miR-92a与miR-19b对小鼠胰岛β细胞胰岛素基因表达的影响

发布时间：2021-06-25 05:10

　　目的:探讨微小RNA-92a（miR-92a）和微小RNA-19b（miR-19b）对小鼠胰岛β细胞胰岛素基因表达的影响。方法:qPCR检测小鼠胰岛素瘤MIN6细胞内源性miR-92a和miR-19b的相对表达水平。将MIN6细胞分为对照组及实验Ⅰ、Ⅱ组（每组n=3）,分别转染阴性对照miRNA（NC）、miR-92a和miR-19b,qPCR验证miRNAs的过表达,光学显微镜观察细胞形态,CCK8法检测细胞活力,qPCR、Western blot及免疫荧光检测胰岛素表达情况,生物信息学预测、双萤光素酶报告基因实验和Western blot分析miR-92a和miR-19b调控胰岛素表达的可能机制。结果:与成体胰腺祖细胞相比,MIN6细胞内源性miR-92a和miR-19b相对表达量显著降低（P<0.05）;过表达miR-92a和miR-19b对MIN6细胞活力没有影响,但抑制胰岛素mRNA和蛋白表达;miR-19b显著抑制NeuroD1 3’UTR萤光素酶活性和NeuroD1蛋白表达（P<0.05）,而miR-92a对NeuroD1 3’UTR萤光素酶活性和NeuroD... 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2020,36(12)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

胰腺祖细胞和MIN6细胞光镜图

为分析mi R-92a和mi R-19b可能通过调控哪些基因而影响胰岛素表达，我们通过生物信息学预测Neuro D1是mi R-92a和mi R-19b的靶基因，又通过双萤光素酶报告基因实验和Western blot，检测到mi R-19b显著抑制Neuro D1 3′UTR萤光素酶活性和Neuro D1蛋白表达（P<0.01），而mi R-92a对Neuro D13′UTR萤光素酶活性和Neuro D1蛋白表达仅起到微调作用，与NC组相比抑制作用无显著差异（P>0.05），见图7。图3 mi R-92a和mi R-19b在MIN6细胞中的过表达

mi R-92a和mi R-19b在MIN6细胞中的过表达

【参考文献】：
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本文编号：3248565