低温常压等离子体抑制三阴性乳腺癌细胞活性及与阿伐他汀联用的关键基因探究
发布时间：2021-07-27 05:58
乳腺癌一直以来都是危害女性身体和心理健康甚至危及生命的一种疾病。乳腺癌细胞系根据细胞表面受体的表达量不同而被分为许多亚型,例如Luminal,HER2和三阴性等等,其中三阴性乳腺癌是恶性程度最高的一类。三阴性乳腺癌因为缺乏相关靶向分子药物而导致该疾病的治愈率低,临床预后较差,所以开发一种新型治疗方法对三阴性乳腺癌的治疗具有重要意义。低温常压等离子体是大气辉光放电的一种等离子体源,近年来因为其在生物医学领域的应用而被越来越多的人关注。经研究,低温常压等离子体会使细胞中基因表达和信号通路发生复杂的改变,并且其对癌细胞具有良好的杀伤作用,但是它的治疗机理至今并没有被完整的阐述。本实验室前期研究发现低温常压等离子体可以特异性的抑制三阴性乳腺癌细胞的活性而不改变其他亚型的细胞活性,并结合转录组数据分析发现,与其他亚型细胞系相比,经过等离子体处理的三阴性乳腺癌细胞系中,肿瘤干性相关的基因mi RNA-146b-5p与FA2H的表达量有着显著差异,根据这一现象及分析结果,本文将进一步研究低温常压等离子体治疗三阴性乳腺癌的相关机理。在本研究中,我们选用三阴性乳腺癌细胞SUM149PT作为研究对象,通过...
【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
低温常压等离子体装置
胱犹宕?砗蟮谋泶锪勘浠??3.1.1miRNA-146b-5p的转录组数据验证对实验室前期得到的miRNA-146b-5p基因进行表达量的验证，图3-1（a）为该非编码RNA在转录组学实验中得出的数据，发现其在三阴性乳腺癌SUM149PT细胞中会受低温常压等离子体处理的影响而发生表达量的升高，但是却在非三阴性乳腺癌MCF7细胞中不受低温常压等离子体处理的影响；图3-1（b）为利用qRT-PCR实验验证该非编码RNA的表达量变化，结果与转录组数据一致，所以我们认为miRNA-146b-5p基因极有可能是低温常压等离子体选择性抑制三阴性乳腺癌活性的关键基因。图3-1miRNA-146b-5p基因mRNA水平相对表达(a)miRNA-146b-5p基因转录数据；(b)miRNA-146b-5p基因相对mRNA表达。Fig.3-1ThemRNAexpressionprofileofmiRNA-146b-5p(***P＜0.001)(a)ThetranscriptiondataofmiRNA-146b-5p,(b)themRNAexpressionprofileofmiRNA-146b-5p.3.1.2FA2H的转录组数据验证对实验室前期得到的FA2H基因进行表达量的验证，图3-2（a）为该基因在转录组学实验中得出的数据，发现其在三阴性乳腺癌SUM149PT细胞中会受低温常压等离子体处理的影响而发生表达量的升高，但是却在非三阴性乳腺癌MCF7细胞中不受低温常压等离子体处理的影响；图3-1（b）为利用qRT-PCR实验验证该基因的表达量变化，结果与转录组数据一致，所以我们认为FA2H基因极有可能是低温常压等离子体选择性抑制三阴性乳腺癌活性的关键基因。
第三章结果与讨论19图3-2FA2H基因mRNA水平相对表达(a)FA2H基因转录数据；(b)FA2H基因相对mRNA表达。Fig.3-2ThemRNAexpressionprofileofFA2H(***P＜0.001)(a)ThetranscriptiondataofmiRNA-146b-5p,(b)themRNAexpressionprofileofFA2H.3.1.3小结根据实验结果发现，miRNA-146b-5p和FA2H基因的表达量在三阴性乳腺癌细胞中受到低温常压等离子体的调控，而在非三阴性乳腺癌细胞中不受影响，并且这两个基因同时可以影响下游的干性相关基因表达量的变化，所以我们认为miRNA-146b-5p和FA2H基因极有可能是低温常压等离子体影响肿瘤干性并特异性杀伤三阴性乳腺癌细胞的关键基因。故在接下来的实验中，我们选取一株三阴性乳腺癌细胞SUM149PT进一步研究这两个基因在低温常压等离子体处理后所发生的功能性变化。