凋亡基因RTN3在红系发育过程中的功能研究

发布时间：2021-08-03 23:26

　　目的红细胞是哺乳动物体内含量最多的造血细胞。红细胞的形成过程起始于造血干细胞定向增殖分化形成红系祖细胞,接着进入到红系终末分化阶段,经数次有丝分裂依次分化为原幼红细胞、早幼红细胞、中幼红细胞和晚幼红细胞,随后晚幼红细胞会脱核形成网织红细胞,最后发育分化为成熟的红细胞。伴随着这个红系发育过程会发生细胞凋亡的现象,被称为eryptosis。有研究表明,在病理性和生理性条件下,细胞凋亡的发生都对成熟红细胞的产生有一定的作用。而凋亡基因RTN3是介导真核细胞三大凋亡通路的关键基因,通过对RTN3的研究,初步探索其在红系发育过程中的作用。方法为了研究RTN3在红系发育过程中的功能影响,我们首先构建RTN3敲低和过表达载体,通过慢病毒转导的方法分别得到RTN3敲低和过表达的K562和HEL细胞,从RNA水平和蛋白水平分别验证了RTN3的表达情况。其次用氯化高铁血红素诱导RTN3敲低型和过表达型的K562和HEL细胞向红系分化,与对照组相比,检测RTN3敲低和过表达对细胞增殖、分化和凋亡的改变。最后利用脐带血CD34⁺细胞进行体外定向红系分化的探究,以慢病毒转导的方法敲低和过表... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

红细胞的正常发育过程(引自文献[13]

图 1.2 哺乳动物细胞动物三条凋亡通路(引自文献[41]).2.3.1 线粒体通路细胞合成 ATP 的主要场所是线粒体，它也被称为能量工厂。细胞程中的多个生物学事件都和线粒体这个细胞器存在一定的关系[42-44]

提前配制好 0.8%的琼脂糖胶，PCR 和酶切分别结束之后，开始跑凝胶电泳，120V，25min； 跑胶完成用照胶仪进行曝光得到跑胶图 2.2A 和 2.2B，在紫外光下切相应的条带并按胶回收试剂盒说明书完成胶回收，最终得到酶切的线性过表达载体和 PCR 胶回收产物；

【参考文献】：
期刊论文
[1]红细胞衰老及程序性死亡机制[J]. 王瑜,刘兴顺.  中国实验血液学杂志. 2014(04)
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[3]JNK信号通路介导的凋亡在疾病中的作用[J]. 侯炳旭,冯丽英.  世界华人消化杂志. 2011(17)
[4]基于内质网应激途径的细胞保护策略的研究进展[J]. 刘春蕾,何昆仑,王莉莉.  中国药理学通报. 2011(04)
[5]CHOP在内质网应激介导凋亡中的作用[J]. 李剑,罗子国.  检验医学与临床. 2011(02)
[6]细胞凋亡的信号转导机制研究进展[J]. 焦俊霞,高维娟.  中国老年学杂志. 2010(06)
[7]失巢凋亡在As斑块破裂中的作用及机制[J]. 刘娜,刘俊田.  中国药理学通报. 2007(03)
[8]Fas系统在冠心病和慢性心力衰竭中的变化及意义[J]. 胡司淦,蔡鑫.  蚌埠医学院学报. 2006(04)
[9]细胞凋亡及其生理与病理学意义[J]. 刘纯杰.  动物医学进展. 1997(04)

硕士论文
[1]内质网蛋白3参与自噬并影响胆固醇流出机制初探[D]. 梁龙.中南大学 2014



本文编号：3320522