CRISPR/Cas9系统构建的水稻OsPht基因突变体材料可用于养分转运评价

发布时间：2021-08-30 12:00

　　【目的】CRISPR/Cas9是细菌和古细菌为免受外来DNA片段侵袭形成的一种适应性免疫系统。CRISPR/Cas9已经被作为一种基因编辑的工具广泛应用到很多动物和植物的基因编辑。磷元素是植物生长过程中必需的营养元素,植物对磷的吸收主要由跨膜磷转运蛋白完成。本研究利用CRISPR/Cas9技术对OryzaJaponicaKitaake水稻中冰叶日中花磷转运蛋白McPht基因的同源体OsPht磷转运蛋白基因进行编辑,构建了McPht转运蛋白基因导入水稻OsPht缺失的突变体,初步验证了该突变体材料的功能。【方法】通过CRISPR/Cas9基因编辑手段,将水稻中与McPht蛋白同源性最高的磷转运蛋白基因进行编辑。首先将待编辑的基因片段连接到U3启动子驱动的pCXUN表达载体上,转化到农杆菌EHA105中,然后通过农杆菌转化到水稻幼胚,将获得的转化后再生T0代株系移栽到田间获得T1代种子,并将T1代株系进行盆栽培养,提取株系叶片基因组DNA用于PCR检测,所有株系PCR产物纯化后进行测序,依据序列变化判定目标基因的编辑位点,并对突变体进行生理指标测定。【结果】1)基因编辑后的类型可分为两类,... 

【文章来源】：植物营养与肥料学报. 2017,23(05)北大核心CSCD

【文章页数】：11 页

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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[2]小盐芥ThPIP1基因的水稻遗传转化及耐盐机理研究[D]. 强晓晶.中国农业科学院 2015
[3]水稻磷酸盐转运蛋白基因家族的功能分析[D]. 常小箭.华中农业大学 2012
[4]通过RNAi研究水稻磷转运蛋白基因生理功能[D]. 辛伟杰.南京农业大学 2008



本文编号：3372738