配子母细胞特异因子gtsf1基因在斑马鱼生殖细胞发育中的功能初探
发布时间：2021-08-01 23:40
配子母细胞特异因子1（Gtsf1）属UPF0224蛋白家族,含一个保守的CHHC锌指结构域,对生殖细胞的发育至关重要.小鼠（Mus musculus）和果蝇（Drosophila melanogaster）中Gtsf1的缺失分别导致雄性和雌性不育,高不育风险（HIR）隐睾症患者的睾丸中GTSF1的mRNA和蛋白表达均显著下调,但gtsf1在精子发生中的功能机制尚不完全清楚.利用类转录激活因子效应物核酸酶（TALEN）技术,首次在斑马鱼（Danio rerio）中成功制备了gtsf1突变体.观察发现,突变体的生长、表型正常,但gtsf1纯合突变体（gtsf1-/-）成鱼全为雄性.进一步的组织学观察表明,gtsf1-/-成鱼精巢中初级精母细胞数量基本正常,次级精母细胞显著减少,精细管管腔中精子极少或缺失.提示gtsf1在脊椎动物的精子发生过程中有保守的作用.本研究为阐明gtsf1在精子发育中的作用机制奠定了基础.
【文章来源】：中国科学:生命科学. 2016,46(04)北大核心CSCD
【文章页数】：10 页
【部分图文】：
斑马伯以.力-TA,.RN左右臂及靶价点示煮图
4C所示.2.5斑马鱼gtsf1/性腺中gtsf1mRNA基本不表达为了证实TALEN敲除后纯合突变体的gtsf1的功能缺失,用原位杂交的方法对WT和gtsf1/精巢中gtsf1基因在mRNA表达水平进行了验证,结果如图5所示,WT精巢中gtsf1在精原细胞,初级精母细胞和次级精母细胞中有较高的表达,而在gtsf1/精巢中gtsf1基本不表达,因此,gtsf1功能已缺失.2.6斑马鱼gtsf1/的表型和育性观察发现,筛选出的gtsf1/与WT及gtsf1/相比生长速度无显著差异,表型也似正常(图6),然而gtsf1/成鱼全部为雄性,且gtsf1/的数量多于预期图2Gtsf1蛋白CHHC锌指结构域在部分物种中的同源性分析斑马鱼与人类、家鼠、原鸡、美洲鳄和非洲爪蛙Gtsf1蛋白CHHC锌指结构域的同源性比对.可见斑马鱼与上述物种的CHHC锌指结构域具有较高的同源性,斑马鱼与它们的序列相似度分别为68.9%,67.2%,63.9%,62.3%,62.3%.氨基酸颜色的深浅根据同源型高低由软件GeneDoc做出:黑色(100%相同)、灰色(80%相同)、浅灰色(60%相同).显示gtsf1基因进化保守性
刁奄瓦也.‘力耸田魏路睛翻的百待翻右图
【参考文献】：
期刊论文
[1]TALEN构建与斑马鱼基因组定点突变的实验方法与流程[J]. 沈延,黄鹏,张博. 遗传. 2013(04)
[2]类转录激活因子效应物核酸酶（TALEN）介导的基因组定点修饰技术[J]. 沈延,肖安,黄鹏,王唯晔,朱作言,张博. 遗传. 2013(04)
[3]Efficient and Specific Modifications of the Drosophila Genome by Means of an Easy TALEN Strategy[J]. Jiyong Liu~a,Changqing Li~a,Zhongsheng Yu~a,Peng Huang~b,Honggang Wu~a,Chuanxian Wei~a, Nannan Zhu~a,Yan Shen~b,Yixu Chen~a,Bo Zhang~b,Wu-Min Deng~(c,*),Renjie Jiao~(a,*) a State Key Laboratory of Brain and Cognitive Science,Institute of Biophysics,The Chinese Academy of Sciences,Datun Road 15,Beijing 100101,China b Key Laboratory of Cell Proliferation and Differentiation of Ministry of Education,College of Life Sciences,Peking University,Beijing 100871,China c Department of Biological Science,Florida State University,Tallahassee,Florida 32304-4295,USA. 遗传学报. 2012(05)
本文编号：3316454
【文章来源】：中国科学:生命科学. 2016,46(04)北大核心CSCD
【文章页数】：10 页
【部分图文】：
斑马伯以.力-TA,.RN左右臂及靶价点示煮图
4C所示.2.5斑马鱼gtsf1/性腺中gtsf1mRNA基本不表达为了证实TALEN敲除后纯合突变体的gtsf1的功能缺失,用原位杂交的方法对WT和gtsf1/精巢中gtsf1基因在mRNA表达水平进行了验证,结果如图5所示,WT精巢中gtsf1在精原细胞,初级精母细胞和次级精母细胞中有较高的表达,而在gtsf1/精巢中gtsf1基本不表达,因此,gtsf1功能已缺失.2.6斑马鱼gtsf1/的表型和育性观察发现,筛选出的gtsf1/与WT及gtsf1/相比生长速度无显著差异,表型也似正常(图6),然而gtsf1/成鱼全部为雄性,且gtsf1/的数量多于预期图2Gtsf1蛋白CHHC锌指结构域在部分物种中的同源性分析斑马鱼与人类、家鼠、原鸡、美洲鳄和非洲爪蛙Gtsf1蛋白CHHC锌指结构域的同源性比对.可见斑马鱼与上述物种的CHHC锌指结构域具有较高的同源性,斑马鱼与它们的序列相似度分别为68.9%,67.2%,63.9%,62.3%,62.3%.氨基酸颜色的深浅根据同源型高低由软件GeneDoc做出:黑色(100%相同)、灰色(80%相同)、浅灰色(60%相同).显示gtsf1基因进化保守性
刁奄瓦也.‘力耸田魏路睛翻的百待翻右图
【参考文献】：
期刊论文
[1]TALEN构建与斑马鱼基因组定点突变的实验方法与流程[J]. 沈延,黄鹏,张博. 遗传. 2013(04)
[2]类转录激活因子效应物核酸酶（TALEN）介导的基因组定点修饰技术[J]. 沈延,肖安,黄鹏,王唯晔,朱作言,张博. 遗传. 2013(04)
[3]Efficient and Specific Modifications of the Drosophila Genome by Means of an Easy TALEN Strategy[J]. Jiyong Liu~a,Changqing Li~a,Zhongsheng Yu~a,Peng Huang~b,Honggang Wu~a,Chuanxian Wei~a, Nannan Zhu~a,Yan Shen~b,Yixu Chen~a,Bo Zhang~b,Wu-Min Deng~(c,*),Renjie Jiao~(a,*) a State Key Laboratory of Brain and Cognitive Science,Institute of Biophysics,The Chinese Academy of Sciences,Datun Road 15,Beijing 100101,China b Key Laboratory of Cell Proliferation and Differentiation of Ministry of Education,College of Life Sciences,Peking University,Beijing 100871,China c Department of Biological Science,Florida State University,Tallahassee,Florida 32304-4295,USA. 遗传学报. 2012(05)
本文编号：3316454
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3316454.html
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