黄姑鱼的伪雄鱼诱导及其性别相关基因的筛查分析

发布时间：2021-05-08 02:38

　　黄姑鱼（Nibea albiflora）是我国重要的海水养殖鱼类,具有生长快、适应性广,抗逆性强等优点。在养殖中黄姑鱼的雌鱼比雄鱼生长快,因此研究黄姑鱼的性别控制及其性别决定机制,对于培育全雌黄姑鱼新品种具有重要意义。本研究优化了黄姑鱼伪雄鱼的诱导方法,同时利用转录组测序技术分析了其性别决定相关的基因,研究结果如下:1.通过投喂不同剂量的来曲唑（10/100 mg/kg）以及17α-甲基睾酮（MT,10 mg/kg）来诱导雌核发育黄姑鱼发生性逆转。实验设置了正常黄姑鱼和雌核发育黄姑鱼为对照组,分析不同处理组的生长性能、性比、性腺组织学结构等,进而筛选和优化诱导伪雄鱼的适宜方法。结果表明来曲唑（10/100 mg/kg）可以成功诱导雌核发育黄姑鱼100%逆转为表型雄鱼,同时还有促进精子生成的作用,但在处理期间对黄姑鱼的生长有轻微的抑制作用。经组织切片观察发现使用来曲唑诱导后的性腺均具有正常的精巢结构,发育良好,且在诱导处理结束后仍旧保持其正常精巢结构,但是MT组具有一定比例的异常发育性腺,部分精巢内出现空泡化等毒理现象。此外,在150日龄及210日龄（处理结束）的性腺成熟指数也显示处理组... 

【文章来源】：浙江海洋大学浙江省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
中英文缩写对照表
第一章 引言
    1.1 鱼类的性别决定与分化
        1.1.1 遗传型性别决定
        1.1.2 环境型性别决定
    1.2 鱼类性别控制
        1.2.1 种间杂交
        1.2.2 外源激素诱导
        1.2.3 雌/雄核发育
        1.2.4 人工诱导三倍体
        1.2.5 其它方法
    1.3 鱼类性腺发育
        1.3.1 卵巢发育
        1.3.2 精巢发育
    1.4 转录组测序研究
        1.4.1 转录组测序概述
        1.4.2 转录组测序在鱼类中的应用
    1.5 本研究的目的与内容
第二章 来曲唑诱导雌核发育黄姑鱼性逆转的研究
    2.1 材料与方法
        2.1.1 实验材料与雌核发育诱导
        2.1.2 饲料制作
        2.1.3 实验设计
        2.1.4 实验仪器与试剂
        2.1.5 样品采集
        2.1.6 组织切片
        2.1.7 数据分析
    2.2 实验结果
        2.2.1 来曲唑对黄姑鱼生长的影响
        2.2.2 来曲唑对黄姑鱼性别比例的影响
        2.2.3 来曲唑对黄姑鱼性腺发育的影响
        2.2.4 来曲唑对黄姑鱼性腺成熟指数(GSI)的影响
    2.3 讨论
    2.4 小结
第三章 黄姑鱼性别相关基因的筛查分析
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 实验设计及样品采集
        3.1.3 实验仪器与试剂
        3.1.4 组织切片制作
        3.1.5 总RNA的提取和质量检测
        3.1.6 转录组测序及分析
        3.1.7 荧光定量(qPCR)检测
        3.1.8 性别分化相关基因的验证
    3.2 实验结果
        3.2.1 形态学验证
        3.2.2 样品信息及质量检测
        3.2.3 数据过滤及质量评估概况
        3.2.4 基因表达水平分析
        3.2.5 差异表达基因的筛选
        3.2.6 GO分析以及KEGG Pathway分析
        3.2.7 qPCR检测
        3.2.8 性别分化相关基因的验证
    3.3 讨论
    3.4 小结
总结与展望
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文及研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]p53非依赖性信号通路在DNA损伤致细胞凋亡中的研究进展[J]. 张潇芸,姜英,杨军.  浙江大学学报(医学版). 2013(02)
[2]脊椎动物性别决定基因与性染色体演化机制[J]. 邵长伟,陈松林.  农业生物技术学报. 2012(12)
[3]p53家族及其通路相关蛋白调节母性生殖的新功能[J]. 朱晖,李安,余建华,向超杰,苏世达,黄磊,范豫杰,罗瑛,唐文如.  遗传. 2012(08)
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[5]PPAR-γ对卵巢功能的影响及其作用机制[J]. 匡志超,王健,孙兆贵.  生殖与避孕. 2012(01)
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博士论文
[1]四种鲆鲽鱼类雌核发育及性别控制技术研究[D]. 杨景峰.中国海洋大学 2009

硕士论文
[1]人卵膜糖蛋白4的表达、抗体的制备及与精子体外结合的研究[D]. 于裴夫.中国医科大学 2018
[2]七彩神仙鱼（Symphysodon haraldi）性腺转录组分析及vasa基因的时空表达[D]. 林睿涓.上海海洋大学 2017
[3]高温处理后尼罗罗非鱼性逆转雄鱼与未逆转雌鱼的差异性腺转录组研究[D]. 孙丽雪.山东农业大学 2017
[4]17α-甲基睾酮和芳香化酶抑制剂来曲唑对两种黄姑鱼性腺分化的影响[D]. 阳芳.浙江海洋大学 2017
[5]雌、雄激素对罗非鱼性别分化和性腺基因表达的影响[D]. 陈立黎.西南大学 2016
[6]黄姑鱼雌核发育的诱导、鉴定及性别决定机制的初步研究[D]. 马世磊.浙江海洋学院 2014
[7]性类固醇激素在尼罗罗非鱼性别决定与分化中的作用[D]. 蒋小龙.西南大学 2014
[8]黑龙江茴鱼（Thymallus arcticus grubei Dybowski）人工繁殖及胚胎发育观察[D]. 张澜澜.东北农业大学 2008



本文编号：3174507