人胃癌细胞BGC823中miR-200c靶基因产物波形蛋白的检测及功能研究

发布时间：2021-07-22 17:17

　　目的:采用RNA靶向干扰技术,研究人胃癌细胞BGC823中微小RNA（microRNA, miRNA, miR）-200c的靶点锌指E盒增强子结合蛋白2（zinc finger E-box enhancer binding protein 2, ZEB2）基因的表达情况,并检测相关的波形蛋白基因表达情况,观察miR-200c对胃癌BGC823细胞功能的影响。方法:构建ZEB2基因表达的干扰质粒shZEB2,用Lipofectamine 2000转染胃癌BGC823细胞,用G418筛选稳定转染细胞株,进行实时定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）检测人BCG823细胞中ZEB2 mRNA、miR-200c及波形蛋白基因的表达水平,并用蛋白印迹法检测ZEB2蛋白、波形蛋白表达水平,噻唑蓝（methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT）法检测细胞增殖能力;Transwell小室检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力。结果:干扰ZEB2分子表达后,miR-200c表达水平增高,而BGC823细胞的增... 

【文章来源】：诊断学理论与实践. 2020,19(04)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

转染后BCG823细胞中ZEB2表达

用MTT实验检测转染后胃癌细胞增殖能力，结果显示，自第4天开始，shZEB2组较Scramble组BCG823细胞中肿瘤细胞增殖能力降低，差异有统计学意义（见表1）。该结果显示，ZEB2低表达时胃癌细胞增殖能力降低（见图2）。四、肿瘤细胞侵袭力检测

本研究采用Transwell小室法检测肿瘤细胞侵袭能力，将肿瘤细胞种于Transwell小室内24 h后，取出小室，采用结晶紫染色小室背面的基质胶，在高倍显微镜下观察小室背面基质胶里的细胞，了解肿瘤细胞侵袭情况。结果显示，shZEB2组较Scramble组的胃癌细胞侵袭力降低，差异有统计学意义（P<0.01）。结果提示，ZEB2低表达时胃癌细胞在基质胶中的侵袭能力降低（见图3）。五、细胞迁移能力检测

【参考文献】：
期刊论文
[1]Incidence and mortality of stomach cancer in China,2014[J]. Lei Yang,Rongshou Zheng,Ning Wang,Yannan Yuan,Shuo Liu,Huichao Li,Siwei Zhang,Hongmei Zeng,Wanqing Chen.  Chinese Journal of Cancer Research. 2018(03)



本文编号：3297563