介孔聚合物纳米球负载基因siRNA用于肿瘤治疗的研究

发布时间：2021-09-23 03:01

　　抗肿瘤一直是生物医学领域的研究热点,药物和siRNA是目前广泛关注的抗癌治疗剂,其中siRNA的优势在于它可以避免药物在治疗过程中产生的毒性影响,并且对耐药性肿瘤的治疗效果要优于药物。本论文旨在以Bcl-2 siRNA为治疗剂、介孔聚合物纳米球为载体,并通过层层自组装的方法构建一种可以有效治疗耐药性乳癌的负载体系。介孔聚合物纳米球作为siRNA的载体还没有人报道过,乳癌细胞是一种耐药性高、Bcl-2高表达的细胞,因此我们希望可以构建一种新的治疗体系以期获得良好的肿瘤治疗效果。本论文通过软模板合成方法制备介孔聚合物纳米球（MPNs）作为负载siRNA的载体。实验采用自组装聚合和200℃水热处理等方法制备球形均一、结构完整的介孔纳米球。通过改性使合成的介孔纳米球成为阳离子纳米载体,并分别考察了不同小分子改性纳米球对负载率的影响以及在不同pH下、在纳米载体表面有无包覆大分子层的条件下的释放情况。在细胞实验中,利用MTT法和荧光显微镜手段考察了载体以及负载体系的生物相容性;利用流式细胞术和荧光显微镜手段考察并比较了在不同条件下的负载体系对癌细胞内吞效果和凋亡情况的影响;利用RT-PCR和Wes... 

【文章来源】：西南交通大学四川省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：94 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图.目nc日n.

西南交通大学硕士研究生学位论文 第 19 页小烧杯中，避光搅拌至混合均匀；配制0.1mol/L NaOH溶液15mL加入到上述混合溶液中，在70℃油浴锅中反应半小时；取0.96gF-127加入15mLRO水，搅拌至溶液透明，再加入至上述反应溶液中。反应两小时后，加入50mLRO水稀释。当溶液变为酒红色并出现少许沉淀的时候结束反应，全程反应均需避光，以防止苯酚发生分解。静置一段时间直至沉淀溶解，将所得液体与RO水按比例17.7：56稀释后转移至聚四氟乙烯内衬的反应釜中，130℃下水热反应8小时；随后在200℃下水热处理完成去模板过程。将所得产物进行离心洗涤、冷冻干燥、收集，并进行表征和后续实验。

2.1聚合物纳米球表面负电性化定量MPNs于烧杯中，加RO水超声30min分散均匀。根据文献配制一定酸与硝酸体积比为3：1），缓慢加入到MPNs分散液中，60℃下反应4h。产物进行抽滤洗涤，直到洗涤液pH达到中性，收集沉淀并冷冻干燥，OMPNs。聚合物纳米球表面氨基功能化gOMPNs加入到40mLPBS缓冲液（pH=6）中，将PEI（Mw=600，600m缓冲液中并加入到上述溶液中，继续搅拌反应过夜。同样地，取精氨酸（mol）溶于5mL缓冲液中并加入到上述溶液中，继续搅拌反应过夜。离并多次洗涤，洗去未反应物质、冷冻干燥收集，干燥产物分别定义为OMNs-Arg。合物纳米球的表面氨基功能化过程如图2.2所示。


本文编号：3404899