五个家蚕丝蛋白基因启动子的转基因表达特征研究
发布时间：2021-06-01 01:32
家蚕（Bombyx mori）是具有5000多年饲养驯化历史的重要产丝昆虫。丝腺是家蚕合成和分泌蚕丝蛋白的专一器官,通常分为前部丝腺、中部丝腺和后部丝腺三个形态功能各异的部分,其中中部丝腺和后部丝腺分别合成并分泌丝胶（约占25%）和丝素（约占75%）,二者是蚕丝的主要成分。丝腺对蚕丝产量和品质具有决定性作用,是蚕丝业的生物学基础。丝素蛋白由三个亚单元即丝素重链（fibH）、丝素轻链（fib L）和糖蛋白P25组成,三者以6:6:1的比例组装形成一个基本结构单元。丝胶蛋白的组分较为复杂,至少包括丝胶1（Ser1）、丝胶2（Ser2）、丝胶3（Ser3）等几种蛋白组分。据早期线索,丝蛋白合成调控主要发生在转录水平,即激素信号首先传导至转录因子,再由转录因子直接调控丝素和丝胶蛋白编码基因（主要作用于启动子区,亦可作用于内含子区）,对这些基因进行时空特异的“开启”或“关闭”,从而指导蚕丝蛋白高效受控合成,该调控过程错综复杂。近几十年来,国内外学者围绕丝蛋白的合成调控开展了大量研究并有丰富进展,但至今仍未探明其详细机制。启动子是基因受控表达的核心功能元件。研究丝素和丝胶蛋白编码基因启动子的表达调...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
fibH基因结构示意图
第一章文献综述3图1.2fibH第二外显子结构示意图[11]Figure1.2ThestructureofthesecondexonoffibHA：第二外显子中包含的12个重复区域，Ua序列（红色）Ub序列（蓝色）。B：A图中框内放大。C：B图中框内序列A:The12repeatregionscontainedinthesecondexon,Uasequence(red)andUbsequence(blue).B:ZoomintheframeinA.C:SequenceintheboxinB图1.3fibH启动子结构示意图[14]Figure1.3SchematicdiagramoffibHpromoter5’-flanking：第二外显子的5’侧翼序列，E1：第一外显子，Intron：内含子，5’-E2：第二外显子的5"末端序列。5"-flanking:5"flankingsequenceofthesecondexon,E1:firstexon,Intron:intron,5"-E2:5"terminalsequenceofthesecondexon.（2）fibL基因fibL基因位于家蚕第14号染色体上，全长13472bp，包括7个外显子和6个内含子[24]，其CDS长度为262bp，编码蛋白分子量约25kDa。fibL基因含有一个最大的第1内含子（8145bp），约占该基因的60.5%[24]。丝素蛋白轻链包含了三个Cys残基，其中两个形成分子内二硫键，而第三个残基位于C端，且在相对亲水的区域中，与丝素蛋白重链形成二硫键[25]。2003年，Tomita等[26]首次利用fibL启动子在家蚕后部丝腺中表达重组蛋白，最终表达是重组蛋白可达到8.4μg/mg。该fibL启动子大小为1370bp，由fibL的5’侧翼序列和部分cDNA序列组成（图1.4）[14]。转录因子参与调控fibL启动子转录表达，已有相关研究报道，SGF-1[15]，
第一章文献综述3图1.2fibH第二外显子结构示意图[11]Figure1.2ThestructureofthesecondexonoffibHA：第二外显子中包含的12个重复区域，Ua序列（红色）Ub序列（蓝色）。B：A图中框内放大。C：B图中框内序列A:The12repeatregionscontainedinthesecondexon,Uasequence(red)andUbsequence(blue).B:ZoomintheframeinA.C:SequenceintheboxinB图1.3fibH启动子结构示意图[14]Figure1.3SchematicdiagramoffibHpromoter5’-flanking：第二外显子的5’侧翼序列，E1：第一外显子，Intron：内含子，5’-E2：第二外显子的5"末端序列。5"-flanking:5"flankingsequenceofthesecondexon,E1:firstexon,Intron:intron,5"-E2:5"terminalsequenceofthesecondexon.（2）fibL基因fibL基因位于家蚕第14号染色体上，全长13472bp，包括7个外显子和6个内含子[24]，其CDS长度为262bp，编码蛋白分子量约25kDa。fibL基因含有一个最大的第1内含子（8145bp），约占该基因的60.5%[24]。丝素蛋白轻链包含了三个Cys残基，其中两个形成分子内二硫键，而第三个残基位于C端，且在相对亲水的区域中，与丝素蛋白重链形成二硫键[25]。2003年，Tomita等[26]首次利用fibL启动子在家蚕后部丝腺中表达重组蛋白，最终表达是重组蛋白可达到8.4μg/mg。该fibL启动子大小为1370bp，由fibL的5’侧翼序列和部分cDNA序列组成（图1.4）[14]。转录因子参与调控fibL启动子转录表达，已有相关研究报道，SGF-1[15]，
