过表达细叶百合LpNAC5和LpNAC13转基因烟草的抗逆性研究
发布时间：2021-07-09 02:57
细叶百合（Lilium pumilum）花色鲜红,耐盐碱,抗寒性强,是百合抗性育种的重要亲本。本研究以细叶百合LpNAC5和LpNAC13为研究对象,对其进行生物信息学分析,同时,利用荧光定量PCR分析2个基因的时空表达特性及非生物胁迫下基因表达模式,比较过表达LpNAC5和LpNAC13转基因烟草与野生型烟草在干旱、盐和碱胁迫下的生理特性差异,从而探索2个NAC基因在非生物胁迫下的功能.主要研究成果如下:1.生物信息学分析结果表明,LpNAC5和LpNACl3基因ORF区核酸编码的蛋白属于NAC家族,分别编码181和208个氨基酸,蛋白为无跨膜结构域的亲水性蛋白,N-末端有保守DNA结合结构域,被分为5个亚结构域（A～E）。序列同源性分析表明LpNAC5和LpNAC13编码蛋白与蓝花耧斗菜（Aquilegia coerulea）和海枣（Phoenix dactyliera）的同源性最高.系统进化树分析表明,LpNAC5和LpNAC13与拟南芥NAC083在同一枝进化树上,属于SENU5亚族。2.荧光定量分析LpNAC5和LpNAC13基因组织特异性结果表明,2个基因在各个组织中均有表...
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：93 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－４细叶百合（Ａ）、（Ｂ）蛋白氨基酸序列与拟南芥氨基酸序列的系??统进化树??
ＣＯＯｓ?：?ＡＮＡＣ００１??￣ｒｉ?．?－?ＡＨＡＣＣ－Ｃ?！??＾１?Ｉ?似０００５?丨?ＡＮＡＣＯｔｎ???ＫＡＣ?知??ＡＮＡＣＯＭ????Ｍ｜?ＵＡＣ０７５?Ｉ??＾００４４?ｉ??Ｉ?ｌｉＡＣＯＳＳ?！?ＯＮＡＣＯ０３????ＭＪ?ＮＡＣ０７５??３Ｊ??ＡｆｌＡＣＣ－ＶＪ?ｉ?１Ｗ??Ｉ?＇?ＮＡＣ０９９?：?ＯＮＡＣＯＯＢ???ＡＨＡＣＣ７３?丨?ｓＴｊ?｜?ＡＮＡＣＯｌＯ?；??ｅｅｌ?ＡＮＡＣ０７３?！??图２－４细叶百合（Ａ）、（Ｂ）蛋白氨基酸序列与拟南芥氨基酸序列的系??统进化树??Ｆｉｇ．２－４?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｒｅｅ?ｏｆ?ａｍｉｎｏ?ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ?ｏｆ?ＬｐＮＡＣ５?（Ａ）Ｎ?ＬｐＮＡＣ１３?（Ｂ）?ａｎｄ?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ??ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ?ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ??２．３＿１．４保守结构域分析??Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?Ｄｏｍａｉｎｓ保守区预测分析表明ＩｐＡＭＣＪ基因在１３－３７氨基酸处存??高度保守的ＮＡＭ域；基因在１６－１２７氨基酸处存在一个高度保守的??ＮＡＭ域，均属于ＮＡＣ基因家族（图２－５）。??）?？５?７Ｓ?ｌ？＊?ｉ２６?１７Ｓ?１８１??ｔ?ｔ?Ｉ?？?Ｉ?ｆ?ｉ?ｉ?ｔ?：?ｆ?ｔ?ｉ?ｔ?ｉ?Ｉ?ｉ?ｉ?■?ｉ?３?ｆ?：?ｉ?ｔ?Ｉ?＊?ｉ??Ｑｕｅｒｙ?ｓｅｑ．?Ａ??５？＞ｅｃｉｆｉｃ?ｈｉｔｓ??Ｓｕｐｅｒ?Ｆａｎｉｌ?ｉｅｓ?丨?ＮｆＶＩ?ｓ＾ｒｆａｗｉｉｙ?｜??Ｓｅａｒｃｈ?ｆｏｒ?ｓｉｎｖ，５ａｆ?ｄｏｆｎａｉｎ?ａ；ｃｈｉ；ｅｃｈ．ｔ
