中华绒螯蟹脂肪酸代谢相关基因的克隆及表达分析
发布时间：2021-03-19 12:08
中华绒螯蟹是我国重要的水产经济物种之一。该物种在全国广泛养殖,2017年全国总产量达道75万吨。肝胰腺是河蟹脂类储存和代谢的主要场所,通常含有30-80%的脂肪含量,是研究甲壳动物脂质代谢的良好模型。近年来水产动物的脂质代谢机制是一项研究热点,河蟹在脂质代谢研究方面也取得了很大进展,而关于河蟹脂肪酸β-氧化和胆固醇代谢相关基因方面的研究鲜有报道。因此,脂肪酸β-氧化关键基因方面,本研究验证了河蟹的三个CPT亚型的ORF,分析了它们的分子特征和组织表达模式,并探究了植物油替代饲料中的鱼油对中华绒螯蟹的肝胰腺中CPT-mRNA表达的影响。胆固醇代谢关键基因方面,验证了河蟹SOAT1的ORF,然后分析了该基因的分子特性和组织分布,接着研究了不同卵巢发育时期主要组织SOAT1表达和胆固醇含量的变化规律,最后通过酵母转化方法探究SOAT1的功能。具体的研究结果如下:1.中华绒螯蟹CPT家族基因的克隆及表达分析肉碱棕榈酰基转移酶（CPT）家族由CPT1和CPT2组成,它们转运长链脂肪酸进入线粒体以进行β氧化。本研究中,从中华绒螯蟹中获得了CPT三个亚型（CPT 1α、CPT 1β和CPT 2）的完...
【文章来源】：上海海洋大学上海市
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
CPT1、CACT和CPT2联合作用将酰基辅酶A转移到线粒体[3]
图 2 人体内 ACAT 的作用[54]Fig.2 Role of humanACAT in vivo和分子特性993 鉴定出第一个 ACAT 基因[56]，ACAT 家二酰甘油酰基转移酶 DGAT1[62]。这些酶是膜结族的创始成员。MBOATs 是多跨膜酶，利用长物质作为它们的底物[63]。 这些酶在一长段疏H），在一段适度亲水的残基内含有近似不变的天 DGAT1 外，其他 MBOATs 还包括生长素辛酰基磷脂酰基转移酶[67]。人 ACAT1 位于两条不同每条染色体都含有一个特别的启动子：P1，与外上；P7，与可选的长外显子 Xa 相邻，位于 7 号
图 1-2 CPT 氨基酸序列的 NJ 进化树Fig.1-2 The neighbor-joining phylogenetic tree for CPTsCPTs 在中华绒螯蟹各组织中的表达分析种 CPT 亚型在雄蟹和雌蟹所有检测的组织中均有分布，包括血淋巴、肝胰腺、胃、脑神经、胸神经、三角膜、纳精囊、副性腺或卵巢，但同亚型之间的表达量存在差异(图 1-3。就雄蟹而言，CPT 1α 在肝胰高，其它组织 CPT 1α 的表达水平显著低于该组织（P < 0.05）。然而1β 最高的表达量在肌肉和心脏中，随后是肝胰腺、肠道和脑神经。特胰腺，不同组织中的 CPT 1β 表达量均高于 CPT 1α 和 CPT2。此外，腺中的表达量是最高的，而且显著高于其它组织（P < 0.05）。因此，分布与 CPT 1α 的相似。雌蟹而言，CPT1α 的表达量在肠道中最高，其次是肝胰腺，在胃中的组织中 CPT1β 的表达量在三种亚型中是最高的，这与在雄蟹中的相似
【参考文献】：
期刊论文
[1]酯酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶的研究进展[J]. 王晓微,高明明. 中国动脉硬化杂志. 2018(07)
[2]育肥饲料中混合植物油替代鱼油对中华绒螯蟹成体雄蟹性腺发育、脂质代谢、抗氧化及免疫性能的影响[J]. 赵磊,龙晓文,吴旭干,刘泽华,何杰,成永旭. 动物营养学报. 2016(02)
[3]中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）野生和养殖蟹种对池塘养殖成蟹可食率和营养品质的影响研究[J]. 何杰,吴旭干,龙晓文,赵恒亮,姜晓东,王幼鹏,成永旭. 海洋与湖沼. 2016(01)
[4]不同脂肪源对异育银鲫生长性能、机体成分、血清生化指标、体组织脂肪酸组成及脂质代谢的影响[J]. 张媛媛,刘波,戈贤平,刘文斌,谢骏,高启平,顾夕章. 水产学报. 2012(07)
[5]鲈鱼CPTⅠ基因cDNA克隆及表达分析[J]. 郑伟贤,钱云霞,童丽娟. 生物学杂志. 2012(03)
[6]中华绒螯蟹性腺发育期脂肪合成酶活性变化研究[J]. 刘立鹤,吴建开,周永奎,郑石轩,董爱华,陈立侨. 水利渔业. 2005(06)
[7]Enhancement of human ACAT1 gene expression to promote the macrophage-derived foam cell formation by dexamethasone[J]. Li YANG, Jin Bo YANG, Jia CHEN, Guang Yao YU, Pei ZHOU, Lei LEI, Zhen Zhen WANG, Catherine CY CHANG, XinYing YANG, Ta Yuan CHANG, Bo Liang LI State Key Laboratory of Molecular Biology, Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, 320 Yueyang Road Shanghai 200031, China. Department of Biochemistry, Dartmouth Medical School, Hanover, NH 03756; USA.. Cell Research. 2004(04)
[8]不同阶段中华绒螯蟹肝胰腺的脂类及脂肪酸组成[J]. 成永旭,堵南山,赖伟. 动物学报. 1998(04)
