TNFAIP8基因高表达促进前列腺癌细胞PC3、LNCaP增殖及其机制的实验研究

发布时间：2021-09-24 17:37

　　目的构建前列腺癌细胞TNFAIP8基因过表达与沉默模型,观察TNFAIP8基因高表达对前列腺癌细胞PC3、LNCaP的增殖促进作用及其可能机制。方法选用正常前列腺上皮细胞RWPE1、前列腺癌细胞PC3、LNCaP为实验对象,MTT实验观察细胞的增殖能力,ELISA试剂盒检测细胞的葡萄糖消耗及ATP产生,qPCR及Western Blotting检测TNFAIP8基因的mRNA和蛋白表达情况。使用脂质体转染技术构建TNFAIP8基因过表达与沉默模型,分为空载体转染组与TNFAIP8基因过表达组、对照组与TNFAIP8基因沉默组,观察细胞增殖,检测葡萄糖消耗及ATP产生,Seahorse XFp生物能量分析仪检测细胞线粒体呼吸功能的变化,qPCR及Western Blotting检测与葡萄糖代谢有关酶HK1、Glut1、G6PD、AMPK、LDHA的变化。结果（1）与前列腺上皮细胞RWPE1相比,前列腺癌细胞PC3、LNCaP的增殖能力更强,PC3细胞葡萄糖消耗、LNCaP细胞ATP产生能力更强。PC3及LNCaP细胞内源性TNFAIP8基因mRNA表达均较低,LNCaP细胞内源性TNFA... 

【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同细胞增殖能力差异与RWPE1细胞相比，***p<0.001

宁夏医科大学硕士学位论文结果14图2A细胞葡萄糖消耗能力差异与RWPE1相比，**p<0.01，nsp>0.05。图2B.细胞ATP产生能力差异与RWPE1相比，***p<0.001，nsp>0.05。1.3内源性TNFAIP8基因表达差异使用qPCR检测，与正常前列腺上皮细胞RWPE1相比，前列腺癌细胞PC3、LNCaP内源性TNFAIP8的mRNA表达低（p值均<0.001），见图3A。WB检测所示三种细胞系内源性TNFAIP8蛋白表达条带和内参β-Tubulin条带，前列腺癌细胞LNCaP的TNFAIP8蛋白表达条带相对偏低，见图3Ba；计算TNFAIP8蛋白条带相对灰度值，与正常前列腺上

宁夏医科大学硕士学位论文结果14图2A细胞葡萄糖消耗能力差异与RWPE1相比，**p<0.01，nsp>0.05。图2B.细胞ATP产生能力差异与RWPE1相比，***p<0.001，nsp>0.05。1.3内源性TNFAIP8基因表达差异使用qPCR检测，与正常前列腺上皮细胞RWPE1相比，前列腺癌细胞PC3、LNCaP内源性TNFAIP8的mRNA表达低（p值均<0.001），见图3A。WB检测所示三种细胞系内源性TNFAIP8蛋白表达条带和内参β-Tubulin条带，前列腺癌细胞LNCaP的TNFAIP8蛋白表达条带相对偏低，见图3Ba；计算TNFAIP8蛋白条带相对灰度值，与正常前列腺上


本文编号：3408162