新疆野苹果31遗传转化体系建立与MdMYB4/44基因功能初步研究
发布时间：2021-08-11 03:39
非生物环境胁迫,如低温、高盐等,会严重危害植物生长发育,降低作物的产量和品质。近年来,与此胁迫相关的大量MYB基因被克隆及功能鉴定,但在苹果上相应的研究还很少。我国是苹果生产和育种大国,苹果砧木与品种的遗传改良以及抗逆新品种的培育显得尤为重要。在苹果遗传转化方面,虽有遗传转化体系应用的大量报道,但转化效率普遍较低。高再生频率是高遗传转化的前提,而苹果离体再生频率高低很大程度上依赖于试材基因型。本试验在前人对153份苹果种质资源再生能力比较研究的基础上,对已筛选出的高再生材料新疆野苹果31进行系统研究,建立了离体再生及遗传转化体系,为后续苹果转基因研究及基因功能鉴定提供参考。本研究探讨了影响新疆野苹果31离体再生及遗传转化的条件,结果表明,当叶片正面接触培养基、暗培养14天时,再生频率达到最高;6-BA 1.0 mg·L-1与NAA0.1 mg·L-1为继代增殖培养基的最佳激素配比;组培苗在附加1.0 mg·L-1IBA的1/2 MS培养基上生根效果较佳。外植体在OD600=0.5菌液中浸染5 min,共培养2 d,在附加300 mg/L Cef的再生培养基上延迟培养2-4 d后,在附加...
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：92 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１?ｐＧＢＫＴ７－ＭｄＭＹＢ４／４４表达载体构建流程图??Ｆ＾ｉｇｕｒｅ?２－１?Ｔｈｅ?ｖｅｔｏｒ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐＧＢＫＴ７－ＭｄＭＹＢ４／４４??２．２．６醇母杂交试验??
中国农业大学博上学位论文?纽果Ｉ?ｊ分析??表３－３放置方式对苹果叶片离体再生的影响??Ｔａｂｌｅ?３－３?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｐｌａｃｅｍｅｎｔ?ｏｎ?ａｐｐｌｅ＇ｓ?ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ??叶片放腎方乂?ｉｉｊ：生频率／％?ｆ均ｗ生芽数／个??叶巧面接触巧养接?７８．３３±４．４ｌｂ?２．６９±０．０７ｂ??叶巿曲接触巧养端?９６．６７±Ｉ．６７ａ?９．５６±１．４１ａ??注：哀中数字为平均ｆｆｔ吨；准巧（ｎ＝３）；?Ｉ中－列中的字间：代巧Ｐ＜０．０５水平的祖巧性。??Ｎｏｔｅ：?Ｖａｌｕｅｓ?ａｎｄ?ｅｒｒｏｒ?ｂａｒｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｍｅａｎｓ?±?ＳＥ?（ｎ?＝?３）；?Ｔｈｅ?ｌｅｔｔｅｒｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｓａｍｅ?ｃｏｌｕｍｎ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｔｈｅ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ?ａｔ?Ｐ＜０．０５．??
