果园土壤微生物中果胶降解酶的基因资源的挖掘与酶学特性研究

发布时间：2021-04-16 05:58

　　森林土壤微生物资源是森林资源的重要组成部分,在自然界中发挥着极其重要的作用。果园作为经济林的代表,是森林生态系统的重要组成部分。果园土壤微生物群落对果园生态系统健康的维系具有不可估量的价值,其土壤微生物中蕴含着极其丰富的基因资源。本文针对果园土壤微生物中存有的果胶降解相关酶类进行研究,并从中挖掘具有工业应用价值的果胶酶,研究结果将丰富果园土壤微生物资源利用价值,对于森林生态系统健康和基因资源挖掘也具有借鉴价值。在纺织工业中,传统的棉麻脱胶工艺是碱高温煮炼,不仅高能耗、排污量大而且影响棉麻织物的品质。酶精炼工艺是近几年新兴的棉麻脱胶工艺,使用的碱性果胶酶催化底物专一性强且反应条件温和,具有低污染、低耗能、高品质等优点,成为了棉麻脱胶工艺研究的热点。但目前大多数果胶酶仍然不能满足棉麻脱胶对酶制剂的特殊性质要求,有待于进一步挖掘和开发新的性质优良的棉麻脱胶用果胶酶。基于高通量宏基因测序技术,本研究从富含果胶的果园土壤的宏基因组中挖掘得到4个果胶酸裂解酶基因pela,pelb，pelc和peld。将4个果胶酸裂解酶基因分别连接原核表达载体pET30a（+）和真核表达载体pPIC9,用于验证基因... 

【文章来源】：山西农业大学山西省

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

果胶的结构

图２－１质粒ｐＥＴ３０ａ（＋）－ｗ／的构建??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｐＥＴ３０ａ（＋）－ｐ＾／??

其质粒的浓度控制在酶的消化范围内。酶切体系在３７°Ｃ消化２?ｈ，消化完成后用浓??度为１％的琼脂糖凝胶电泳后，用琼脂糖凝胶回收试剂盒回收载体片段。用Ｔ４?ＤＮＡ?ｌｉｇａｓｅ??连接经双酶切的ｐｅ／基因和ｐＰＩＣ９片段（如图２－２）。??ＢｇｌＵ??Ａｍｐｉｃｉｌｌｉｎ?５ＡＯＸ??＾?？?ＥｃｏＲ?ｌ??身?／??ＰＢＲ３２２?Ｍ??／?＼?＾??Ｂｇｉｎ?婦，，??１?＂ｆ?Ｎｏｒｌ??３ＡＯＸ?＼?４?３Ａ〇Ｘ（ＴＴ）??ＨＩＳ４??图２－２质粒ｐＰＩＣ－ｐｅ／的构建??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２?Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｐＰＩＣ－ｐｅ／??连接体系如下：??２１??

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
[1]碱性果胶酶菌株筛选及果胶裂解酶基因的克隆与表达[D]. 姚晓静.哈尔滨商业大学 2015
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本文编号：3140877