小麦TaSOC1-like基因的分离及功能研究

发布时间：2021-05-20 19:24

　　小麦（Triticum aestivum L.）是世界上三大粮食作物之一。其抽穗时间会直接影响小麦产量。为理解小麦开花过程的分子调控机理,本研究从小麦中分离得到一个MADS-box基因,命名为SOC1-like,并对其表达模式及生物学功能进行了初步探究。主要结果如下:TaSOC1-like基因具有三个等位基因,分别定位于6A、6B和6D染色体。三个基因组基因结构皆含有六个外显子和五个内含子,其核苷酸之间的序列同一性高达97.08%。基因组序列全长分别是6739 bp（TaSOC1-like-6A）、7205 bp（TaSOC1-like-6B）和7029bp（TaSOC1-like-6D）,相应的CDS长度为789 bp、777 bp、780 bp,分别编码262、258和259个氨基酸。NCBI数据库蛋白预测推断显示,TaSOC1-like蛋白属于典型的MIKC型蛋白,含有MADS-box家族中MEF2-like和K-box两个经典结构域。进化树分析表明,TaSOC1-like蛋白与其他物种中同源蛋白相比,与大麦HORVU6Hr1G002330编码的蛋白相似性最高,具有较近的亲缘关系... 

【文章来源】：山东农业大学山东省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
缩略词说明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 小麦概述
        1.1.1 小麦进化起源
        1.1.2 抽穗期对小麦的影响
    1.2 植物开花调控
        1.2.1 开花调控途径中的相互作用
        1.2.2 光周期途径
        1.2.3 春化途径
        1.2.4 自主途径
        1.2.5 GA途径
        1.2.6 其他开花调控途径
    1.3 花形态建成
        1.3.1 花器官发育ABC模型的建立与完善
        1.3.2 MADS-box家族的发现
        1.3.3 MADS-box基因的结构和功能
    1.4 本研究的目的与意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验材料与材料培养条件
        2.1.2 菌株与载体
        2.1.3 酶以及其它生化试剂
        2.1.4 主要仪器
        2.1.5 PCR引物以及序列测定
    2.2 实验方法
        2.2.1 试剂盒总RNA的提取
        2.2.2 反转录cDNA第一链的合成
        2.2.3 目的基因TaSOC1-like的克隆
        2.2.4 目的片段的回收与检测
        2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备
        2.2.6 克隆载体的构建
        2.2.7 热激法转化大肠杆菌
        2.2.8 阳性克隆的筛选及测序
        2.2.9 碱法小量提取质粒DNA
        2.2.10 表达载体的构建
        2.2.11 根瘤农杆菌感受态的转化
        2.2.12 mRNA原位杂交实验
            2.2.12.1 固定与包埋组织材料
            2.2.12.2 探针制备
            2.2.12.3 探针浓度检测
            2.2.12.4 组织切片
            2.2.12.5 脱蜡与复水
            2.2.12.6 杂交液的配制
            2.2.12.7 杂交后处理
            2.2.12.8 信号的检测
        2.2.13 小麦的原生质体转化
        2.2.14 转基因小麦的获得
            2.2.14.1 TaSOC1-like基因RNAi载体的构建
            2.2.14.2 农杆菌侵染小麦幼胚的遗传转化
        2.2.15 基因组DNA的小量提取
        2.2.16 转基因小麦分子水平的鉴定
            2.2.16.1 DNA水平转基因小麦的鉴定
            2.2.16.2 RNA水平的转基因小麦鉴定
        2.2.17 进化树的构建
3 结果
    3.1 TaSOC1-like基因的克隆
    3.2 TaSOC1-like蛋白的亚细胞定位
    3.3 TaSOC1-like基因组织表达模式分析
    3.4 TaSOC1-like在小麦穗发育过程的表达分析
    3.5 TaSOC1-like-RNAi载体的构建及遗传转化
    3.6 TaSOC1-like-RNAi转基因小麦T0 代鉴定
    3.7 TaSOC1-like-RNAi转基因小麦T1 代表型分析
        3.7.1 TaSOC1-like-RNAi转基因小麦早花表型及抽穗统计分析
        3.7.2 TaSOC1-like-RNAi转基因小麦穗发育各个时期形态观察及开始时间统计
    3.8 TaSOC1-like-RNAi株系其它农艺性状的变化
4 讨论
5 结论
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]我国完成小麦A基因组测序和图谱绘制[J]. 佘惠敏.  粮食科技与经济. 2018(05)
[2]高温和单氰胺对油桃休眠花芽呼吸代谢的影响[J]. 谭钺,冷传远,李玲,徐臣善,陈修德,高东升.  应用生态学报. 2012(09)
[3]甘肃陇东黄土高原冬小麦对气候变暖的响应[J]. 王位泰,张天锋,黄斌,李宗龙天,王润元,杨民,蒲金涌.  生态学杂志. 2006(07)

博士论文
[1]小麦TaTOC1s基因调控开花与发育的分子机理研究[D]. 洪坡.山东农业大学 2018

硕士论文
[1]小麦MADS-box基因TaAGL32的功能研究[D]. 王健.山东农业大学 2017



本文编号：3198305