?２细叶百合ＬｐＡＵＣ５和ＬｐＡＵＣＶｊ基因生物信息学分析及其表达模式分杉ｆ???精氨酸含量最高，占１０．６?％，其次为丝氨酸９．１?％和亮胺酸８．２?％。??（２）蛋白质亲／疏水性预测??利用Ｐｒｏｔｓｃａｌｅ软件预测ＬｐＭ４Ｃ５和基因编码蛋白亲／疏水性，结果??表明，基因（图２－６Ａ）在第】１７位氨基酸残基处具有最强亲水性，最低??值为－２．５４４，在１００位氨基酸残基处具有最强疏水性，最高值为１．４４４，位于亲水??区的蛋白占绝大多数，表明ＬｐＡ＾Ｃ’５蛋白为亲水蛋白，与其预测为亲水蛋白相??合。??基因（图２－６Ｂ）在第１３４位氨基酸残基处具有最强亲水性，最低??值为－２．５３３，在４６位氨基酸残基处具有最强疏水性，最高值为１．６６７，位于亲水??区的蛋白占绝大多数，表明以从４￡７＿５蛋白为亲水蛋白，与其预测为亲水蛋白相??合．??＾?ＰｒｏｔＳｃａｌｅ?ｏｕｔｐｕｔ?ｆｏｒ?ｕｓｅｒ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ｇ?ＰｒｏｔＳｃａｌｅ?ｏｕｔｐｕｔ?ｆｏｒ?ｕｏｅｒ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ??１．５?￣＇?７．?＇?ＨｐｈｏＪ＾?／Ｋｙｔｅ?Ｇ?Ｄｃｗｌｉｔｔｉｅ???＾?＇?Ｈｐｈｏｂ?／Ｋｙｔｅ?＆?ｂｃｘＪＩｔｔｌｅ?—￣??。．：、?ｓ?ｌ?：?；：：?Ａ?，丨ｆ、：??？?ｏｉ．ｙｉ?Ｌｆ、丨，［丨ｉ?…。丨丨卜、ｉｉ?？?＼ｊ＼?｜?ｖ??１?１?ｙｌｆ！ｉ?，？?＾?ｉｉｒｌＪ?ｉｊ?ｉｒ?？＇??－Ｉ?ｗ?／?ｙ?＼ｉ＾?，：：１?ｆ＇?ｆ?Ｆ｜！?：．?Ｊｊ?：??ｆ?：?ｒ?ｆ??？３????＇?????????■????－３??■?＇?１????２０?４０
【参考文献】：
期刊论文
[1]PEG-8000模拟干旱胁迫对马铃薯组培苗叶绿素和类胡萝卜素含量的影响[J]. 杨喜珍,杨利,覃亚,刘磊,杨欢,谢婉. 中国马铃薯. 2019(04)
[2]高温胁迫对植物生理影响的研究进展[J]. 解玉玲. 吉林农业. 2019(08)
[3]观赏植物耐热性研究进展[J]. 许蓝心,田如男. 亚热带植物科学. 2019(01)
[4]植物干旱胁迫响应机制研究进展[J]. 王凯悦,陈芳泉,黄五星. 中国农业科技导报. 2019(02)
[5]植物NAC转录因子的研究进展[J]. 王芳,孙立娇,赵晓宇,王婕婉,宋兴舜. 生物技术通报. 2019(04)
[6]细叶百合LpSVP基因的克隆及其表达分析[J]. 汪王,苏小霞,杨柳慧,周蕴薇. 西北林学院学报. 2018(04)
[7]百合转P5CS-F129A基因的遗传稳定性和耐旱性检测[J]. 闫笑,魏迟,张冬梅,贾桂霞. 北京林业大学学报. 2018(02)
[8]杨树NAC7转录因子基因应答盐胁迫表达[J]. 张雪梅,姚文静,赵凯,姜廷波,周博如. 东北林业大学学报. 2017(08)
[9]紫花苜蓿NAC类转录因子基因MsNAC2的克隆及其功能分析[J]. 申玉华,徐振军,唐立红,杨晓坡,黄文婕,武小斌,张文波. 中国农业科学. 2015(15)
[10]ABA缓解水稻孕穗期干旱胁迫生理特性的分析[J]. 郭贵华,刘海艳,李刚华,刘明,李岩,王绍华,刘正辉,唐设,丁艳锋. 中国农业科学. 2014(22)
博士论文
[1]棉花GhWRKY25基因的克隆及功能分析[D]. 刘秀芳.山东农业大学 2015
硕士论文
[1]细叶百合LpNAC6和LpNAC20基因的克隆及其在烟草中的抗盐功能分析[D]. 曹尚杰.东北林业大学 2019
[2]细叶百合LpWRKY20基因的克隆及其对烟草的遗传转化[D]. 杨柳慧.东北林业大学 2019
[3]细叶百合3个NAC转录因子的克隆及其对烟草的遗传转化[D]. 关春景.东北林业大学 2018
[4]LcGR基因在烟草中的功能验证以及在百合抗重金属中的应用[D]. 安婷.天津大学 2018
[5]岷江百合LrABCF1基因的克隆及功能验证[D]. 李绍华.西北农林科技大学 2017
[6]转APX基因仙客来植株的获得及转S6PDH基因百合的耐旱性研究[D]. 朱艳玲.西北农林科技大学 2009
[7]百合对盐胁迫的生理反应及转S6PDH基因植株的抗盐性鉴定[D]. 华智锐.西北农林科技大学 2007
[8]麝香百合和仙客来转Mn-SOD基因植株的获得及其耐热性鉴定[D]. 陈莉.西北农林科技大学 2007
[9]中国野生百合资源调查及遗传多样性分析[D]. 王洁琼.北京林业大学 2006
本文编号：3272871
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：93 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－４细叶百合（Ａ）、（Ｂ）蛋白氨基酸序列与拟南芥氨基酸序列的系??统进化树??