[9]中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）雌性生殖系统的组织学研究[J]. 薛鲁征,堵南山,赖伟. 华东师范大学学报(自然科学版). 1987(03)
硕士论文
[1]固城湖中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）可食部位营养组成与代谢的性别差异[D]. 陈志强.南京农业大学 2016
[2]黑曲霉中肉碱乙酰转移酶基因功能的研究[D]. 陈泓.天津科技大学 2014
本文编号：3089540
【文章来源】：上海海洋大学上海市
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
CPT1、CACT和CPT2联合作用将酰基辅酶A转移到线粒体[3]
图 2 人体内 ACAT 的作用[54]Fig.2 Role of humanACAT in vivo和分子特性993 鉴定出第一个 ACAT 基因[56]，ACAT 家二酰甘油酰基转移酶 DGAT1[62]。这些酶是膜结族的创始成员。MBOATs 是多跨膜酶，利用长物质作为它们的底物[63]。 这些酶在一长段疏H），在一段适度亲水的残基内含有近似不变的天 DGAT1 外，其他 MBOATs 还包括生长素辛酰基磷脂酰基转移酶[67]。人 ACAT1 位于两条不同每条染色体都含有一个特别的启动子：P1，与外上；P7，与可选的长外显子 Xa 相邻，位于 7 号
图 1-2 CPT 氨基酸序列的 NJ 进化树Fig.1-2 The neighbor-joining phylogenetic tree for CPTsCPTs 在中华绒螯蟹各组织中的表达分析种 CPT 亚型在雄蟹和雌蟹所有检测的组织中均有分布，包括血淋巴、肝胰腺、胃、脑神经、胸神经、三角膜、纳精囊、副性腺或卵巢，但同亚型之间的表达量存在差异(图 1-3。就雄蟹而言，CPT 1α 在肝胰高，其它组织 CPT 1α 的表达水平显著低于该组织（P < 0.05）。然而1β 最高的表达量在肌肉和心脏中，随后是肝胰腺、肠道和脑神经。特胰腺，不同组织中的 CPT 1β 表达量均高于 CPT 1α 和 CPT2。此外，腺中的表达量是最高的，而且显著高于其它组织（P < 0.05）。因此，分布与 CPT 1α 的相似。雌蟹而言，CPT1α 的表达量在肠道中最高，其次是肝胰腺，在胃中的组织中 CPT1β 的表达量在三种亚型中是最高的，这与在雄蟹中的相似
【参考文献】：
期刊论文
[1]酯酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶的研究进展[J]. 王晓微,高明明. 中国动脉硬化杂志. 2018(07)
[2]育肥饲料中混合植物油替代鱼油对中华绒螯蟹成体雄蟹性腺发育、脂质代谢、抗氧化及免疫性能的影响[J]. 赵磊,龙晓文,吴旭干,刘泽华,何杰,成永旭. 动物营养学报. 2016(02)
[3]中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）野生和养殖蟹种对池塘养殖成蟹可食率和营养品质的影响研究[J]. 何杰,吴旭干,龙晓文,赵恒亮,姜晓东,王幼鹏,成永旭. 海洋与湖沼. 2016(01)
[4]不同脂肪源对异育银鲫生长性能、机体成分、血清生化指标、体组织脂肪酸组成及脂质代谢的影响[J]. 张媛媛,刘波,戈贤平,刘文斌,谢骏,高启平,顾夕章. 水产学报. 2012(07)
[5]鲈鱼CPTⅠ基因cDNA克隆及表达分析[J]. 郑伟贤,钱云霞,童丽娟. 生物学杂志. 2012(03)
[6]中华绒螯蟹性腺发育期脂肪合成酶活性变化研究[J]. 刘立鹤,吴建开,周永奎,郑石轩,董爱华,陈立侨. 水利渔业. 2005(06)
[7]Enhancement of human ACAT1 gene expression to promote the macrophage-derived foam cell formation by dexamethasone[J]. Li YANG, Jin Bo YANG, Jia CHEN, Guang Yao YU, Pei ZHOU, Lei LEI, Zhen Zhen WANG, Catherine CY CHANG, XinYing YANG, Ta Yuan CHANG, Bo Liang LI State Key Laboratory of Molecular Biology, Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, 320 Yueyang Road Shanghai 200031, China. Department of Biochemistry, Dartmouth Medical School, Hanover, NH 03756; USA.. Cell Research. 2004(04)
[8]不同阶段中华绒螯蟹肝胰腺的脂类及脂肪酸组成[J]. 成永旭,堵南山,赖伟. 动物学报. 1998(04)
[9]中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）雌性生殖系统的组织学研究[J]. 薛鲁征,堵南山,赖伟. 华东师范大学学报(自然科学版). 1987(03)
硕士论文
[1]固城湖中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）可食部位营养组成与代谢的性别差异[D]. 陈志强.南京农业大学 2016
[2]黑曲霉中肉碱乙酰转移酶基因功能的研究[D]. 陈泓.天津科技大学 2014
本文编号：3089540
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