3.2miRNA-146b-5p的功能研究三阴性乳腺癌是恶性程度最高的乳腺癌，因其缺乏靶向治疗而成为难治之症。在本课题组之前的研究中发现，低温常压等离子体可以特异性杀伤三阴性乳腺癌而不影响其他亚型乳腺癌细胞和正常乳腺细胞，同时我们猜想这种情况似乎和细胞干性有着千丝万缕的联系，而肿瘤干细胞的干性往往又会影响细胞的表型。现有文献指出miRNA-146b-5p可以靶向调控IL-6基因[84]，IL-6基因又影响着细胞的干性[85]，这也为我们的猜想提供了强有力的支撑。在本节研究中，我们会通过在三阴性乳腺癌SUM149PT细胞中过表达和敲降miRNA-146b-5p的实验方法研究该miRNA与乳腺癌细胞增殖、迁移、凋亡和干性的关系，进而证实该miRNA是否是低温常压等离子体影响细胞表型和细胞干性的关键因素。3.2.1miRNA-146b-5p在SUM149PT细胞中的过表达和敲降以三阴性乳腺癌细胞SUM149PT为研究对象，利用细胞转染技术将miRNAmimic和miRNAinhibitor转染进细胞从而达到?
【参考文献】：
期刊论文
[1]低温常压等离子技术在肿瘤学中的应用[J]. 戚赢,俞梦婕,侯中宇,姚瑜. 中国生物医学工程学报. 2019(04)
[2]Glucocorticoid receptor regulates expression of microRNA-22 and downstream signaling pathway in apoptosis of pancreatic acinar cells[J]. Qiang Fu,Chuan-Jiang Liu,Xu Zhang,Zhen-Sheng Zhai,Yu-Zhu Wang,Ming-Xing Hu,Xian-Ling Xu,Hong-Wei Zhang,Tao Qin. World Journal of Gastroenterology. 2018(45)
[3]阿伐他汀联合贝那普利治疗早期糖尿病肾病临床观察[J]. 武贵群,高翔,梅长林. 中国中西医结合肾病杂志. 2013(02)
[4]乳腺癌干细胞研究进展[J]. 白敬超,张瑾. 中国全科医学. 2012(35)
博士论文
[1]Wnt/β-catenin信号通路介导的MiRNA-146b-5p对甲状腺乳头状癌细胞侵袭迁移影响的研究[D]. 刘洋.郑州大学 2017
硕士论文
[1]FA2H作为乳腺癌的治疗靶点及预后因子的研究[D]. 赵荣昌.苏州大学 2019
[2]低温常压等离子体对不同亚型乳腺癌细胞的影响及机理研究[D]. 项良剑.江南大学 2018
本文编号：3305227
【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
低温常压等离子体装置
胱犹宕?砗蟮谋泶锪勘浠??3.1.1miRNA-146b-5p的转录组数据验证对实验室前期得到的miRNA-146b-5p基因进行表达量的验证，图3-1（a）为该非编码RNA在转录组学实验中得出的数据，发现其在三阴性乳腺癌SUM149PT细胞中会受低温常压等离子体处理的影响而发生表达量的升高，但是却在非三阴性乳腺癌MCF7细胞中不受低温常压等离子体处理的影响；图3-1（b）为利用qRT-PCR实验验证该非编码RNA的表达量变化，结果与转录组数据一致，所以我们认为miRNA-146b-5p基因极有可能是低温常压等离子体选择性抑制三阴性乳腺癌活性的关键基因。图3-1miRNA-146b-5p基因mRNA水平相对表达(a)miRNA-146b-5p基因转录数据；(b)miRNA-146b-5p基因相对mRNA表达。Fig.3-1ThemRNAexpressionprofileofmiRNA-146b-5p(***P＜0.001)(a)ThetranscriptiondataofmiRNA-146b-5p,(b)themRNAexpressionprofileofmiRNA-146b-5p.3.1.2FA2H的转录组数据验证对实验室前期得到的FA2H基因进行表达量的验证，图3-2（a）为该基因在转录组学实验中得出的数据，发现其在三阴性乳腺癌SUM149PT细胞中会受低温常压等离子体处理的影响而发生表达量的升高，但是却在非三阴性乳腺癌MCF7细胞中不受低温常压等离子体处理的影响；图3-1（b）为利用qRT-PCR实验验证该基因的表达量变化，结果与转录组数据一致，所以我们认为FA2H基因极有可能是低温常压等离子体选择性抑制三阴性乳腺癌活性的关键基因。
