人外周血单个核细胞分泌细胞因子对α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除猪肝细胞的作用

发布时间：2021-09-15 13:22

　　目的研究异种肝细胞或肝移植中,活化的人外周血单个核细胞（h-PBMC）分泌的细胞因子对α-1,3-半乳糖基转移酶基因敲除猪肝细胞（GalT-KO-hep）的作用。方法利用永生化GalT-KO-hep,与经脂多糖+聚肌胞苷酸激活的h-PBMC共培养。生化分析检测共培养上清中白蛋白、ALT、AST和尿素水平,采用流式细胞术检测GalT-KO-hep凋亡,采用蛋白质印迹法检测GalT-KO-hep中Caspase-3剪切体表达以及c-Jun氨基末端激酶（JNK）、核因子κB（NF-κB）、P38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、细胞外调节蛋白激酶（ERK）、信号传导与活化转录因子3（STAT3）和蛋白激酶B（AKT）通路相关分子的表达变化。采用方差分析比较不同刺激时间h-PBMC分泌的细胞因子mRNA相对表达量、共培养模型不同时间点上清液生化指标含量、GalT-KO-hep中Caspase 3剪切体表达量和细胞凋亡率,进一步两两比较采用LSD法。P<0.05为差异有统计学意义。结果 GalT-KO-hep与活化h-PBMC共培养6 h组上清液中ALT含量高于共培养24 h和48 h组,差... 

【文章来源】：中华移植杂志(电子版). 2020,14(03)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

不同刺激时间h- PBMC分泌的细胞因子mRNA相对表达量

GalT- KO- hep与活化h- PBMC 共培养6 h组上清液中ALT含量高于共培养24 h和48 h组,差异均有统计学意义(P均<0.05);共培养48 h组AST含量高于共培养6 h和24 h组;共培养24 h和48 h组尿素含量均高于共培养6 h组;白蛋白各时间点含量差异均无统计学意义(见图2)。GalT- KO- hep与活化h- PBMC共培养24 h和48 h后,蛋白质印迹法检测细胞中Caspase 3剪切体表达增加,与对照组(只用含20%人血清的HM培养基培养的GalT- KO- hep)相比差异均有统计学意义(P均<0.05),表明GalT- KO- hep在共培养因素刺激下凋亡增多(见图3)。流式细胞术检测结果显示,GalT- KO- hep凋亡程度逐渐增加(见图4)。

与活化h- PBMC共培养不同时间的GalT- KO- hep中

【参考文献】：
期刊论文
[1]Liver transplantation: Current status and challenges[J]. Caroline C Jadlowiec,Timucin Taner.  World Journal of Gastroenterology. 2016(18)



本文编号：3396157