肝脏特异性敲除YAP基因对胰岛素抵抗诱发肝纤维化的保护作用

发布时间：2021-04-25 19:41

　　目的探讨肝脏特异性敲除YAP基因对胰岛素抵抗诱发的肝纤维化是否具有保护作用,并初步揭示其机制。方法将2个月龄的肝脏特异性敲除YAP基因（L-YKO）小鼠及对照小鼠（CNTR）各20只,随机分为CNTR、L-YKO、CNTR+HFD、L-YKO+HFD四组:其中CNTR+HFD和L-YKO+HFD两组分别给予60%高脂饲料（HFD）4个月诱发胰岛素抵抗（IR）,CNTR和L-YKO两组分别给予普通维持饲料相同时间;分别检测体重、空腹血糖和随机血糖后,麻醉状态下处死动物,取肝脏称重并留取样本,取血清并检测肝功能指标丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）含量;HE染色观察肝脏病理形态学变化;Masson染色观察肝脏纤维化分布;通过Western-blot方法和（或）Real-Time PCR方法分别检测肝组织中细胞外基质蛋白（ECM）、纤维化相关基因、YAP信号通路和胰岛素信号通路IRS1/2→Akt→FoxO1在蛋白和mRNA水平的表达。结果1 HFD刺激4个月后,与CNTR小鼠相比,CNTR+HFD小鼠表现出:（1）体重和肝重显著增加;（2）小鼠血清中ALT和AST含量... 

【文章来源】：华北理工大学河北省

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略表
引言
第1章 实验研究
    1.1 实验动物、试剂和仪器
        1.1.1 动物及饲养条件
        1.1.2 实验试剂
        1.1.3 主要试剂配制
        1.1.4 实验仪器
        1.1.5 引物序列
    1.2 实验方法
        1.2.1 实验分组及处理
        1.2.2 动物表型检测
        1.2.3 实验动物取材
        1.2.4 小鼠血清肝功能指标检测
        1.2.5 制备石蜡切片
        1.2.6 肝脏病理形态学检测
        1.2.7 纤维化检测
        1.2.8 基因鉴定方法
        1.2.9 实时定量 PCR（RT-PCR）
        1.2.10 Western-blot方法
    1.3 统计学分析
    1.4 实验结果
        1.4.1 L-YKO小鼠基因型测定
        1.4.2 正常小鼠给予 HFD 后表型变化
        1.4.3 肝脏特异性敲除YAP基因后小鼠肝脏TGF-β1的表达
        1.4.4 小鼠肝脏敲除YAP基因对胰岛素抵抗诱发肝纤维化的影响及其机制探讨
    1.5 讨论
    1.6 小结
    结论
    参考文献
第2章 综述 非酒精性脂肪肝与胰岛素抵抗及其治疗进展
    2.1 NAFLD的高危因素与流行病学特征
        2.1.1 NAFLD与代谢综合症
        2.1.2 肝脏IR是NAFLD的一个重要特征
    2.2 IR是NAFLD的主要发病机制之一
        2.2.1 “一次打击”理论
        2.2.2 “二次打击”理论
        2.2.3 脂肪细胞因子紊乱
        2.2.4 肠道菌群失调
        2.2.5 自噬
    2.3 治疗
        2.3.1 饮食结构的改变
        2.3.2 运动治疗
        2.3.3 药物治疗
    2.4 小结与展望
    参考文献
致谢
在学期间研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]Genetic polymorphism in CD14 gene, a co-receptor of TLR4 associated with non-alcoholic fatty liver disease[J]. Shweta Kapil,Ajay Duseja,Bal Krishan Sharma,Bhupesh Singla,Anuradha Chakraborti,Ashim Das,Pallab Ray,Radha K Dhiman,Yogesh Chawla.  World Journal of Gastroenterology. 2016(42)
[2]Exploring the metabolic syndrome: Nonalcoholic fatty pancreas disease[J]. Roberto Catanzaro,Biagio Cuffari,Angelo Italia,Francesco Marotta.  World Journal of Gastroenterology. 2016(34)
[3]Resveratrol and fenofibrate ameliorate fructose-induced nonalcoholic steatohepatitis by modulation of genes expression[J]. Enas A Abd El-Haleim,Ashraf K Bahgat,Samira Saleh.  World Journal of Gastroenterology. 2016(10)



本文编号：3159977