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大白猪和从江香猪PGAM2基因克隆及表达水平的研究

发布时间:2021-05-09 14:25
  为了探究磷酸甘油酸变位酶(Phosphog20lyce20rate20mutase,PGAM)mRNA在从江香猪和大白猪不同组织中的表达情况,揭示其在肌肉类型磷酸甘油酸变位酶(PGAM2)基因表达规律,笔者以大白猪和从江香猪作为实验动物,分别提取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、大肠、小肠、背最长肌、脂肪等10个组织的总RNA,设计各自实时荧光定量引物,扩增CDS区序列,以猪GAPDH基因作为内参基因,应用实时定量PCR技术检测PGAM2基因不同组织中mRNA的相对表达量。结果发现,贵州从江香猪和大白猪PGAM2基因长度均为91320bp的ORF序列,其中CDS区长度为76220bp,并发现在从江香猪PGAM2基因的CDS序列存在2个碱基突变:A235G、A613G,均属同义突变,和大白猪相比存在A235G一处突变。PGAM2基因在从江香猪和大白猪背最长肌组织中的表达水平极显著(P<0.01)高于其他组织。本研究为PGAM2基因后续真核表达的研究提供了理论依据。 

【文章来源】:当代畜牧. 2020,(08)

【文章页数】:5 页

【文章目录】:
1 试验材料与方法
    1.1 样本采集
    1.2 引物的设计与合成
    1.3 总RNA提取以及c DNA第一条链合成
    1.4 PGAM2基因CDS区的克隆
    1.5 实时荧光定量PCR
    1.6 数据分析
2 结果与分析
    2.1 CDS区扩增与TA克隆
    2.2 PGAM2基因序列分析
    2.3 PCR扩增产物检测
    2.4 q RT-PCR产物特异性分析
    2.5 PGAM2在不同组织中表达分析
3 讨论
4 结论


【参考文献】:
期刊论文
[1]香猪的种质特性[J]. 刘培琼,刘若余,燕志宏,张依裕,谌宏光.  中国猪业. 2013(S1)
[2]香猪肌肉中的脂肪酸分析及其营养价值评价[J]. 张艺,刘培琼,罗爱平.  养猪. 2008(06)
[3]猪PGAM2基因的克隆、序列特征及表达分析[J]. 伍晓雄,唐中林,李勇,杨述林,储明星,马月辉,李奎.  畜牧兽医学报. 2008(09)
[4]从江香猪生长发育繁殖性能测定[J]. 申学林,杨秀江,韦胜权.  中国畜禽种业. 2007(11)



本文编号:3177466

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