ARHGEF3基因在非小细胞肺癌细胞中功能与分子机制的研究
发布时间：2021-07-03 16:56
ARHGEF3是鸟核苷酸交换因子（GEF）的一种,属于DbI蛋白家族成员。众所周知,GEF蛋白可通过调控Rho家族蛋白的激活来影响细胞骨架形成,基因的转录,细胞的生长和迁移等众多生理功能。目前对ARHGEF3基因的研究相对较少。当前研究表明ARHGEF3蛋白发挥功能的分子机制主要包括两种,第一种是作为GEF,特异性激活RhoA和RhoB蛋白;另外一种是作为MTORC2的内源抑制分子。但ARHGEF3蛋白在肿瘤方面的研究甚少。另外ARHGEF3基因的反义链还可以转录一条新的长链非编码RNA-ARHGEF3-AS1,对该lncRNA的功能目前尚未知晓。本课题旨在研究ARHGEF3蛋白在非小细胞肺癌细胞的功能与机制,另外还初步探讨ARHGEF3-AS1在NSCLC细胞中的作用。我们研究发现ARHGEF3蛋白和ARHGEF3-AS1在非小细胞肺癌细胞中都呈高表达趋势。敲低ARHGEF3蛋白表达抑制H1299和A549细胞的生长、迁移,并且将细胞周期抑制在G0/G1期。进一步研究发现,ARHGEF3蛋白通过调控NF-kappaB信号通路影响Cyclin D1的转录从而影响细胞周期运转。此外,我们...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
ARHGEF3蛋白在非小细胞肺癌细胞中的表达
图 2.2ARHGEF3 蛋白促进非小细胞肺癌细胞的生长。A.在 H1299 中敲低 ARHGEF3 蛋白的表达，进行细胞生长实验，并用 Western Blot 检测 ARHGEF3 基因的干扰效率。B. 在 A549细胞中敲低 ARHGEF3 蛋白的表达，进行细胞生长实验，并用 Western Blot 检测干扰效率。C.在 H1299 细胞中干扰 ARHGEF3 蛋白的表达，进行克隆集落形成实验（上），克隆集落数量统计（右图）在 A549 细胞中干扰 ARHGEF3 蛋白的表达，进行克隆集落形成实验（下），克隆集落数量统计（右图）。2.4.3 ARHGEF3 蛋白促进非小细胞肺癌细胞的迁移在 H1299 细胞中，利用 RNAi 技术特异性敲低 ARHGEF3 基因的表达后，做细胞划痕、Transwell、鬼笔环肽染色实验，观察 ARHGEF3 蛋白对 NSCLC 细胞迁移的影响。实验发现，敲低 ARHGEF3 蛋白的表达能明显抑制细胞迁移能力（图 2.3AB），并且抑制细胞伪足的形成（图 2.3C）
图 2.3 ARHGEF3 蛋白促进 NSCLC 细胞的迁移。在 H表达,48h 后进行实验，A.划痕处理，每隔 12h 拍照处细胞迁移的宽度，并计算迁移速率（右）。B.将细胞铺穿过室的细胞进行拍照和计数统计（右）。C.进行鬼笔另外还检测了 ARHGEF3 蛋白的敲低效果。2.5 讨论ARHGEF3 蛋白在大脑、骨骼肌、肾脏、心异性的激活 Rho A 和 Rho B 两种 Rho 家族蛋白现相对于正常的组织细胞 ARHGEF3 蛋白是高的异常高表达和肿瘤的发生发展密切相关。根据实验，我们发现 ARHGEF3 蛋白在非小水平，还是蛋白水平都是高表达的，而在正常支这和之前的研究是相吻合的。另外，敲低 ARH
【参考文献】：
期刊论文
[1]非小细胞肺癌基因变异与靶向治疗药物的选择[J]. 邢晓清,赵婷,刘洪涛,李亚静,王琳珊,董占军. 中国临床药理学杂志. 2018(24)
[2]非小细胞肺癌靶向治疗药物的应用研究进展[J]. 汪俊剑. 中国处方药. 2018(12)
[3]非小细胞肺癌靶向治疗进展[J]. 赵青春,崔力元,陈军. 转化医学电子杂志. 2018(11)
[4]低剂量CT肺癌筛查的现状及启示[J]. 谭智爱. 心理月刊. 2018(09)
