啶氧菌酯降解菌的筛选鉴定及其降解基因克隆

发布时间：2021-08-12 03:15

　　啶氧菌酯（Picoxystrobin）是一种人工合成的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂,具有高效广谱和适用范围广等特点。随着啶氧菌酯使用范围的扩大和使用量的增长,生态环境中啶氧菌酯的残留量存在快速增加的风险,其对生态环境的潜在威胁也成为关注的热点。微生物降解具有安全和低成本等优点,是消除生态环境中甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂等农药残留最具有应用前景的技术之一。采用啶氧菌酯为唯一碳源的培养基选择性培养方法,筛选获得一株高效降解啶氧菌酯的降解菌PY3,生理生化鉴定结合16S rRNA系统发育分析表明,菌株PY3属沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustirs）。菌株PY3的最佳降解条件均为35℃和pH 6.0。在最佳降解条件下培养11 d,菌株PY3对50 mg/L啶氧菌酯的降解率达72.0%。采用气相色谱质谱联用仪测定降解菌降解啶氧菌酯的中间代谢产物,推导的菌株PY3降解啶氧菌酯的途径,包括苯环和N杂环之间氧桥键断裂后酯化,以及苯环和N杂环开环反应。采用酯酶活性染色,结合飞行时间质谱,从菌株PY3总蛋白获得了5个具有酯酶活性的降解酶肽段,根据红假单胞菌属细菌的基因组,采用PCR技术... 

【文章来源】：湖南农业大学湖南省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂的降解途径（引用自Balba,Hamdy,2007）

第二章降解的筛癣鉴定及其降解特性19处有明显的吸收峰，表明菌株PY3的细胞内有类胡萝卜素和菌绿素存在[45]。图2-1菌株PY3的菌体色素吸收光谱Figure2-1AbsorptionspectrumofpigmentsofstrainPY32.2.1.3菌株16SrRNA序列系统发育分析菌株PY3扩增的16SrRNA基因序列长度为1374bp(GenBank登录号:MH997434)，与沼泽红假单胞菌的同源性最高。进一步的系统发育分析表明（图2-2），菌株PY3与Rhodopseudomonaspalustris（KF926677）亲缘关系较近，聚为一个亚簇。图2-2PY3的16SrRNA序列系统发育树Figure2-2PhylogenetictreeofstrainPY316SrRNAsequence2.2.2菌株的最佳生长条件菌株PY3在不同培养温度和不同初始pH值条件下的生长结果表明（图2-3，图2-4），菌株PY3在25-35℃、pH6-8范围内生长良好，最佳生长条件为pH6.0、25℃。2.2.3菌株的降解特性将菌株在不同温度条件下培养，其降解啶氧菌酯的结果（图2-3）表明，菌

第二章降解的筛癣鉴定及其降解特性19处有明显的吸收峰，表明菌株PY3的细胞内有类胡萝卜素和菌绿素存在[45]。图2-1菌株PY3的菌体色素吸收光谱Figure2-1AbsorptionspectrumofpigmentsofstrainPY32.2.1.3菌株16SrRNA序列系统发育分析菌株PY3扩增的16SrRNA基因序列长度为1374bp(GenBank登录号:MH997434)，与沼泽红假单胞菌的同源性最高。进一步的系统发育分析表明（图2-2），菌株PY3与Rhodopseudomonaspalustris（KF926677）亲缘关系较近，聚为一个亚簇。图2-2PY3的16SrRNA序列系统发育树Figure2-2PhylogenetictreeofstrainPY316SrRNAsequence2.2.2菌株的最佳生长条件菌株PY3在不同培养温度和不同初始pH值条件下的生长结果表明（图2-3，图2-4），菌株PY3在25-35℃、pH6-8范围内生长良好，最佳生长条件为pH6.0、25℃。2.2.3菌株的降解特性将菌株在不同温度条件下培养，其降解啶氧菌酯的结果（图2-3）表明，菌


本文编号：3337469