百脉根种质资源缩合单宁评价及关键基因的挖掘
发布时间：2021-10-13 14:30
百脉根（Lotus corniculatus）,豆科百脉根属,多年生草本植物。发源地为亚欧大陆温带地区,现世界各地及我国均有分布。百脉根茎叶细多,适口性好,具有较高的饲用价值;其最大特点为茎叶富含缩合单宁,作为饲草能够有效降低家畜臌胀病的发生。本研究收集来源于世界各地的235份百脉根种子建立种质资源圃,重点对叶片中的缩合单宁含量进行定性定量测定,分析缩合单宁含量与13个农艺性状之间的相关性,并利用农杆菌侵染拟南芥花序的转化方法将缩合单宁生物合成过程中的关键酶基因ANR（花青素还原酶）转入拟南芥中,对T3代转基因拟南芥植株中的缩合单宁含量进行测定,以期为抗臌胀病百脉根品种的选育奠定基础。现主要研究结果如下:1.235份百脉根种质叶片中缩合单宁含量的变化范围为516 g/Kg干物质（DM）,将其划分为3个等级:缩合单宁含量较低的种质41份（57 g/kg DM）,中等的种质122份（7.19.5 g/kg DM）和较高种质72份（9.616 g/kg DM）。2.对百脉根种质资源圃...
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
缩合单宁（原花青素）生物合成途径是由三个连续的代谢途径构成的一个复合途径共同完成的
兰州大学硕士学位论文 百脉根种质资源缩合单宁评价及关键基因的挖掘杀青处理 15 分钟后，80℃烘干 24 h 并磨碎过 1 mm 筛孔，备用。2.1.3.2 测定方法准确称取 0.2±0.001 g 样品置于 10 mL 离心管中，加入 10 mL 甲醇，于摇床中震荡 20 min，3000 rpm/min、20 min 离心。取上清液 1 mL，加入 5 mL 显色剂，摇匀后避光置于水浴锅中，30±1℃恒温水浴 30 min，漩涡震荡后，在 550nm 波长下测定吸光度，每个样品重复三次，最终取平均值，记录数据并依据标准曲线计算百脉根叶片中原花青素含量（李春阳等, 2004）。2.1.3.3 标准曲线
图 2-2 百脉根种质资源叶片中缩合单宁定性检测结果.2 百脉根中缩合单宁的含量及其分级通过香草醛-盐酸法对 235 份百脉根叶片中的缩合单宁含量进行定量测定表明：235 份百脉根材料叶片中的缩合单宁含量在 5~16 g/kg DM 范围内动。结合定性测定结果发现，染色前后无显著变化的百脉根种质缩合单宁遍位于 5~7 g/kg DM 范围内，而染色前后变化较为显著的百脉根种质缩合量在 9~16 g/kg DM 范围内变动，因而依据缩合单宁定量测定结果并结合定结果对百脉根进行种质分组，初步划分为三个等级：叶片中缩合单宁含的百脉根种质 41 份，缩合单宁含量范围为 5~7 g/kg DM（图 A），主要国、格鲁吉亚和阿塞拜疆等亚洲国家的大部分种质；缩合单宁含量中等的122 份，其含量范围为 7.1~9.5 g/kg DM（图 B），主要包括南美洲巴西与智质以及东欧拉脱维亚、立陶宛、摩尔多瓦等国家的种质；缩合单宁含量较种质 72 份，含量范围为 9.6~16 g/kg DM（图 C），主要包括澳大利亚的美国、德国、意大利和南斯拉夫大部分种质。
【参考文献】：
期刊论文
[1]缩合单宁对肉牛过瘤胃蛋白特性的影响[J]. 袁英良,唐丹,赖宪明,鲁英,李成云,张英辉,闫卫红. 中国饲料. 2018(23)
[2]苗药艾纳香花青素还原酶基因的克隆及其生物信息学分析[J]. 鞠志刚,蒋梦星,王文斌,缪艳燕,杨芳芳,陈晓兰. 分子植物育种. 2018(22)
[3]73份俄罗斯百脉根的营养价值和相对饲喂价值的评价[J]. 张本瑜,师尚礼. 草原与草坪. 2017(01)
[4]百脉根对干旱胁迫的生长、生理生态响应及其抗旱性评价[J]. 陈超,赵丽丽,王普昶,任登鸿,戴全厚. 水土保持学报. 2014(03)
[5]百脉根种子萌发期抗旱性综合评价[J]. 赵丽丽,陈超,王普昶. 贵州农业科学. 2012(09)
