高温诱导尼罗罗非鱼雌鱼性腺细胞凋亡及相关基因表达变化的研究

发布时间：2021-05-13 16:09

　　性别决定对于生物有重要意义,是研究热点之一。在脊椎动物中,大约存在三种性别决定机制:分别为基因型性别决定（Genetic sex determination,GSD）、环境依赖型性别决定（Environment-dependent Sex Determination,ESD）和基因-环境型性别决定（Genetic sex determination+Temperature Effect,GSD+TE）。基因-环境型性别决定常见的为基因-温度性别决定。尼罗罗非鱼生长迅速,雄鱼生长远远大于雌鱼,性成熟早,繁殖力强,营养价值高,早在1995年就发现尼罗罗非鱼是一种基因-温度型性别决定（GSD+TE）的鱼类（Baroiller et al,1995）。在尼罗罗非鱼性腺分化的关键时期,即受精后10至20天,高温诱导可使雌鱼性逆转为雄鱼。那么高温诱导尼罗罗非鱼雌鱼性逆转的理论机制是什么,在尼罗罗非鱼雌鱼性逆转的过程中,雌鱼性腺细胞具体如何变化,是否会存在雌鱼生殖细胞与体细胞的凋亡,如果凋亡的话,会在哪一时期凋亡,具体性腺细胞会产生怎样的变化,这些问题目前还不是很清楚。为了解高温对尼罗罗非鱼性腺发育... 

【文章来源】：山东农业大学山东省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 脊椎动物的性别决定类型
        1.1.1 遗传性别决定
        1.1.2 环境依赖型性别决定
        1.1.3 基因-温度性别决定
    1.2 鱼类精巢、卵巢形态结构及发育的概况
    1.3 高温诱导对鱼类的影响及鱼类性腺细胞的发育
    1.4 细胞凋亡简介
        1.4.1 细胞凋亡概念
        1.4.2 细胞凋亡生物学意义
        1.4.3 细胞凋亡检测方法
        1.4.4 细胞凋亡相关基因
    1.5 鱼类细胞凋亡的相关研究
    1.6 本研究的目的意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 尼罗罗非鱼全雌家系建立与试验处理
        2.1.2 样品的采集
    2.2 试验仪器及试剂
        2.2.1 试验仪器
        2.2.2 试验试剂
    2.3 主要数据库及软件
    2.4 试验方法
        2.4.1 尼罗罗非鱼性腺石蜡切片的制备
        2.4.2 性腺组织学检测
        2.4.3 测量体长全长
        2.4.4 TUNEL技术步骤
        2.4.5 qRT-PCR引物来源及设计
        2.4.6 总RNA的提取
        2.4.7 第一链cDNA的合成
        2.4.8 反转录模板的检测
        2.4.9 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)
        2.4.10 标准曲线的建立和重复性分析
        2.4.11 数据分析
3 结果与分析
    3.1 高温诱导下尼罗罗非鱼体长全长
    3.2 尼罗罗非鱼性腺组织学检测
    3.3 高温诱导尼罗罗非鱼雄性率
    3.4 末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定性腺细胞凋亡
    3.5 高温诱导后尼罗罗非鱼促凋亡和抑凋亡基因的差异表达
        3.5.1 RNA质量的检测
        3.5.2 反转录合成cDNA模板
        3.5.3 持家基因和目的基因标准曲线的建立
        3.5.4 高温诱导对凋亡基因表达的影响
4 讨论
    4.1 高温诱导对尼罗罗非鱼不同家系性逆转率的影响
    4.2 高温诱导对尼罗罗非鱼不同日龄段性腺组织学的影响
    4.3 高温诱导对尼罗罗非鱼中相关凋亡基因的影响
5 结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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[4]大黄鱼原始生殖细胞发生、迁移及性腺性别分化的组织学研究[D]. 游秀容.集美大学 2012
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[6]温度及酒精对牛卵母细胞和早期胚胎凋亡的影响[D]. 刘鹏.中国农业科学院 2009
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本文编号：3184318