生长板软骨细胞SHOX基因过/低表达的差异miRNA筛选及靶基因验证

发布时间：2021-05-17 14:39

　　目的:建立软骨细胞（HC-α）SHOX基因过/低表达模型,筛选与未处理组差异表达miRNA并予以验证,同时寻找差异miRNA可能调控的靶基因,为SHOX异常乃至生长板异常疾病探寻新的治疗靶点并提供新的理论依据。方法:（1）用SHOX过表达慢病毒、含有shRNA序列的SHOX干扰慢病毒、过表达空载慢病毒和干扰空载慢病毒分别感染HC-a细胞,并经过嘌呤霉素筛选阳性感染成功HC-a细胞。（2）Real-time PCR检测SHOX mRNA在各组的相对表达量。（3）用miRNA芯片分析SHOX过表达组、SHOX低表达与未处理组的差异表达miRNA。（4）选取处理组中表达趋势相反的差异miRNA作为研究对象,用Real-time PCR验证差异表达mi RNA与芯片结果的一致性。（5）通过Target Scan预测具有显著差异的miRNA的靶基因,并在HC-a细胞中转染差异miRNA的类似物（mimic）,检测靶基因表达量的变化。结果:（1）成功筛选出各组已感染慢病毒的阳性HC-a细胞。（2）Real-time PCR测定SHOX mRNA表达情况与未处理组相比,过表达组SHOX mRNA表达... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
英汉缩略语名词对照
中文摘要
英文摘要
前言
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
4 讨论
全文总结
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
攻读研究生期间的研究成果及发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]特发性矮身材儿童循环microRNA表达水平的研究[J]. 赵莎,钟燕,蒋耀辉,易著文.  中国当代儿科杂志. 2013(12)



本文编号：3191939