?３??ＯｍｔｕＩ化ｉｃ?ｔｉｍｃ（ｄ）??图３－４共培养时间对苹果遗传转化的影晌??Ｆｉｇｕｒｅ?３－４?Ｔｈｅ?ｃｉ＇ｌｃｃｌ?〇ｒｃｏ－ｃｕｌｌｕｒｃ?ｔｉｍｅ?ｏｎ?ａｐｐｌｅ?ｇｃｉｉｃｌｉｃ?ｌｒａｎｓｒ〇ｒｎｉａｔｉｏｎ??３．２．２．３延迟培养天数对转化效率的巧响??不Ｋｉ）站迟巧养乂数知化化效率的圾响。邮究衣明，延也化养２、３、４ｄ时ＧＵＳ染色效率显巧??鳥ｒｉｄ?（凶３－５）。鲍将化化巧养的增加，ＧＵＳ瞬Ｍ染色效率逐渐提商，化染色而积增加染??色加深（如阁Ｓ５所小），姐迟巧养４?ｄ时，ＧＵＳ染色效率Ｗ达１００％，网此确立最住延迟培养大??数为２－４?ｄ。??２３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]南蛇藤脯氨酸脱氢酶基因的克隆和表达特性[J]. 魏丽娟,张娟,王蕾,刘林德,赵同欣,黄清荣. 植物学报. 2014(06)
[2]苹果砧木‘青砧一号’离体高效再生体系的建立[J]. 吴瑞刚,杨洪强,沙广利,杨萍萍,毕润霞. 植物生理学报. 2013(10)
[3]锡金海棠子叶再生体系的建立[J]. 吴瑞刚,杨洪强,冉昆,张玮玮. 植物生理学报. 2012(10)
[4]提高植物农杆菌转化效率辅助策略研究进展[J]. 叶兴国,王新敏,王轲,杜丽璞,林志珊,徐惠君. 中国农业科学. 2012(15)
[5]农杆菌介导转化平邑甜茶子叶外植体的研究[J]. 代红艳,李文然,刘霁菡,刘月学,张志宏. 沈阳农业大学学报. 2011(06)
[6]平邑甜茶子叶和下胚轴离体再生不定芽的研究[J]. 刘霁菡,代红艳,赵恺,张志宏. 东北农业大学学报. 2011(10)
[7]长富6号富士苹果离体高效不定芽再生技术的建立[J]. 陈秀孔,张计育,章镇,吕东,杜小丽,李春霞,渠慎春. 江苏农业学报. 2011(02)
[8]珠美海棠叶片离体培养与植株再生[J]. 柴慈江,孙世海,王玉,彭立新. 果树学报. 2011(01)
[9]根癌农杆菌介导寒富苹果转化体系的建立[J]. 杨越,张志宏,刘月学,何平,周宇,代红艳,赵桂玲. 果树学报. 2010(02)
[10]八棱海棠转PuNHA基因的遗传转化研究[J]. 朱文碧,刘海学,黄俊轩,李建科,武春霞,杨静慧,梁国鲁. 北方园艺. 2010(04)
博士论文
[1]小金海棠转录因子MxFIT、MxIRO2的克隆及其与启动子关系的研究[D]. 殷丽丽.中国农业大学 2014
硕士论文
[1]苹果MYB转录因子家族的生物信息学分析及MdMYB121和MdSIMYB1在非生物胁迫响应中的作用[D]. 曹忠慧.山东农业大学 2013
[2]几种无融合苹果砧木离体再生及其遗传转化体系的建立[D]. 吴瑞刚.山东农业大学 2013
[3]平邑甜茶MhCDPK基因克隆、表达、载体构建及其再生体系的建立[D]. 韩小娇.山东农业大学 2008
[4]苹果（Malus domestica Borkh）遗传转化体系的建立及ipt基因的导入[D]. 秦玲.西北农林科技大学 2002
本文编号：3335371
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：92 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１?ｐＧＢＫＴ７－ＭｄＭＹＢ４／４４表达载体构建流程图??Ｆ＾ｉｇｕｒｅ?２－１?Ｔｈｅ?ｖｅｔｏｒ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐＧＢＫＴ７－ＭｄＭＹＢ４／４４??２．２．６醇母杂交试验??
中国农业大学博上学位论文?纽果Ｉ?ｊ分析??表３－３放置方式对苹果叶片离体再生的影响??Ｔａｂｌｅ?３－３?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｐｌａｃｅｍｅｎｔ?ｏｎ?ａｐｐｌｅ＇ｓ?ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ??叶片放腎方乂?ｉｉｊ：生频率／％?ｆ均ｗ生芽数／个??叶巧面接触巧养接?７８．３３±４．４ｌｂ?２．６９±０．０７ｂ??叶巿曲接触巧养端?９６．６７±Ｉ．６７ａ?９．５６±１．４１ａ??注：哀中数字为平均ｆｆｔ吨；准巧（ｎ＝３）；?Ｉ中－列中的字间：代巧Ｐ＜０．０５水平的祖巧性。??Ｎｏｔｅ：?Ｖａｌｕｅｓ?ａｎｄ?ｅｒｒｏｒ?ｂａｒｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｍｅａｎｓ?±?ＳＥ?（ｎ?＝?３）；?Ｔｈｅ?ｌｅｔｔｅｒｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｓａｍｅ?ｃｏｌｕｍｎ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｔｈｅ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ?ａｔ?Ｐ＜０．０５．??
