Notch1信号通路介导SASH1基因抑制乳腺癌的转移

发布时间：2021-05-11 15:47

　　目的 探究抑癌基因SASH1抑制乳腺癌转移的作用机制及Notch1信号通路在其中的作用。方法 将已经构建的人SASH1真核表达载体pcDNA3.1（+）-SASH1,转染进人乳腺癌细胞中,通过G418筛选建立SASH1基因过表达的人乳腺癌SASH1稳定表达细胞系,以转染空载体作为对照组。利用RT-qPCR、Western Blot方法验证稳定表达细胞系中SASH1的mRNA和蛋白表达水平。应用Western blot和RT-qPCR检测细胞信号通路Notch1相关基因的表达,以判定其活化状态。通过细胞划痕实验,检测过表达组和对照组细胞的迁移能力。并利用Kaplan-Meier数据库,进行SASH1基因表达高低对乳腺癌患者生存期的影响。结果 成功获得人SASH1过表达的乳腺癌MCF7和MDA-MB231稳定表达细胞系。过表达组和对照组乳腺癌细胞迁移能力,划痕实验24小时,两组细胞差距无统计学意义。48小时,SASH1高表达组距离较对照组分别宽`x=1.4mm和`x=1.7mm;具有统计学意义（p<0.05）。SASH1过表达后,Notch1的表达下降,表明SASH1抑制Notch1... 

【文章来源】：华北理工大学河北省

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略表
引言
第1章 实验研究
    1.1 材料与方法
        1.1.1 MCF7和MDA-MB231细胞的培养及转染
        1.1.2 鉴定稳定转染SASH1基因的MCF7和MDA-MB231细胞
        1.1.3 细胞划痕实验检测细胞迁移能力
        1.1.4 统计学分析
    1.2 结果
        1.2.1 建立稳定转染SASH1的MCF7和MDA-MB231细胞系
        1.2.2 体外验证SASH1过表达后对细胞迁移能力的影响
        1.2.3 SASH1过表达后对Notch1信号通路的影响
        1.2.4 利用数据库分析SASH1基因对乳腺癌生存期的影响
    1.3 讨论
        1.3.1 SASH1基因与肿瘤关系
        1.3.2 Notch信号通路在癌细胞转移中的作用
        1.3.3 SASH1基因在肿瘤EMT发生中的展望
    1.4 小结
    参考文献
第2章 综述 SASH1基因过表达抑制乳腺癌细胞增殖与转移
    2.1 SASH1基因简介
    2.2 SASH1基因与肿瘤关系
    2.3 SASH1基因与细胞凋亡
    2.4 SASH1基因与甲基化
    2.5 SASH1基因融合
    2.6 Notch-1信号通路简介
    2.7 Notch-1信号通路与肿瘤
    参考文献
结论
致谢
导师简介
作者简介
学位论文数据集


【参考文献】：
期刊论文
[1]NSCLC对EGFR-TKI获得性耐药机制及其策略的研究进展[J]. 黄欢,姚文秀.  肿瘤预防与治疗. 2016(05)
[2]SASH1基因在食管鳞癌中的表达及临床意义[J]. 刘秋菊,贺远龙,刘红云,卫红军,许琳,王青.  世界华人消化杂志. 2013(22)
[3]CpG岛甲基化和人类肿瘤[J]. 徐国茂.  中国药业. 2008(09)

博士论文
[1]TMPRSS4表达在调控乳腺癌侵袭转移中的作用及相关机制研究[D]. 李晓梅.山东大学 2017



本文编号：3181676