ＣＯＯｓ?：?ＡＮＡＣ００１??￣ｒｉ?．?－?ＡＨＡＣＣ－Ｃ?！??＾１?Ｉ?似０００５?丨?ＡＮＡＣＯｔｎ???ＫＡＣ?知??ＡＮＡＣＯＭ????Ｍ｜?ＵＡＣ０７５?Ｉ??＾００４４?ｉ??Ｉ?ｌｉＡＣＯＳＳ?！?ＯＮＡＣＯ０３????ＭＪ?ＮＡＣ０７５??３Ｊ??ＡｆｌＡＣＣ－ＶＪ?ｉ?１Ｗ??Ｉ?＇?ＮＡＣ０９９?：?ＯＮＡＣＯＯＢ???ＡＨＡＣＣ７３?丨?ｓＴｊ?｜?ＡＮＡＣＯｌＯ?；??ｅｅｌ?ＡＮＡＣ０７３?！??图２－４细叶百合（Ａ）、（Ｂ）蛋白氨基酸序列与拟南芥氨基酸序列的系??统进化树??Ｆｉｇ．２－４?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｒｅｅ?ｏｆ?ａｍｉｎｏ?ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ?ｏｆ?ＬｐＮＡＣ５?（Ａ）Ｎ?ＬｐＮＡＣ１３?（Ｂ）?ａｎｄ?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ??ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ?ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ??２．３＿１．４保守结构域分析??Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?Ｄｏｍａｉｎｓ保守区预测分析表明ＩｐＡＭＣＪ基因在１３－３７氨基酸处存??高度保守的ＮＡＭ域；基因在１６－１２７氨基酸处存在一个高度保守的??ＮＡＭ域，均属于ＮＡＣ基因家族（图２－５）。??）?？５?７Ｓ?ｌ？＊?ｉ２６?１７Ｓ?１８１??ｔ?ｔ?Ｉ?？?Ｉ?ｆ?ｉ?ｉ?ｔ?：?ｆ?ｔ?ｉ?ｔ?ｉ?Ｉ?ｉ?ｉ?■?ｉ?３?ｆ?：?ｉ?ｔ?Ｉ?＊?ｉ??Ｑｕｅｒｙ?ｓｅｑ．?Ａ??５？＞ｅｃｉｆｉｃ?ｈｉｔｓ??Ｓｕｐｅｒ?Ｆａｎｉｌ?ｉｅｓ?丨?ＮｆＶＩ?ｓ＾ｒｆａｗｉｉｙ?｜??Ｓｅａｒｃｈ?ｆｏｒ?ｓｉｎｖ，５ａｆ?ｄｏｆｎａｉｎ?ａ；ｃｈｉ；ｅｃｈ．ｔ
?２细叶百合ＬｐＡＵＣ５和ＬｐＡＵＣＶｊ基因生物信息学分析及其表达模式分杉ｆ???精氨酸含量最高，占１０．６?％，其次为丝氨酸９．１?％和亮胺酸８．２?％。??（２）蛋白质亲／疏水性预测??利用Ｐｒｏｔｓｃａｌｅ软件预测ＬｐＭ４Ｃ５和基因编码蛋白亲／疏水性，结果??表明，基因（图２－６Ａ）在第】１７位氨基酸残基处具有最强亲水性，最低??值为－２．５４４，在１００位氨基酸残基处具有最强疏水性，最高值为１．４４４，位于亲水??区的蛋白占绝大多数，表明ＬｐＡ＾Ｃ’５蛋白为亲水蛋白，与其预测为亲水蛋白相??合。??基因（图２－６Ｂ）在第１３４位氨基酸残基处具有最强亲水性，最低??值为－２．５３３，在４６位氨基酸残基处具有最强疏水性，最高值为１．６６７，位于亲水??区的蛋白占绝大多数，表明以从４￡７＿５蛋白为亲水蛋白，与其预测为亲水蛋白相??合．??＾?ＰｒｏｔＳｃａｌｅ?ｏｕｔｐｕｔ?ｆｏｒ?ｕｓｅｒ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ｇ?ＰｒｏｔＳｃａｌｅ?ｏｕｔｐｕｔ?ｆｏｒ?ｕｏｅｒ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ??１．５?￣＇?７．?＇?ＨｐｈｏＪ＾?