基质重塑相关基因7（MXRA7）在急性早幼粒白血病发展中的作用及机制研究

发布时间：2021-04-09 01:41

　　目的:基质重塑相关基因7（MXRA7）是基质重塑家族的一员,目前已有的研究表明:MXRA7的缺失可以减轻四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤;MXRA7促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化;MXRA7在银屑病的发展中起一个负调控作用等。但是关于MXRA7在白血病的中作用并未有过报道。我们通过公共数据库分析发现,与正常人相比,MXRA7在急性早幼粒白血病中表达量异常升高,说明MXRA7可能参与调控急性早幼粒白血病的发生发展。因此我们使用了急性早幼粒白血病细胞NB4细胞株来研究MXRA7在急性早幼粒白血病中的作用及相关机制。方法:（1）利用BloodSpot和Leukemia Gene Atlas这两个与造血和白血病相关的公共数据库来分析MXRA7在急性髓系白血病中的表达情况。（2）收集急性早幼粒白血病病人（APL或AML-M3）、急性B淋巴细胞白血病病人（B-ALL）、急性T淋巴细胞白血病病人（T-ALL）、正常供体的骨髓样本以及白血病细胞系,应用荧光定量PCR及Western blot检测MXRA7的表达情况。（3）应用慢病毒系统分别构建MXRA7过表达和敲低的NB4稳转细胞系,应用荧光定量PC... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１：数据库分析ＭＸＲＡ７在白血病中表达量的变化??（Ａ－Ｂ）?Ｂｌｏｏｄｓｐｏｔ公共数据库中?

基质重塑相关基因７（ＭＸＲＡ７＞在急性早幼粒白血病发展中的作用及机制研究?３结果??株急性髓系白血病细胞株（ＮＢ４、ＨＬ－６０、ＴＨＰ－丨、ＳＨＮ１），１株急性Ｔ淋巴细胞??白血病细胞株（Ｍ０ＬＴ－４），２株急性Ｂ淋巴细胞白血病细胞株（６９７、Ｒｅｈ），荧??光定量ＰＣＲ和蛋白免疫印迹实验验证ＭＸＲＡ７在ＡＭＬ、Ｂ－ＡＬＬ和Ｔ－ＡＬＬ的细胞??系中的表达量均高于正常供体（图２－ＩＢ）。??Ａ?Ｂ??８０－Ｉ?２５－１??ｒ?ｆ！２〇＇?ｉ??１１?－?？ｊ?Ｉ?ｒ，?■！??ＭＸＲＡ７?確細秦?????ＭＸＲＡ７?［?＾?＊＊＊??ｇａｐｄｈ?ｍｂｖ?ｍｍｍ?■丨丨丨丨丨ｍｍｍｍ?ｇａｐｄｈ?ｍｍ?ｍｍ?ｍｍ?ｍｍ?ｍｍ??ＮＢＭ?Ｂ－ＡＬＬ?Ｔ－ＡＬＬ?ＡＭＬ－Ｍ３?ＮＢ４?ＨＬ－？０?ＴＨＰ－１?ＳＨＩ－１?ＭＯＬＴ－４?￥９７?Ｒｅｈ??图２－Ｉ：?ＭＸＲＡ７在正常供体和急性白血病病人骨髓样本以及各种白血病细胞系??中的表达分析??（Ａ?）?ＲＴ－ｑＰＣＲ?和?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?实验检测?ＭＸＲＡ７?在正常供体、Ｂ－ＡＬＬ、Ｔ－ＡＬＬ?和??ＡＭＬ－Ｍ３?（ＡＰＬ）病人骨硫样本中的表达量??（Ｂ?）?ＲＴ－ｑＰＣＲ?和?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?实验检测?ＭＸＲＡ７?在?ＡＭＬ?细胞株（ＮＢ４、ＨＬ－６０、??ＴＨＰ－ｌ、ＳＨＩ－ｌ?）、Ｂ－ＡＬＬ?细胞株（６９７、Ｒｅｈ?）和丁－ＡＬＬ?细胞株（Ｍ０ＬＴ－４?）中的??表达量??ＭＸＲＡ７基因在小鼠中位于ＩＩ号染色体上，在人类中位于１７号染色体上。根??据现有的基因组文库数裾，人类的ＭＸＲＡ７基因可能通过可变剪切机制产生三个??

??．?ｉｆ?１Ｍ＇?；■?：?ｌ?ｎｏ．??ｓｉ?Ｉ?２０?－Ｊ－?＊＊?＊?ｉ??￣±￣?？?：?ｉＳ?孙?＂ＯＴ?／?Ｉｓ?ｓｏ?■：?？?＊＊??至Ｊ?？二知象－最ｉ?Ｊ一＿?．：沪每?１?Ｊ二吞？?▲??ＮＢＭ?ＡＭＬ－Ｍ３?Ｂ－ＡＬＬ?Ｔ－ＡＬＬ?ＮＢＭ?ＡＭＬ－Ｍ３?日－ＡＬＬ?Ｔ－ＡＬＬ?ＮＢＭ?ＡＭＬ－Ｍ２?Ｂ－ＡＬＬ?Ｔ＞ＡＬＬ??ｎ＊１９?ｎ＊１８?ｎ？１７?ｎ＊１６?ｎ＝１６?ｎ＝１７?ｎ＝１７?ｎ＝１４?ｎ＝２０?ｎ＝１８?ｎ＝１７?ｎ＝１６??图２－２：?ＭＸＲＡ７基因的三个转录本在几种白血病病人骨髓中的表达量??（Ａ?）?ＲＴ－ｑＰＣＲ?检测?ＭＸＲＡ７?ｉｓｏｆｏｍｉ－２８?在正常供体、ＡＭＬ－Ｍ３、Ｂ－ＡＬＬ?和?Ｔ－ＡＬＬ??病人骨髓＿样本中的表达量??（Ｂ?）?ＲＴ－ｑＰＣＲ?检测?ＭＸＲＡ７－ｉｓｆｏｒｍ－２９?在正常供体、ＡＭＬ－Ｍ３、Ｂ－ＡＬＬ?和?Ｔ－ＡＬＬ??病人骨髓＿样本中的表达量??（Ｃ?）ＲＴ－ｑＰＣＲ?实验检测?ＭＸＲＡ７－ｉｓｆｏｒｍ－３０?在正常供体、ＡＭＬ－Ｍ３、Ｂ－ＡＬＬ?和?Ｔ－ＡＬＬ??病人骨髓样本中的表达量??３．３?ＭＸＲＡ７过表达和敲低质粒载体构建及ＮＢ４稳转细胞系的构建??为了体外研宄ＭＸＲＡ７基因在急性早幼粒白血病中的作用，我们分别构建了??过表达和敲低ＭＸＲＡ７的慢病毒质粒（图３－１Ａ），并经过２９３Ｔ细胞包装获得可??感染细胞的慢病毒（图３－ｌ?Ｂ）。??２４??


本文编号：3126665