番茄苹果酸调控基因SLALMT9互作蛋白CESA2、TP、TEP的鉴定及功能验证
发布时间：2021-06-10 15:34
番茄（Solanum lycopersium）是一种世界范围内广泛种植的蔬菜,酸甜可口的口感以及丰富的营养元素使得番茄深受人们喜爱。苹果酸是番茄果实中最主要的有机酸之一,其含量的高低显著的影响了番茄果实的口感与风味。Sl ALMT9是调控番茄果实苹果酸积累的关键基因,其在根系的表达使得番茄能够适应Al3+毒害。本研究通过酵母双杂调库,筛选到三个与Sl ALMT9互作的蛋白。获得研究结果如下:1.构建Sl ALMT9完整CDS序列的p GBKT7钓饵载体,通过酵母双杂文库筛选结合PCR测序获得了可能与Sl ALMT9基因互作的28个蛋白的基因序列,结合酵母双杂点对点验证以及Sl ALMT9-OE的RNA-seq数据,我们认为CESA2（Solyc01g087210.2.1）、TEP（Solyc03g005270.2.1）、TP（Solyc05g026540.2.1）三个基因编码的蛋白与Sl ALMT9互作;2.提取番茄材料AC果实的RNA,通过反转录获取CESA2、TEP、TP的c DNA,基于跨膜结构域TMHMM预测和Inter Pro Scan预测构建Sl AM...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
果皮细胞各细胞器中的苹果酸代谢途径(Etienneetal.2013)
华中农业大学 2019 届硕士研究生学位论文再受 Al3+诱导，但是其基础的苹果酸转运功能 的 C 端在响应 Al3+信号时起到了重要作用(TaALMT1 的 C 端进行了截短实验也表明，在运功能不受影响，但其对 Al3+的响应仍旧依赖有相似的结果，不过仅有 E256Q（相当于 TaAL变影响了其对 Al3+的响应(Furuichi et al. 20T1 分成 N 端和 C 端并构建了嵌合蛋白使其在旧表现出苹果酸转运能力与 Al3+响应能力，但却失去了 Al3+响应能力，这一结果表明 N 端对10; Sasaki et al. 2014)。
之间相互作用的工具(Fields and Song 1989)。其基本交系统使用 GAL4 作为转录激活因子，该转录因子A 结合结构域（DNA Binding domain，BD）和l activation domain，AD），同时具有 BD 与 AD 两个整功能，激活报告基因的表达(Fields and Song 1989)ait，即钓饵蛋白）与 BD 蛋白结合，构建 BD-Bait 融标蛋白）与 AD 蛋白结合，构建 AD-Prey 融合蛋白。表达后，如果 Bait 与 Prey 能够发生互作，将会拉动 AD 能够发挥转录激活作用，激活报告基因的表达，就可以通过钓饵蛋白从文库中筛选出与之互作的白时，该系统也可以验证两个蛋白之间是否存在互作
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国蔬菜种业创新趋势分析[J]. 丁海凤,于拴仓,王德欣,贾长才,张凤兰,许勇. 中国蔬菜. 2015(08)
[2]番茄果实有机酸总含量的QTL分析[J]. 戚飞,刘冠,李景富. 北方园艺. 2015(05)
[3]苹果酸代谢和运动能力[J]. 冯瑞. 当代体育科技. 2011(05)
[4]梨果实酸/低酸性状的SSR分析[J]. 刘金义,崔海荣,王龙,王新卫,杨健,章镇,李秀根,乔玉山. 果树学报. 2011(03)
[5]番茄品质遗传及育种研究进展[J]. 李晓蕾,李景富,康立功,张贺,许向阳. 中国蔬菜. 2010(14)
[6]液泡膜苹果酸转运蛋白研究进展[J]. 胡军瑜,王俊刚,吴转娣,张树珍,唐建平. 基因组学与应用生物学. 2009(02)
[7]L-苹果酸的生理功能研究进展[J]. 吴军林,吴清平,张菊梅. 食品科学. 2008(11)
[8]L-苹果酸对老年大鼠组织中转氨酶活性的影响[J]. 吴军林,吴清平,张菊梅. 食品科学. 2007(10)
[9]山东苹果中可溶性糖、有机酸的研究[J]. 赵尊行,孙衍华,黄化成. 山东农业大学学报. 1995(03)
本文编号：3222644
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
果皮细胞各细胞器中的苹果酸代谢途径(Etienneetal.2013)
华中农业大学 2019 届硕士研究生学位论文再受 Al3+诱导，但是其基础的苹果酸转运功能 的 C 端在响应 Al3+信号时起到了重要作用(TaALMT1 的 C 端进行了截短实验也表明，在运功能不受影响，但其对 Al3+的响应仍旧依赖有相似的结果，不过仅有 E256Q（相当于 TaAL变影响了其对 Al3+的响应(Furuichi et al. 20T1 分成 N 端和 C 端并构建了嵌合蛋白使其在旧表现出苹果酸转运能力与 Al3+响应能力，但却失去了 Al3+响应能力，这一结果表明 N 端对10; Sasaki et al. 2014)。
之间相互作用的工具(Fields and Song 1989)。其基本交系统使用 GAL4 作为转录激活因子，该转录因子A 结合结构域（DNA Binding domain，BD）和l activation domain，AD），同时具有 BD 与 AD 两个整功能，激活报告基因的表达(Fields and Song 1989)ait，即钓饵蛋白）与 BD 蛋白结合，构建 BD-Bait 融标蛋白）与 AD 蛋白结合，构建 AD-Prey 融合蛋白。表达后，如果 Bait 与 Prey 能够发生互作，将会拉动 AD 能够发挥转录激活作用，激活报告基因的表达，就可以通过钓饵蛋白从文库中筛选出与之互作的白时，该系统也可以验证两个蛋白之间是否存在互作
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国蔬菜种业创新趋势分析[J]. 丁海凤,于拴仓,王德欣,贾长才,张凤兰,许勇. 中国蔬菜. 2015(08)
[2]番茄果实有机酸总含量的QTL分析[J]. 戚飞,刘冠,李景富. 北方园艺. 2015(05)
[3]苹果酸代谢和运动能力[J]. 冯瑞. 当代体育科技. 2011(05)
[4]梨果实酸/低酸性状的SSR分析[J]. 刘金义,崔海荣,王龙,王新卫,杨健,章镇,李秀根,乔玉山. 果树学报. 2011(03)
[5]番茄品质遗传及育种研究进展[J]. 李晓蕾,李景富,康立功,张贺,许向阳. 中国蔬菜. 2010(14)
[6]液泡膜苹果酸转运蛋白研究进展[J]. 胡军瑜,王俊刚,吴转娣,张树珍,唐建平. 基因组学与应用生物学. 2009(02)
[7]L-苹果酸的生理功能研究进展[J]. 吴军林,吴清平,张菊梅. 食品科学. 2008(11)
[8]L-苹果酸对老年大鼠组织中转氨酶活性的影响[J]. 吴军林,吴清平,张菊梅. 食品科学. 2007(10)
[9]山东苹果中可溶性糖、有机酸的研究[J]. 赵尊行,孙衍华,黄化成. 山东农业大学学报. 1995(03)
本文编号：3222644
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3222644.html
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