本文编号：3209391
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
fibH基因结构示意图
第一章文献综述3图1.2fibH第二外显子结构示意图[11]Figure1.2ThestructureofthesecondexonoffibHA：第二外显子中包含的12个重复区域，Ua序列（红色）Ub序列（蓝色）。B：A图中框内放大。C：B图中框内序列A:The12repeatregionscontainedinthesecondexon,Uasequence(red)andUbsequence(blue).B:ZoomintheframeinA.C:SequenceintheboxinB图1.3fibH启动子结构示意图[14]Figure1.3SchematicdiagramoffibHpromoter5’-flanking：第二外显子的5’侧翼序列，E1：第一外显子，Intron：内含子，5’-E2：第二外显子的5"末端序列。5"-flanking:5"flankingsequenceofthesecondexon,E1:firstexon,Intron:intron,5"-E2:5"terminalsequenceofthesecondexon.（2）fibL基因fibL基因位于家蚕第14号染色体上，全长13472bp，包括7个外显子和6个内含子[24]，其CDS长度为262bp，编码蛋白分子量约25kDa。fibL基因含有一个最大的第1内含子（8145bp），约占该基因的60.5%[24]。丝素蛋白轻链包含了三个Cys残基，其中两个形成分子内二硫键，而第三个残基位于C端，且在相对亲水的区域中，与丝素蛋白重链形成二硫键[25]。2003年，Tomita等[26]首次利用fibL启动子在家蚕后部丝腺中表达重组蛋白，最终表达是重组蛋白可达到8.4μg/mg。该fibL启动子大小为1370bp，由fibL的5’侧翼序列和部分cDNA序列组成（图1.4）[14]。转录因子参与调控fibL启动子转录表达，已有相关研究报道，SGF-1[15]，
第一章文献综述3图1.2fibH第二外显子结构示意图[11]Figure1.2ThestructureofthesecondexonoffibHA：第二外显子中包含的12个重复区域，Ua序列（红色）Ub序列（蓝色）。B：A图中框内放大。C：B图中框内序列A:The12repeatregionscontainedinthesecondexon,Uasequence(red)andUbsequence(blue).B:ZoomintheframeinA.C:SequenceintheboxinB图1.3fibH启动子结构示意图[14]Figure1.3SchematicdiagramoffibHpromoter5’-flanking：第二外显子的5’侧翼序列，E1：第一外显子，Intron：内含子，5’-E2：第二外显子的5"末端序列。5"-flanking:5"flankingsequenceofthesecondexon,E1:firstexon,Intron:intron,5"-E2:5"terminalsequenceofthesecondexon.（2）fibL基因fibL基因位于家蚕第14号染色体上，全长13472bp，包括7个外显子和6个内含子[24]，其CDS长度为262bp，编码蛋白分子量约25kDa。fibL基因含有一个最大的第1内含子（8145bp），约占该基因的60.5%[24]。丝素蛋白轻链包含了三个Cys残基，其中两个形成分子内二硫键，而第三个残基位于C端，且在相对亲水的区域中，与丝素蛋白重链形成二硫键[25]。2003年，Tomita等[26]首次利用fibL启动子在家蚕后部丝腺中表达重组蛋白，最终表达是重组蛋白可达到8.4μg/mg。该fibL启动子大小为1370bp，由fibL的5’侧翼序列和部分cDNA序列组成（图1.4）[14]。转录因子参与调控fibL启动子转录表达，已有相关研究报道，SGF-1[15]，
本文编号：3209391
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