洋葱AcCOP10、AcCDF2基因的克隆与功能分析

发布时间：2021-04-26 12:55

　　洋葱（Allium cepa L.）属百合科葱属,是严格的二年生植物,在适合的光周期下,当年形成鳞茎,经冬贮春化后,第二年再经适合光周期成花结实,从而完成生命周期。植物光周期调控涉及到众多调控元件,如光敏色素（PHYA,PHYB）,隐花色素（CryC）,时钟节律元件（CDF）及信号输出元件CO等。在植物的光周期调控通路中,光感受器（如光敏色素、隐花色素）接收光信号,通过信号转导形成胞内第二信使系统的级联传递来调节光形态建成反应。模式植物中的研究表明,COP是一个光形态建成的抑制剂,在拟南芥的多种光介导发育过程中起着中枢调节的作用,包括开花和下胚轴生长调控等。COP的丰度和活性对正常植物的发育是必不可少的,而且是CO-FT开花调控途径的中心抑制因子。而时钟调节通路则协调许多对光周期和温度变化的发育过程,其中较为主要的是CDF-FKF1调控元件,其中CDF基因作为内生节律基因,对植物发育和生理的协调不仅限于开花和下胚轴伸长,还涉及到耐寒和耐旱等多种逆境调节。COP及CDF可以抑制光周期调控途径中的CO/FT调节元件的昼夜节律和光周期信号转录水平,抑制植物开花,而且贯穿整个植物生命周期的诸多... 

【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 研究目的意义
    1.2 国内外研究进展
        1.2.1 高等植物成花机制概述
        1.2.2 COP及CDF的结构及功能
    1.3 技术路线
2 试验材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 细菌菌株与质粒载体
        2.1.3 主要试剂和试剂
        2.1.4 试验器材
    2.2 试验方法
        2.2.1 洋葱总RNA的提取和cDNA第一链的合成
            2.2.1.1 洋葱总RNA的提取
            2.2.1.2 cDNA第一链的合成
        2.2.2 AcCOP10,AcCDF2基因的克隆
        2.2.3 AcCOP10,AcCDF2生物信息学分析
        2.2.4 AcCOP10和AcCDF2基因的表达分析
        2.2.5 植物表达载体的构建
        2.2.6 遗传转化
        2.2.7 转基因植株拟南芥的表型分析
        2.2.8 转基因植株基因表达调控
        2.2.9 非生物胁迫实验
        2.2.10 下胚轴测量实验
3 结果与分析
    3.1 AcCOP10,AcCDF2基因的克隆及生物信息学分析
        3.1.1 AcCOP10,AcCDF2基因全长克隆
        3.1.2 AcCOP10,AcCDF2二级结构预测
        3.1.3 同源序列比对
        3.1.4 进化树分析
    3.2 AcCOP10,AcCDF2的表达模式分析
    3.3 植物表达载体的构建与鉴定
        3.3.1 过表达载体的构建
        3.3.2 RNAi载体的构建
        3.3.3 农杆菌转化
    3.4 AcCOP10,AcCDF2功能分析
        3.4.1 转基因阳性植株的鉴定
        3.4.2 转基因拟南芥植株的成花及分析
        3.4.3 AcCDF2其他功能分析
        3.4.4 转AcCOP10基因拟南芥植株下胚轴表型及分析
4 讨论
    4.1 AcCOP10,AcCDF2家族基因的功能分析
        4.1.1 AcCOP10,AcCDF2家族基因对开花的调控
        4.1.2 对非生物胁迫的响应
        4.1.3 其他功能分析
    4.2 AcCOP10,AcCDF2与其他调控基因间的互作关系
    4.3 下一步工作计划
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]我国植物光信号转导研究进展概述[J]. 景艳军,林荣呈.  植物学报. 2017(03)
[2]水稻开花光周期调控相关基因研究进展[J]. 孔德艳,陈守俊,周立国,高欢,罗利军,刘灶长.  遗传. 2016(06)
[3]茶树CsCDF1基因克隆及表达分析[J]. 胡娟,王丽鸳,韦康,成浩,张成才,张芬,吴立赟.  茶叶科学. 2015(05)
[4]COP1调控植物花色苷合成的研究进展[J]. 朱婷婷,林玲,杨涛,高帆,刘天宇,潘东明,夏惠.  分子植物育种. 2015(09)
[5]高等植物成花诱导调控的分子和遗传机制[J]. 宋杨,窦连登,张红军.  植物生理学报. 2014(10)
[6]光周期途径核心因子CO的开花调控机制[J]. 杨修勤,汤青林,宋明,王志敏.  植物生理学报. 2013(09)
[7]植物Dof基因家族功能研究进展[J]. 蔡晓锋,张余洋,张俊红,李汉霞,叶志彪.  植物生理学报. 2013(01)



本文编号：3161448