多重实时荧光PCR快速检测转基因大豆

发布时间：2021-08-31 10:41

　　采用多重实时荧光PCR技术,对大豆筛选基因35S启动子（cauliflower mosaic virus,CaMV 35S）、NOS终止子（nopaline synthase,NOS）和内源基因Lectin设计合成了多对检测引物和探针,在筛选各基因合适的检测引物和探针的基础上,摸索引物组合和扩增条件,最终确定合适的探针引物组合和试验条件,建立转基因大豆快速初筛技术。该方法可在1 h内同时完成对转基因大豆3个基因片段的实时荧光PCR检测。方法特异性强,灵敏度高,可用于大豆转基因成分的快速检测,大大提高检验效率,可为消费者的食品安全及我国大豆的进出口检验提供有效的技术支持。 

【文章来源】：江苏农业科学. 2020,48(18)

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试验材料与试剂
    1.2 仪器与设备
    1.3 试验方法
        1.3.1 基因组DNA的提取
        1.3.2 引物和探针的设计
        1.3.3 引物及探针特异性测试试验
        1.3.4 三重荧光PCR反应体系及程序
        1.3.5 三重荧光PCR检测体系的灵敏度试验
2 结果与分析
    2.1 引物探针特异性检测结果
        2.1.1 CaMV 35S基因扩增用引物和探针特异性检测结果
        2.1.2 大豆内源Lectin基因扩增用引物和探针特异性检测结果
        2.1.3 NOS终止子基因扩增用引物和探针特异性检测结果
    2.2 三重实时荧光PCR体系扩增图结果
    2.3 多重PCR体系的灵敏度测定
3 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]三种转基因大豆品系的多重荧光PCR检测体系建立[J]. 闫伟,龙丽坤,李葱葱,夏蔚,董立明,李飞武.  大豆科学. 2019(05)
[2]野生大豆营养成分及生物活性因子的研究进展[J]. 荆常亮,周金辉,张成省,周三.  大豆科学. 2019(04)
[3]可视化膜芯片检测转基因大豆的研究[J]. 祖新,徐轶飞,李羽翡,段鹏,范鹏飞,杨陶丽薇.  食品安全质量检测学报. 2019(11)
[4]转基因大豆RPA检测技术的建立及应用[J]. 窦雯,李尤,逯欣宇,钱雪梅,沈丹宇.  生物技术通报. 2019(05)
[5]豆制品中转基因成分检测的研究进展[J]. 孟静,孙潇慧,钟立霞,霍胜楠.  大豆科学. 2019(01)
[6]中美转基因生物安全监管体系对比[J]. 康宇立,朱涛,麻晓春.  生命世界. 2018(09)
[7]多重串联式PCR基因碟片技术检测转基因大豆GTS 40-3-2[J]. 魏霜,周广彪,刘津,付伟,张志强,吴希阳.  中国食品学报. 2018(02)
[8]国际转基因大豆对中国大豆产业及其期货市场的影响[J]. 郑金英,翁欣.  亚太经济. 2015(05)
[9]大豆微量成分的特殊营养价值[J]. 郝景波.  黑龙江粮食. 2015(09)

博士论文
[1]我国转基因食品安全政府规制研究[D]. 王宇红.西北农林科技大学 2012

硕士论文
[1]中国大豆进口依存度影响因素及对策研究[D]. 王雪琴.武汉轻工大学 2018



本文编号：3374752