PAX1及PAX3基因在肛门直肠畸形大鼠胚胎后肠发育中的表达分析

发布时间：2021-04-19 20:31

　　目的:本研究利用乙烯硫脲（ethylenethiourea,ETU）在Wistar大鼠E10天对其胎鼠行灌胃致畸,建立ARMs（Anorectal Malformations,ARMs）动物模型,运用免疫组化（Immunohistochemical-paraffin section,IHC-P）,Western blot及q RT-PCR技术,对ARMs胎鼠和ARMs胎鼠肛门直肠发育过程中Pax1及Pax3基因在直肠末端表达水平进行检测,探讨ARMs发生与Pax1及Pax3基因的相关性。实验材料:1、实验动物:体重220²50gWistar雌性大鼠,体重250³00gWistar雄鼠（均购自中国辽宁长生生物技术有限公司）。2、实验试剂:乙烯硫脲,Ethylenethiourea,ETU（纯度99%）（购于德国Aldrich公司）,Pax1AB203065)、Pax3（AB180754）多克隆抗体（Abcam公司）;免疫组化试剂盒和DAB显色剂（均购于福州迈新生物技术开发有限公司）;GAPDH抗体（Proteintech TM公司）;蛋白提取试... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料与方法
    2.1 实验动物试剂及仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 ARMs动物模型的制作
        2.2.2 标本处理
        2.2.3 Pax1、Pax3 IHC-P
        2.2.4 Western blot 测定组织中 Pax1、Pax3 蛋白表达量
        2.2.5 qRT-PCR检测组织中Pax1、Pax3mRNA的表达
        2.2.6 数据整理
3 结果
    3.1 两组不同胎龄大鼠胚胎分布情况
    3.2 PAX1 在大鼠胚胎发育过程中末端直肠
        3.2.1 免疫组织化学染色结果
        3.2.2 Western blot PAX1 蛋白检测结果
        3.2.3 qRT-PCR pax1、Pax1 mRNA 结果
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
文献综述
    参考文献
攻读学位期间科研成绩
致谢
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]直肠肛门畸形环境致病因素的研究进展[J]. 王琛,郑伟,李龙.  临床小儿外科杂志. 2015 (04)
[2]Shh/Bmp4信号在直肠末端的表达与先天性肛门直肠畸形发生的关系[J]. 张娟,张志波,高红,王维林.  中华小儿外科杂志. 2008 (06)
[3]肛门直肠畸形的合并畸形[J]. 汪健.  临床外科杂志. 2008(05)
[4]EphB2基因多态性与先天性肛门直肠畸形的相关性研究[J]. 王大佳,白玉作,卢瑶,高红,张志波,黄英,王练英,袁正伟,王维林.  中华小儿外科杂志. 2008 (05)
[5]先天性肛门直肠畸形Hoxc-8基因表达的研究及其意义[J]. 邢茂青,王俊文,张金哲.  中华小儿外科杂志. 2004(03)
[6]先天性无肛畸形Gli2基因表达的研究[J]. 张志波,高红,王练英.  中华小儿外科杂志. 2001(06)



本文编号：3148259