?３??ＯｍｔｕＩ化ｉｃ?ｔｉｍｃ（ｄ）??图３－４共培养时间对苹果遗传转化的影晌??Ｆｉｇｕｒｅ?３－４?Ｔｈｅ?ｃｉ＇ｌｃｃｌ?〇ｒｃｏ－ｃｕｌｌｕｒｃ?ｔｉｍｅ?ｏｎ?ａｐｐｌｅ?ｇｃｉｉｃｌｉｃ?ｌｒａｎｓｒ〇ｒｎｉａｔｉｏｎ??３．２．２．３延迟培养天数对转化效率的巧响??不Ｋｉ）站迟巧养乂数知化化效率的圾响。邮究衣明，延也化养２、３、４ｄ时ＧＵＳ染色效率显巧??鳥ｒｉｄ?（凶３－５）。鲍将化化巧养的增加，ＧＵＳ瞬Ｍ染色效率逐渐提商，化染色而积增加染??色加深（如阁Ｓ５所小），姐迟巧养４?ｄ时，ＧＵＳ染色效率Ｗ达１００％，网此确立最住延迟培养大??数为２－４?ｄ。??２３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]南蛇藤脯氨酸脱氢酶基因的克隆和表达特性[J]. 魏丽娟,张娟,王蕾,刘林德,赵同欣,黄清荣. 植物学报. 2014(06)
[2]苹果砧木‘青砧一号’离体高效再生体系的建立[J]. 吴瑞刚,杨洪强,沙广利,杨萍萍,毕润霞. 植物生理学报. 2013(10)
[3]锡金海棠子叶再生体系的建立[J]. 吴瑞刚,杨洪强,冉昆,张玮玮. 植物生理学报. 2012(10)
[4]提高植物农杆菌转化效率辅助策略研究进展[J]. 叶兴国,王新敏,王轲,杜丽璞,林志珊,徐惠君. 中国农业科学. 2012(15)
[5]农杆菌介导转化平邑甜茶子叶外植体的研究[J]. 代红艳,李文然,刘霁菡,刘月学,张志宏. 沈阳农业大学学报. 2011(06)
[6]平邑甜茶子叶和下胚轴离体再生不定芽的研究[J]. 刘霁菡,代红艳,赵恺,张志宏. 东北农业大学学报. 2011(10)
[7]长富6号富士苹果离体高效不定芽再生技术的建立[J]. 陈秀孔,张计育,章镇,吕东,杜小丽,李春霞,渠慎春. 江苏农业学报. 2011(02)
[8]珠美海棠叶片离体培养与植株再生[J]. 柴慈江,孙世海,王玉,彭立新. 果树学报. 2011(01)
[9]根癌农杆菌介导寒富苹果转化体系的建立[J]. 杨越,张志宏,刘月学,何平,周宇,代红艳,赵桂玲. 果树学报. 2010(02)
[10]八棱海棠转PuNHA基因的遗传转化研究[J]. 朱文碧,刘海学,黄俊轩,李建科,武春霞,杨静慧,梁国鲁. 北方园艺. 2010(04)
博士论文
[1]小金海棠转录因子MxFIT、MxIRO2的克隆及其与启动子关系的研究[D]. 殷丽丽.中国农业大学 2014
硕士论文
[1]苹果MYB转录因子家族的生物信息学分析及MdMYB121和MdSIMYB1在非生物胁迫响应中的作用[D]. 曹忠慧.山东农业大学 2013
[2]几种无融合苹果砧木离体再生及其遗传转化体系的建立[D]. 吴瑞刚.山东农业大学 2013
[3]平邑甜茶MhCDPK基因克隆、表达、载体构建及其再生体系的建立[D]. 韩小娇.山东农业大学 2008
[4]苹果（Malus domestica Borkh）遗传转化体系的建立及ipt基因的导入[D]. 秦玲.西北农林科技大学 2002
本文编号：3335371
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3335371.html
最近更新
教材专著
