SALL4基因沉默对MCF-7/A细胞增殖和化疗敏感性的影响

发布时间：2021-06-18 15:27

　　[目的]探讨沉默SALL4基因对乳腺癌耐药细胞MCF-7/A的增殖及化疗敏感性的影响。[方法]q RT-PCR和Western Blot实验检测MCF-7、MCF-7/A细胞内SALL4表达水平,运用慢病毒包装sh RNA方法沉默MCF-7/A细胞的SALL4基因;实验组（Lv-sh SALL4）、阴性对照组（Lv-sh NC）和空白对照组（CON）。CCK8法、克隆形成实验检测SALL4沉默对细胞增殖能力的影响;CCK8法检测表柔比星处理细胞24h和48h的半数抑制浓度(IC₅₀);流式细胞仪检测细胞凋亡。[结果]SALL4在MCF-7/A细胞中的表达水平显著高于MCF-7（P<0.05）。MCF-7/A细胞中SALL4基因被成功沉默,病毒感染MCF-7/A细胞72h后,细胞感染效率约95%,沉默SALL4基因后MCF-7/A细胞内SALL4 m RNA及蛋白表达均明显降低（P<0.05）。沉默MCF-7/A细胞的SALL4基因,显著抑制了细胞的增殖能力（P<0.05）,增强了细胞对表柔比星的敏感性;表柔比星24h和48h的IC_50<... 

【文章来源】：中国肿瘤. 2016,25(02)

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 q RT-PCR检测细胞内SALL4 m RNA相对表达量
        1.2.3 Western blot实验检测细胞内SALL4 蛋白相对含量
        1.2.4 MCF-7/A细胞内SALL4 基因沉默效率的检测
        1.2.5 CCK8 法绘制细胞生长曲线
        1.2.6 克隆形成实验
        1.2.7 CCK8 法检测表柔比星处理MCF-7/A细胞的半数抑制浓度(IC50)
        1.2.8 流式细胞术检测表柔比星诱导的细胞凋亡
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 MCF-7、MCF-7/A细胞中SALL4 基因表达水平的差异
    2.2 MCF-7/A细胞中SALL4 基因敲减效率检测
    2.4 沉默SALL4 基因增强MCF-7/A细胞对表柔比星的敏感性
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/A的建立[J]. 洪理泉,柯卫锋,潘峰,陈兆军,刘玉华.  浙江医学. 2012 (17)



本文编号：3236911