水稻OsVDAC3超表达转基因植株鉴定和OsVDAC1原核表达载体构建
发布时间：2021-07-10 11:48
电压依赖性阴离子通道（voltage-dependent anion channel,VDAC）广泛存在于各种真核生物中,是一类孔蛋白,通过电压的变化来调节物质的运输。前期本实验室已鉴定水稻基因组含8种vdac基因,并且研究得知OsVDAC3超表达的YTB植株相较于野生型对耐寒及耐盐性有一定的敏感性,同时得到了一批OsVDAC3超表达的YTB的种子。本实验期望通过对这批材料的鉴定,排除受到基因污染和分离的种子获得符合条件的阳性植株便于下一步的研究,同时对OsVDAC1进行了原核表达载体的构建,取得了如下结果:1.对得到的OsVDAC3超表达的YTB的种子进行培养,提取基因组DNA后筛选Hyg阳性的植株。在阳性植株筛选出不含Rf5和Rf6基因的植株。再通过OrfH79以及Orf216的鉴定来判断其受体是YTA还是YTB。经过筛选和复查,鉴定出了几十株符合条件的OsVDAC3转YTB植株,未鉴定出OsVDAC3转YTA植株。2.对OsVDAC1的生物信息学分析表明其ORF序列大小为825bp,编码274个氨基酸残基。从日本晴cDNA扩增得到OsVDAC1的ORF,成功构建了重组质粒pET-...
【文章来源】：中南民族大学湖北省
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
VDAC1蛋白三维结构示意图(Tarasovaetal.,2016)
图 2 VDAC 控制细胞色素 C 释放的机制 2 VDAC-dependent mechanism of cytochrome c release(Tsujimoto eVDAC 表达水平的改变也会影响线粒体的功能 (Abu-Ham; Zweckstetter, 2010)。 研究发现，使用 siRNA 干扰 VDAC的 PTP 以及内皮细胞凋亡会随着 VDAC 表达量的减eddine e al., 2008; Yuan et al., 2008)；使用顺铂诱导 Cyt C子(AIF)释放，RNA 干扰后，VDAC 表达量的降低也会对；Bax 的活化和胱天蛋白酶 3 的成熟等，会因为干扰而抑其过表达会使线粒体内膜去极化(Zweckstetter, 2010)。机制朗，目前有研究表明可能是因为 VDAC 超表达通过降低电聚体或与 ANT 相互作用等机制改变了通透性(Zweckstetteo et al., 2010)。有最新的研究表明，阿司匹林触发癌细胞凋癌效应的机制很有可能就与其调节 VDAC 的构象有关(Tew)。
图 2.1 部分转基因植株的 Hyg 检测泳道 1-16：不同植株的 Hyg PCR 扩增Fig2.1 Identification of Hyg by PCR in some transgenic plantsLane1-16：T h e a m p l i f i c a t i o n o f H y g o f d i f f e r e n t p l a n t s b y P C R图 2.2 部分转基因植株的 Rf5 检测
【参考文献】：
期刊论文
[1]水稻基因OsVDAC3的逆境功能分析[J]. 胡颖,王春台,覃永华. 华中农业大学学报. 2015(06)
[2]电压依赖性阴离子通道VDAC3参与拟南芥先天免疫[J]. 王程程,杜秋丽,伍粲,郭葳,邱金龙. 植物病理学报. 2015(04)
[3]AtVDAC2参与拟南芥盐胁迫信号应答过程[J]. 文国琴,刘志斌,李旭锋,王健美,杨毅. 四川大学学报(自然科学版). 2012(04)
[4]植物的超敏性细胞死亡研究初探[J]. 范文艳. 黑龙江农业科学. 2005(02)
硕士论文
[1]水稻vdac、ant及HL-sp1基因的表达研究[D]. 罗凤燕.中南民族大学 2010
本文编号：3275860
【文章来源】：中南民族大学湖北省
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
VDAC1蛋白三维结构示意图(Tarasovaetal.,2016)
图 2 VDAC 控制细胞色素 C 释放的机制 2 VDAC-dependent mechanism of cytochrome c release(Tsujimoto eVDAC 表达水平的改变也会影响线粒体的功能 (Abu-Ham; Zweckstetter, 2010)。 研究发现，使用 siRNA 干扰 VDAC的 PTP 以及内皮细胞凋亡会随着 VDAC 表达量的减eddine e al., 2008; Yuan et al., 2008)；使用顺铂诱导 Cyt C子(AIF)释放，RNA 干扰后，VDAC 表达量的降低也会对；Bax 的活化和胱天蛋白酶 3 的成熟等，会因为干扰而抑其过表达会使线粒体内膜去极化(Zweckstetter, 2010)。机制朗，目前有研究表明可能是因为 VDAC 超表达通过降低电聚体或与 ANT 相互作用等机制改变了通透性(Zweckstetteo et al., 2010)。有最新的研究表明，阿司匹林触发癌细胞凋癌效应的机制很有可能就与其调节 VDAC 的构象有关(Tew)。
图 2.1 部分转基因植株的 Hyg 检测泳道 1-16：不同植株的 Hyg PCR 扩增Fig2.1 Identification of Hyg by PCR in some transgenic plantsLane1-16：T h e a m p l i f i c a t i o n o f H y g o f d i f f e r e n t p l a n t s b y P C R图 2.2 部分转基因植株的 Rf5 检测
【参考文献】：
期刊论文
[1]水稻基因OsVDAC3的逆境功能分析[J]. 胡颖,王春台,覃永华. 华中农业大学学报. 2015(06)
[2]电压依赖性阴离子通道VDAC3参与拟南芥先天免疫[J]. 王程程,杜秋丽,伍粲,郭葳,邱金龙. 植物病理学报. 2015(04)
[3]AtVDAC2参与拟南芥盐胁迫信号应答过程[J]. 文国琴,刘志斌,李旭锋,王健美,杨毅. 四川大学学报(自然科学版). 2012(04)
[4]植物的超敏性细胞死亡研究初探[J]. 范文艳. 黑龙江农业科学. 2005(02)
硕士论文
[1]水稻vdac、ant及HL-sp1基因的表达研究[D]. 罗凤燕.中南民族大学 2010
本文编号：3275860
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3275860.html
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