大豆BT基因抗虫转化体的鉴定与评价
发布时间：2021-06-09 16:04
在我国的主要粮食作物中,大豆含有多种的氨基酸和维生素,营养丰富且种植不难,已成为了人们不可或缺的重要食材。但近些年来,大豆虫害却给我国的大豆产量造成了不小的影响,通常的化学防治技术不仅增加成本,而且也造成了环境污染,也威胁到大豆的食品安全。而通过植物基因工程技术来选育产量高的抗虫大豆品种逐渐成为了一条有效的解决途径。在目前的基因工程技术中,BT（Bacillus thuringiensis,BT）基因被首先应用于作物育种中,并在抗虫效果上取得了良好表现。通过研究转基因技术发现,当作物中被导入BT基因后可使该作物充分表现出良好的抗虫性。本试验就是将抗虫基因Cry1Iem的180株株系、抗虫基因Cry8-like的120株株系以及抗虫基因Cry1AB13-2的90株株系作为研究对象。通过使用常规PCR检测分析、Southern杂交、荧光定量PCR技术对其转抗虫基因的株系分别进行分子鉴定,再对这三种转抗虫基因的阳性植株株系进行室内外接虫,选育农艺性状从而鉴定不同的抗虫基因所具备的抗虫功能。分别将已转化的株系与受体品种“吉农28”大豆植株进行抗虫能力的比较,从而验证出该三种抗虫基因所具备的抗虫...
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
T6转基因大豆的PCR基因检测Cry1Iem
吉林农业大学硕士论文第三章结果与分析22552bp1971bp2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp207bp从图3-2检测结果可以看出，由于RSP是大豆内源基因,所以在收获的T5代转基因植株中均检测到了目的条带Cry8-like（1971bp），筛选标记Bar（552bp）,终止子NOS（207bp）,这表明转化的标记基因和功能片段都已被成功整合到了受体“吉农28”大豆中。MPNK12345MPNK12345B1B2MPNK12345B3图3-2：T5转基因大豆Cry8-like（B1）、Bar（B2）、NOS（B3）基因的PCR检测M:DL2000DNAmarkerP:阳性对照N:非转基因植株K:空白对照1～5：转基因植株Fig.3-2:PCRdetectionofgenesofCry8-like(B1),Bar(B2)andNOS(B3)inT5transgenicsoybeansM:DL2000DNAmarkerP:positivecontrolN:non-transgenicplantK:blankcontrol1～5:transgenicplant3.1.3转Cry1AB13-2基因株系PCR检测从图3-3检测结果可以看出，在收获的T4代转基因植株中均检测到了目的条带Cry1AB13-2（2018bp），筛选标记抗除草剂Bar（552bp）,启动子35S（500bp）,终止子NOS（250bp）,这说明转化的标记基因和功能片段都已被成功整合到了受体“吉农28”大豆中。
T4转基因大豆Cry1AB13-2（C1）、Bar（
【参考文献】：
期刊论文
[1]根癌农杆菌介导单子叶植物遗传转化研究进展[J]. 杨静. 种子科技. 2019(18)
[2]化肥农药减量与农用地土壤污染治理研究[J]. 聂巍巍. 化工管理. 2019(36)
[3]大豆主要病虫害的发生及防治[J]. 樊树军,于树堂. 现代农业科技. 2019(21)
[4]全球转基因大豆发展概况[J]. 谭巍巍,王永斌,赵远玲,刘昭军,王广金. 大豆科技. 2019(04)
[5]根癌农杆菌介导的马铃薯遗传转化体系的研究[J]. 张萍. 陕西农业科学. 2019(04)
[6]化肥农药减量与农用地土壤污染治理研究[J]. 丛晓男,单菁菁. 江淮论坛. 2019(02)
[7]Bt基因及其在抗鞘翅目害虫上的应用[J]. 杨佳,姚瑶. 吉林农业. 2019(10)
[8]大豆食心虫的发生测报及绿色防治技术研究[J]. 封永顺,高亮,常艳丽,马良,周胜华. 农业与技术. 2019(05)
[9]外源野生胡麻总DNA遗传转化栽培胡麻及RAPD分子验证[J]. 刘栋,郭娜,马建富,李爱荣. 华北农学报. 2018(S1)
[10]BT抗虫蛋白研究概述[J]. 范艳艳,黄义德,周谷成,肖义军. 生物学教学. 2018(11)
博士论文
[1]苏云金芽胞杆菌新型杀虫基因的发掘与活性分析[D]. 单月明.东北农业大学 2019
[2]高集约化农业土地利用的环境风险管理体系研究[D]. 卓东.中国农业大学 2017
[3]大豆丙二烯氧化物环化酶基因（GmAOC）家族克隆、进化与功能研究[D]. 吴倩.南京农业大学 2011
[4]转基因植物外源Bt基因表达产物环境行为研究[D]. 王连荣.河北农业大学 2010
[5]转基因作物生物安全性评价与监管体系的分析与对策[D]. 王琴芳.中国农业科学院 2008
[6]转基因水稻作为肉仔鸡日粮原料的安全性评价[D]. 杜红方.中国农业科学院 2006
硕士论文
[1]新抗虫基因Cry1AB13-2的克隆及其在大豆中的遗传转化和功能鉴定[D]. 张林.吉林农业大学 2018
[2]抗虫基因Cry8-like植物根系特异性表达载体的构建及在大豆中的遗传转化[D]. 林楠.吉林农业大学 2017