第三章结果与讨论19图3-2FA2H基因mRNA水平相对表达(a)FA2H基因转录数据；(b)FA2H基因相对mRNA表达。Fig.3-2ThemRNAexpressionprofileofFA2H(***P＜0.001)(a)ThetranscriptiondataofmiRNA-146b-5p,(b)themRNAexpressionprofileofFA2H.3.1.3小结根据实验结果发现，miRNA-146b-5p和FA2H基因的表达量在三阴性乳腺癌细胞中受到低温常压等离子体的调控，而在非三阴性乳腺癌细胞中不受影响，并且这两个基因同时可以影响下游的干性相关基因表达量的变化，所以我们认为miRNA-146b-5p和FA2H基因极有可能是低温常压等离子体影响肿瘤干性并特异性杀伤三阴性乳腺癌细胞的关键基因。故在接下来的实验中，我们选取一株三阴性乳腺癌细胞SUM149PT进一步研究这两个基因在低温常压等离子体处理后所发生的功能性变化。3.2miRNA-146b-5p的功能研究三阴性乳腺癌是恶性程度最高的乳腺癌，因其缺乏靶向治疗而成为难治之症。在本课题组之前的研究中发现，低温常压等离子体可以特异性杀伤三阴性乳腺癌而不影响其他亚型乳腺癌细胞和正常乳腺细胞，同时我们猜想这种情况似乎和细胞干性有着千丝万缕的联系，而肿瘤干细胞的干性往往又会影响细胞的表型。现有文献指出miRNA-146b-5p可以靶向调控IL-6基因[84]，IL-6基因又影响着细胞的干性[85]，这也为我们的猜想提供了强有力的支撑。在本节研究中，我们会通过在三阴性乳腺癌SUM149PT细胞中过表达和敲降miRNA-146b-5p的实验方法研究该miRNA与乳腺癌细胞增殖、迁移、凋亡和干性的关系，进而证实该miRNA是否是低温常压等离子体影响细胞表型和细胞干性的关键因素。3.2.1miRNA-146b-5p在SUM149PT细胞中的过表达和敲降以三阴性乳腺癌细胞SUM149PT为研究对象，利用细胞转染技术将miRNAmimic和miRNAinhibitor转染进细胞从而达到?
【参考文献】：
期刊论文
[1]低温常压等离子技术在肿瘤学中的应用[J]. 戚赢,俞梦婕,侯中宇,姚瑜. 中国生物医学工程学报. 2019(04)
[2]Glucocorticoid receptor regulates expression of microRNA-22 and downstream signaling pathway in apoptosis of pancreatic acinar cells[J]. Qiang Fu,Chuan-Jiang Liu,Xu Zhang,Zhen-Sheng Zhai,Yu-Zhu Wang,Ming-Xing Hu,Xian-Ling Xu,Hong-Wei Zhang,Tao Qin. World Journal of Gastroenterology. 2018(45)
[3]阿伐他汀联合贝那普利治疗早期糖尿病肾病临床观察[J]. 武贵群,高翔,梅长林. 中国中西医结合肾病杂志. 2013(02)
[4]乳腺癌干细胞研究进展[J]. 白敬超,张瑾. 中国全科医学. 2012(35)
博士论文
[1]Wnt/β-catenin信号通路介导的MiRNA-146b-5p对甲状腺乳头状癌细胞侵袭迁移影响的研究[D]. 刘洋.郑州大学 2017
硕士论文
[1]FA2H作为乳腺癌的治疗靶点及预后因子的研究[D]. 赵荣昌.苏州大学 2019
[2]低温常压等离子体对不同亚型乳腺癌细胞的影响及机理研究[D]. 项良剑.江南大学 2018
本文编号：3305227
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