长花烟抗野火病候选基因功能探究

发布时间：2021-04-07 08:44

　　近年来烟草野火病已成为黑龙江省烟草行业的主要病害之一,充分利用抗源材料培育抗性烟草品种是应对该病害的有效途径。虽然现有抗病烟草材料中抗病基因的性质及抗病机制尚不明了,但在番茄中Pto基因通过ETI（Effector-triggered immunity）路径对抗该病害的机制已早有报道。长花烟（Nicotiana alata Link et Otto）是烟草野火病0号小种的抗源材料,本文锚定ETI路径选择了一源自转录组分析中的候选基因NL-HERK,通过过表达和RNAi策略检验其功能,为长花烟中ETI路径阐释提供研究基础。本研究构建长花烟NL-HERK过表达载体pROK II-NL-HERK及番茄Po基因过表达载体pROK II-Topto。以感病烟草LJ0520为受体材料,利用农杆菌介导法进行遗传转化,获得转长花烟NL-HERK的烟草株共24株;以感病烟草LJ911为受体材料,利用农杆菌介导法进行遗传转化,获得转番茄Pto的烟草共18株。采用针刺法对上述转基因烟草和野生型烟草进行病理试验并进行分子鉴定,结果发现,转基因烟草对烟草野火病并未产生抗性。为进一步验证NL-HERK的功能,构建... 

【文章来源】：牡丹江师范学院黑龙江省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－１实验技术路线??Ｆｉｇ．?２－１?Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ?Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ?Ｒｏｕｔｅ??

图３－１－１烟草基因组ＤＮＡ??Ｆｉｇ．?３－１－１?Ｔｏｂａｃｃｏ?ｇｅｎｏｍｉｃ?ＤＮＡ??因组ＤＮＡ为模板，以ＮＬ－ＨＥＲＫ１－Ｆ／ＮＬ－ＨＥＲ片段大小为１４２１?ｂｐ，经１％琼脂糖凝胶电泳现特异性条带，说明ＰＣＲ扩增成功。??■??????图３－１－２目的基因的扩增??ＭａｒｋｅｒＤＬ２０００?；?ｈ?ＰＣＲ?产物??

建??扩增??法提取长花烟烟草基因组ＤＮＡ，结果如图３－１－１，主板。??ｍｍ??图３－１－１烟草基因组ＤＮＡ??Ｆｉｇ．?３－１－１?Ｔｏｂａｃｃｏ?ｇｅｎｏｍｉｃ?ＤＮＡ??烟基因组ＤＮＡ为模板，以ＮＬ－ＨＥＲＫ１－Ｆ／ＮＬ－ＨＥＲＫ１－目的片段大小为１４２１?ｂｐ，经１％琼脂糖凝胶电泳检测，?ｂｐ出现特异性条带，说明ＰＣＲ扩增成功。??


本文编号：3123173