ALS/FTD突变基因C9orf72相关二肽重复蛋白poly-PR导致神经毒性机制研究

发布时间：2021-09-03 11:41

　　目的:肌萎缩侧索硬化症（ALS）和额颞叶痴呆（FTD）突变基因C9orf72相关二肽重复（DPR）蛋白poly-PR已经被证实具有很强的神经毒性,且DPR具有类似于疯牛病蛋白（prion）的细胞间传递特征。但是对于其导致神经细胞退变的分子机制以及传递机制尚不清楚,因此我们设计相关实验探究poly-PR导致神经元死亡的分子机制。方法:使用合成的poly-PR（20个PR重复,PR20）多肽以及慢病毒载体表达poly-PR（28个PR重复,PR28）来处理SH-SY5Y细胞（神经元细胞系）和小鼠原代皮层神经元进行实验。使用细胞内吞相关途径的抑制剂探索poly-PR多肽进入神经元的内吞机制。然后使用流式细胞术（Flow cytometry）测定标记了 FITC的poly-PR荧光强度,从而定量内吞抑制剂使用后对poly-PR多肽进入神经元的抑制效果。其次使用RNA干扰（RNAi）技术来验证poly-PR进入神经元的内吞方式。通过乳酸脱氢酶（LDH）释放实验和Propidium iodide（PI）染色实验检测poly-PR对神经元的毒性。使用蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测p... 

【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１?ＰＲ２ｑ多肽以网格蛋白依赖型细胞内呑进入细胞

图２?ＰＲ２

图３Ａ和３Ｂ）

【参考文献】：
期刊论文
[1]Loss of VAPB Regulates Autophagy in a Beclin 1-Dependent Manner[J]. Dan Wu,Zongbing Hao,Haigang Ren,Guanghui Wang.  Neuroscience Bulletin. 2018(06)



本文编号：3381049