EVX2和ZNF577基因启动子甲基化对肺部良恶性肿瘤的鉴别

发布时间：2021-08-29 00:19

　　目的:使用基因甲基化芯片技术,筛选出鉴别肺部良恶性肿瘤之间的基因甲基化标志物。验证EVX2和ZNF577基因在标本组织及血浆中的甲基化状态,探讨该基因启动子甲基化状态与患者的病理类型、病理分期、性别、年龄、吸烟、饮酒等之间的关系。材料与方法:本研究共收集肺部肿瘤标本60例,其中非小细胞肺癌标本40例,肺部良性结节标本20例。肺癌组织标本为实验组,癌旁组织及肺部良性结节组织为对照组,进行如下实验操作:（1）基因甲基化芯片测序,选定目的基因;（2）分别提取组织DNA和血浆游离DNA;（3）紫外分光光度计检测DNA的浓度及纯度,1%琼脂糖凝胶电泳质检;（4）DNA标本甲基化处理,2.5%琼脂糖凝胶电泳对目的基因启动子甲基化状态进行判读;（5）运用spss24.0软件进行统计学分析。结果:1.确定目的基因为EVX2和ZNF577,肺癌组织中目的基因启动子甲基化状态与对应的癌旁组织及肺部良性结节组织之间的差异均有统计学意义（P<0.05）。2.肺癌血浆游离DNA中EVX2和ZNF577基因甲基化状态与肺部良性结节血浆之间的差异均有统计学意义（P<0.05）。3.肺癌组织EVX2和ZN... 

【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

基因树聚类分析（130个探针）

宁夏医科大学硕士学位论文结果21图3目的基因ZNF577EVX2和ZNF577基因启动子甲基化引物及非甲基化引物（表8）均从MethPrimer网站设计，并且从肺癌A549细胞株及部分肺癌组织验证其特异性。表8甲基化及非甲基化引物设计结果引物名称上游引物5`-3`下游引物5`-3`退火温度/℃片段长度/bpEVX2MAGAATTTTTCGTTAAGGGTAAATTCCTAAATAATAACCCGACTTCTTACG65.7129EVX2UAATTTTTTGTTAAGGGTAAATTTGAAAATAATAACCCAACTTCTTACAAC64.5127ZNF577MTTGAAATTTTTGTAAGATTGTCGCCTTTACAACATTAACCAAAAACGCT64.3171ZNF577UTGAAATTTTTGTAAGATTGTTGTGTCTTTACAACATTAACCAAAAACACT63.4170

宁夏医科大学硕士学位论文结果224.EVX2和ZNF577基因启动子甲基化凝胶电泳验证结果：EVX2和ZNF577基因启动子甲基化在肺癌组织及癌旁组织、肺部良性结节组织及结节旁组织中甲基化状态、实验中阳性对照及阴性对照的结果。我们用MSP技术对全部60对肺组织（40对肺癌组织和20对肺部良性结节组织）及配对的血浆标本中EVX2和ZNF577基因启动子甲基化状态检测，40对肺癌组织中28例（70.0%）EVX2基因启动子呈甲基化状态，23例（57.5%）ZNF577基因启动子呈甲基化的状态，20例肺部良性结节组织中EVX2和ZNF577基因启动子甲基化各1例（5.0%），40例肺癌血浆中有23例（57.5%）EVX2基因呈甲基化状态，12例（30.0%）ZNF577基因呈甲基化状态，20例肺良性组织血浆中EVX2和ZNF577基因甲基化各有1例（5.0%），其中部分甲基化PCR结果如下图（图4-图13）。图4EVX2基因甲基化状态在肺癌中的凝胶电泳图（1）图5EVX2基因甲基化状态在肺癌中的凝胶电泳图（2）图6EVX2基因甲基化状态在肺癌中的凝胶电泳图（3）

【参考文献】：
期刊论文
[1]中国肺癌和烟草流行及控烟现状[J]. 邹小农,贾漫漫,王鑫,支修益.  中国肺癌杂志. 2017(08)
[2]中国癌症发病、死亡现状与趋势分析[J]. 曾倩,崔芳芳,宇传华,张干深.  中国卫生统计. 2016(02)



本文编号：3369514