[3]抗虫基因cry1Iem转化大豆的研究[D]. 何欢.吉林农业大学 2016
[4]GmAOC3和GwMYC5转化大豆的初步研究[D]. 宁爱玲.南京农业大学 2014
[5]转Bt基因稻谷对小鼠健康的安全性评价[D]. 张珍誉.湖南师范大学 2010
[6]转Bt基因水稻选育研究[D]. 杨清华.湖南农业大学 2007
[7]大豆抗食心虫性状及抗虫性遗传规律的研究[D]. 刘洋.东北农业大学 2004
本文编号：3220890
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
T6转基因大豆的PCR基因检测Cry1Iem
吉林农业大学硕士论文第三章结果与分析22552bp1971bp2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp207bp从图3-2检测结果可以看出，由于RSP是大豆内源基因,所以在收获的T5代转基因植株中均检测到了目的条带Cry8-like（1971bp），筛选标记Bar（552bp）,终止子NOS（207bp）,这表明转化的标记基因和功能片段都已被成功整合到了受体“吉农28”大豆中。MPNK12345MPNK12345B1B2MPNK12345B3图3-2：T5转基因大豆Cry8-like（B1）、Bar（B2）、NOS（B3）基因的PCR检测M:DL2000DNAmarkerP:阳性对照N:非转基因植株K:空白对照1～5：转基因植株Fig.3-2:PCRdetectionofgenesofCry8-like(B1),Bar(B2)andNOS(B3)inT5transgenicsoybeansM:DL2000DNAmarkerP:positivecontrolN:non-transgenicplantK:blankcontrol1～5:transgenicplant3.1.3转Cry1AB13-2基因株系PCR检测从图3-3检测结果可以看出，在收获的T4代转基因植株中均检测到了目的条带Cry1AB13-2（2018bp），筛选标记抗除草剂Bar（552bp）,启动子35S（500bp）,终止子NOS（250bp）,这说明转化的标记基因和功能片段都已被成功整合到了受体“吉农28”大豆中。
T4转基因大豆Cry1AB13-2（C1）、Bar（
【参考文献】：
期刊论文
[1]根癌农杆菌介导单子叶植物遗传转化研究进展[J]. 杨静. 种子科技. 2019(18)
[2]化肥农药减量与农用地土壤污染治理研究[J]. 聂巍巍. 化工管理. 2019(36)
[3]大豆主要病虫害的发生及防治[J]. 樊树军,于树堂. 现代农业科技. 2019(21)
[4]全球转基因大豆发展概况[J]. 谭巍巍,王永斌,赵远玲,刘昭军,王广金. 大豆科技. 2019(04)
[5]根癌农杆菌介导的马铃薯遗传转化体系的研究[J]. 张萍. 陕西农业科学. 2019(04)
[6]化肥农药减量与农用地土壤污染治理研究[J]. 丛晓男,单菁菁. 江淮论坛. 2019(02)
[7]Bt基因及其在抗鞘翅目害虫上的应用[J]. 杨佳,姚瑶. 吉林农业. 2019(10)
[8]大豆食心虫的发生测报及绿色防治技术研究[J]. 封永顺,高亮,常艳丽,马良,周胜华. 农业与技术. 2019(05)
[9]外源野生胡麻总DNA遗传转化栽培胡麻及RAPD分子验证[J]. 刘栋,郭娜,马建富,李爱荣. 华北农学报. 2018(S1)
[10]BT抗虫蛋白研究概述[J]. 范艳艳,黄义德,周谷成,肖义军. 生物学教学. 2018(11)
博士论文
[1]苏云金芽胞杆菌新型杀虫基因的发掘与活性分析[D]. 单月明.东北农业大学 2019
[2]高集约化农业土地利用的环境风险管理体系研究[D]. 卓东.中国农业大学 2017
[3]大豆丙二烯氧化物环化酶基因（GmAOC）家族克隆、进化与功能研究[D]. 吴倩.南京农业大学 2011
[4]转基因植物外源Bt基因表达产物环境行为研究[D]. 王连荣.河北农业大学 2010
[5]转基因作物生物安全性评价与监管体系的分析与对策[D]. 王琴芳.中国农业科学院 2008
[6]转基因水稻作为肉仔鸡日粮原料的安全性评价[D]. 杜红方.中国农业科学院 2006
硕士论文
[1]新抗虫基因Cry1AB13-2的克隆及其在大豆中的遗传转化和功能鉴定[D]. 张林.吉林农业大学 2018
[2]抗虫基因Cry8-like植物根系特异性表达载体的构建及在大豆中的遗传转化[D]. 林楠.吉林农业大学 2017
[3]抗虫基因cry1Iem转化大豆的研究[D]. 何欢.吉林农业大学 2016
[4]GmAOC3和GwMYC5转化大豆的初步研究[D]. 宁爱玲.南京农业大学 2014
[5]转Bt基因稻谷对小鼠健康的安全性评价[D]. 张珍誉.湖南师范大学 2010
[6]转Bt基因水稻选育研究[D]. 杨清华.湖南农业大学 2007
[7]大豆抗食心虫性状及抗虫性遗传规律的研究[D]. 刘洋.东北农业大学 2004
本文编号：3220890
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