[5]非小细胞肺癌预后影响因素与靶向治疗药的疗效评估[J]. 陈耐华. 中国医学创新. 2016(01)
[6]Rho蛋白与恶性肿瘤相关性的研究进展[J]. 李凤茹,江华. 国际消化病杂志. 2014(01)
[7]长链非编码RNA研究进展[J]. 杨峰,易凡,曹慧青,梁子才,杜权. 遗传. 2014(05)
[8]长链非编码RNA与肿瘤的关系及其临床价值[J]. 宋皓军,俞秀冲,夏天,郭俊明,肖丙秀. 中国细胞生物学学报. 2012(07)
本文编号：3262980
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
ARHGEF3蛋白在非小细胞肺癌细胞中的表达
图 2.2ARHGEF3 蛋白促进非小细胞肺癌细胞的生长。A.在 H1299 中敲低 ARHGEF3 蛋白的表达，进行细胞生长实验，并用 Western Blot 检测 ARHGEF3 基因的干扰效率。B. 在 A549细胞中敲低 ARHGEF3 蛋白的表达，进行细胞生长实验，并用 Western Blot 检测干扰效率。C.在 H1299 细胞中干扰 ARHGEF3 蛋白的表达，进行克隆集落形成实验（上），克隆集落数量统计（右图）在 A549 细胞中干扰 ARHGEF3 蛋白的表达，进行克隆集落形成实验（下），克隆集落数量统计（右图）。2.4.3 ARHGEF3 蛋白促进非小细胞肺癌细胞的迁移在 H1299 细胞中，利用 RNAi 技术特异性敲低 ARHGEF3 基因的表达后，做细胞划痕、Transwell、鬼笔环肽染色实验，观察 ARHGEF3 蛋白对 NSCLC 细胞迁移的影响。实验发现，敲低 ARHGEF3 蛋白的表达能明显抑制细胞迁移能力（图 2.3AB），并且抑制细胞伪足的形成（图 2.3C）
图 2.3 ARHGEF3 蛋白促进 NSCLC 细胞的迁移。在 H表达,48h 后进行实验，A.划痕处理，每隔 12h 拍照处细胞迁移的宽度，并计算迁移速率（右）。B.将细胞铺穿过室的细胞进行拍照和计数统计（右）。C.进行鬼笔另外还检测了 ARHGEF3 蛋白的敲低效果。2.5 讨论ARHGEF3 蛋白在大脑、骨骼肌、肾脏、心异性的激活 Rho A 和 Rho B 两种 Rho 家族蛋白现相对于正常的组织细胞 ARHGEF3 蛋白是高的异常高表达和肿瘤的发生发展密切相关。根据实验，我们发现 ARHGEF3 蛋白在非小水平，还是蛋白水平都是高表达的，而在正常支这和之前的研究是相吻合的。另外，敲低 ARH
【参考文献】：
期刊论文
[1]非小细胞肺癌基因变异与靶向治疗药物的选择[J]. 邢晓清,赵婷,刘洪涛,李亚静,王琳珊,董占军. 中国临床药理学杂志. 2018(24)
[2]非小细胞肺癌靶向治疗药物的应用研究进展[J]. 汪俊剑. 中国处方药. 2018(12)
[3]非小细胞肺癌靶向治疗进展[J]. 赵青春,崔力元,陈军. 转化医学电子杂志. 2018(11)
[4]低剂量CT肺癌筛查的现状及启示[J]. 谭智爱. 心理月刊. 2018(09)
[5]非小细胞肺癌预后影响因素与靶向治疗药的疗效评估[J]. 陈耐华. 中国医学创新. 2016(01)
[6]Rho蛋白与恶性肿瘤相关性的研究进展[J]. 李凤茹,江华. 国际消化病杂志. 2014(01)
[7]长链非编码RNA研究进展[J]. 杨峰,易凡,曹慧青,梁子才,杜权. 遗传. 2014(05)
[8]长链非编码RNA与肿瘤的关系及其临床价值[J]. 宋皓军,俞秀冲,夏天,郭俊明,肖丙秀. 中国细胞生物学学报. 2012(07)
本文编号：3262980
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