／Ｋｙｔｅ?Ｇ?Ｄｃｗｌｉｔｔｉｅ???＾?＇?Ｈｐｈｏｂ?／Ｋｙｔｅ?＆?ｂｃｘＪＩｔｔｌｅ?—￣??。．：、?ｓ?ｌ?：?；：：?Ａ?，丨ｆ、：??？?ｏｉ．ｙｉ?Ｌｆ、丨，［丨ｉ?…。丨丨卜、ｉｉ?？?＼ｊ＼?｜?ｖ??１?１?ｙｌｆ！ｉ?，？?＾?ｉｉｒｌＪ?ｉｊ?ｉｒ?？＇??－Ｉ?ｗ?／?ｙ?＼ｉ＾?，：：１?ｆ＇?ｆ?Ｆ｜！?：．?Ｊｊ?：??ｆ?：?ｒ?ｆ??？３????＇?????????■????－３??■?＇?１????２０?４０
【参考文献】：
期刊论文
[1]PEG-8000模拟干旱胁迫对马铃薯组培苗叶绿素和类胡萝卜素含量的影响[J]. 杨喜珍,杨利,覃亚,刘磊,杨欢,谢婉. 中国马铃薯. 2019(04)
[2]高温胁迫对植物生理影响的研究进展[J]. 解玉玲. 吉林农业. 2019(08)
[3]观赏植物耐热性研究进展[J]. 许蓝心,田如男. 亚热带植物科学. 2019(01)
[4]植物干旱胁迫响应机制研究进展[J]. 王凯悦,陈芳泉,黄五星. 中国农业科技导报. 2019(02)
[5]植物NAC转录因子的研究进展[J]. 王芳,孙立娇,赵晓宇,王婕婉,宋兴舜. 生物技术通报. 2019(04)
[6]细叶百合LpSVP基因的克隆及其表达分析[J]. 汪王,苏小霞,杨柳慧,周蕴薇. 西北林学院学报. 2018(04)
[7]百合转P5CS-F129A基因的遗传稳定性和耐旱性检测[J]. 闫笑,魏迟,张冬梅,贾桂霞. 北京林业大学学报. 2018(02)
[8]杨树NAC7转录因子基因应答盐胁迫表达[J]. 张雪梅,姚文静,赵凯,姜廷波,周博如. 东北林业大学学报. 2017(08)
[9]紫花苜蓿NAC类转录因子基因MsNAC2的克隆及其功能分析[J]. 申玉华,徐振军,唐立红,杨晓坡,黄文婕,武小斌,张文波. 中国农业科学. 2015(15)
[10]ABA缓解水稻孕穗期干旱胁迫生理特性的分析[J]. 郭贵华,刘海艳,李刚华,刘明,李岩,王绍华,刘正辉,唐设,丁艳锋. 中国农业科学. 2014(22)
博士论文
[1]棉花GhWRKY25基因的克隆及功能分析[D]. 刘秀芳.山东农业大学 2015
硕士论文
[1]细叶百合LpNAC6和LpNAC20基因的克隆及其在烟草中的抗盐功能分析[D]. 曹尚杰.东北林业大学 2019
[2]细叶百合LpWRKY20基因的克隆及其对烟草的遗传转化[D]. 杨柳慧.东北林业大学 2019
[3]细叶百合3个NAC转录因子的克隆及其对烟草的遗传转化[D]. 关春景.东北林业大学 2018
[4]LcGR基因在烟草中的功能验证以及在百合抗重金属中的应用[D]. 安婷.天津大学 2018
[5]岷江百合LrABCF1基因的克隆及功能验证[D]. 李绍华.西北农林科技大学 2017
[6]转APX基因仙客来植株的获得及转S6PDH基因百合的耐旱性研究[D]. 朱艳玲.西北农林科技大学 2009
[7]百合对盐胁迫的生理反应及转S6PDH基因植株的抗盐性鉴定[D]. 华智锐.西北农林科技大学 2007
[8]麝香百合和仙客来转Mn-SOD基因植株的获得及其耐热性鉴定[D]. 陈莉.西北农林科技大学 2007
[9]中国野生百合资源调查及遗传多样性分析[D]. 王洁琼.北京林业大学 2006
本文编号：3272871
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3272871.html
最近更新
教材专著
