteus）的一种锰过氧化物酶（manganese peroxidase,MnP）基因进行密码子优化后连接于表达载体pET-28a,并在E.coli BL21中表达,重组锰过氧化物酶经镍离子亲和层析分离得到纯酶,其分子质量和比酶活分别为43 ku和24 U/mg。酶学性质研究表明,重组锰过氧化物酶的最适反应温度为40℃,最适反应pH值为3.0,且该重组酶在20℃～50℃、 pH 2.5～3.5范围内稳定性较好。当添加的金属离子浓度为10 mmol/L,Na⁺、Ca²⁺和Mg²⁺对重组酶酶活有促进作用;当添加的金属离子浓度为5 mmol/L时,除Ca²⁺外,其他金属离子均能抑制重组酶的活力;Fe²⁺、Cu²⁺在10、5和1 mmol/L离子浓度下均对重组酶有明显的抑制作用。重组锰过氧化物酶在48 h内可以有效降解玉米秸秆中35.8%及麸皮中27.3%的木质素,降解效果显著。 

【文章来源】：生物学杂志. 2020,37(06)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

PCR扩增得到的pET-28a和MnP线性化的电泳图以及菌液PCR的结果

重组蛋白MnP表达及纯化的SDS-PAGE鉴定

温度对重组MnP酶活力和热稳定性的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]重组人溶菌酶在毕赤酵母中的诱导表达及活性研究[J]. 李浩杰,杨雪珍,蓝文康,张伟崇,王晔,何兰花,林树茂,刘燊,张辉华.  家畜生态学报. 2019(10)
[2]木质素降解酶系染料降解原理概述[J]. 郭玉敏,代广辉.  河北建筑工程学院学报. 2019(02)
[3]范氏法与王玉万法植物纤维素测定方法探讨[J]. 李朝英,郑路,莫世宇.  浙江农业科学. 2019(03)
[4]诱导剂对乳白耙齿菌产MnP活性影响研究[J]. 何平,张健,池玉杰.  江西农业大学学报. 2018(05)
[5]白囊耙齿菌产锰过氧化物酶条件优化及其对染料的脱色[J]. 罗鑫,覃育贤,于存.  菌物学报. 2018(09)
[6]微生物遗传转化筛选标记及其生物安全性的研究进展[J]. 乐易林,孙宇,王洪成,邵蔚蓝.  微生物学通报. 2016(08)
[7]白腐真菌产锰过氧化物酶的研究[J]. 余梅,阮小文,谭丽泉,卢玉娟.  化学与生物工程. 2014(11)
[8]锰过氧化物酶的生物信息学分析[J]. 张娱,曾光明,刘利锋.  广州化工. 2012(11)
[9]高活力锰过氧化物酶菌株的选育及其酶学性质初探[J]. 白娜,顿宝庆,宋立立,奚亚军,李桂英,路明.  西北农林科技大学学报(自然科学版). 2010(11)
[10]金属离子对纤维素酶活力影响的研究[J]. 李德莹,龚大春,田毅红,余燕.  酿酒科技. 2009(06)

博士论文
[1]粟酒裂殖酵母生物安全性高效表达载体的构建及优化[D]. 王洪成.南京师范大学 2013



本文编号：3084052