肺癌细胞中PIK3AP1基因表达变化及其过表达对细胞增殖、侵袭、迁移的影响

发布时间：2021-05-16 18:27

　　目的观察肺癌细胞中PIK3AP1基因的表达情况,分析其表达与患者预后的关系,以及PIK3AP1基因过表达对肺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。方法体外培养正常支气管上皮细胞系HBEC,非小细胞肺癌细胞系A549、HCC827、H358,小细胞肺癌细胞系H69、H526、H82。采用RT-PCR法检测上述细胞中PIK3AP1 m RNA的表达。利用Kaplan-Meier plotter在线生存分析数据库,对肺癌组织中PIK3AP1 m RNA表达与患者预后的相关性进行分析。取不表达PIK3AP1的肺癌细胞,将其分为观察组和对照组,以慢病毒转染技术分别转染PIK3AP1过表达载体和空载体,采用Brd U法观察细胞增殖能力,Transwell实验观察细胞侵袭能力,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,Western blotting法检测AKT、p-AKT蛋白表达。结果 PIK3AP1基因在小细胞肺癌细胞系H69、H526、H82中高表达,在非小细胞肺癌细胞系A549、HCC827、H358中低表达或不表达,在正常支气管上皮细胞中不表达。PIK3AP1基因高表达和低表达肺癌患者的中位生存期分别为6... 

【文章来源】：山东医药. 2020,60(26)

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 不同类型肺癌细胞中PIK3AP1 m RNA表达检测
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 细胞PIK3AP1 m RNA表达检测
    1.3 肺癌组织中PIK3AP1 m RNA表达与患者预后的关系分析
    1.4 PIK3AP1过表达对肺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响观察
        1.4.1 305-PIK3AP1质粒的构建
        1.4.2 病毒制备与感染
        1.4.3 细胞分组与感染
        1.4.4 细胞增殖能力观察
        1.4.5 细胞侵袭能力观察
        1.4.6 细胞迁移能力观察
        1.4.7 细胞PI3K/AKT通路相关蛋白AKT、p-AKT蛋白检测
    1.5 统计学方法
2 结果
    2.1 不同类型肺癌细胞中PIK3AP1 m RNA表达比较
    2.2 肺癌组织中PIK3AP1 m RNA表达与患者预后的关系
    2.3 PIK3AP1过表达对A549细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响观察结果
        2.3.1 两组细胞增殖能力比较
        2.3.2 两组细胞侵袭能力比较
        2.3.3 两组细胞迁移能力比较
        2.3.4 两组AKT、p-AKT蛋白表达比较
3 讨论



本文编号：3190182