[6]刺梨两个缩合单宁合成基因的克隆与分析[J]. 杨曼,安华明,何任丹. 贵州农业科学. 2012(08)
[7]百脉根ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J]. 富新年,师尚礼,王赞,李俊,闫洪唯. 草原与草坪. 2012(03)
[8]百脉根种质苗期抗旱性鉴定及综合评价[J]. 赵海明,孙桂枝,王学敏,刘贵波. 草原与草坪. 2011(06)
[9]核桃青皮中单宁的类型及含量测定[J]. 王全杰,李超,王纯,张家树,王燕杰,王延青. 皮革与化工. 2011(03)
[10]缩合单宁功能性研究探讨[J]. 王俊宏,郑向丽,徐国忠. 热带农业科学. 2011(01)
博士论文
[1]百脉根种质评价、创制与LcSRA13耐盐调控机理研究[D]. 王丹.兰州大学 2018
硕士论文
[1]百脉根早熟品系农艺性状及组培再生体系研究[D]. 闫向忠.甘肃农业大学 2007
本文编号：3434854
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
缩合单宁（原花青素）生物合成途径是由三个连续的代谢途径构成的一个复合途径共同完成的
兰州大学硕士学位论文 百脉根种质资源缩合单宁评价及关键基因的挖掘杀青处理 15 分钟后，80℃烘干 24 h 并磨碎过 1 mm 筛孔，备用。2.1.3.2 测定方法准确称取 0.2±0.001 g 样品置于 10 mL 离心管中，加入 10 mL 甲醇，于摇床中震荡 20 min，3000 rpm/min、20 min 离心。取上清液 1 mL，加入 5 mL 显色剂，摇匀后避光置于水浴锅中，30±1℃恒温水浴 30 min，漩涡震荡后，在 550nm 波长下测定吸光度，每个样品重复三次，最终取平均值，记录数据并依据标准曲线计算百脉根叶片中原花青素含量（李春阳等, 2004）。2.1.3.3 标准曲线
图 2-2 百脉根种质资源叶片中缩合单宁定性检测结果.2 百脉根中缩合单宁的含量及其分级通过香草醛-盐酸法对 235 份百脉根叶片中的缩合单宁含量进行定量测定表明：235 份百脉根材料叶片中的缩合单宁含量在 5~16 g/kg DM 范围内动。结合定性测定结果发现，染色前后无显著变化的百脉根种质缩合单宁遍位于 5~7 g/kg DM 范围内，而染色前后变化较为显著的百脉根种质缩合量在 9~16 g/kg DM 范围内变动，因而依据缩合单宁定量测定结果并结合定结果对百脉根进行种质分组，初步划分为三个等级：叶片中缩合单宁含的百脉根种质 41 份，缩合单宁含量范围为 5~7 g/kg DM（图 A），主要国、格鲁吉亚和阿塞拜疆等亚洲国家的大部分种质；缩合单宁含量中等的122 份，其含量范围为 7.1~9.5 g/kg DM（图 B），主要包括南美洲巴西与智质以及东欧拉脱维亚、立陶宛、摩尔多瓦等国家的种质；缩合单宁含量较种质 72 份，含量范围为 9.6~16 g/kg DM（图 C），主要包括澳大利亚的美国、德国、意大利和南斯拉夫大部分种质。
【参考文献】：
期刊论文
[1]缩合单宁对肉牛过瘤胃蛋白特性的影响[J]. 袁英良,唐丹,赖宪明,鲁英,李成云,张英辉,闫卫红. 中国饲料. 2018(23)
[2]苗药艾纳香花青素还原酶基因的克隆及其生物信息学分析[J]. 鞠志刚,蒋梦星,王文斌,缪艳燕,杨芳芳,陈晓兰. 分子植物育种. 2018(22)
[3]73份俄罗斯百脉根的营养价值和相对饲喂价值的评价[J]. 张本瑜,师尚礼. 草原与草坪. 2017(01)
[4]百脉根对干旱胁迫的生长、生理生态响应及其抗旱性评价[J]. 陈超,赵丽丽,王普昶,任登鸿,戴全厚. 水土保持学报. 2014(03)
[5]百脉根种子萌发期抗旱性综合评价[J]. 赵丽丽,陈超,王普昶. 贵州农业科学. 2012(09)
[6]刺梨两个缩合单宁合成基因的克隆与分析[J]. 杨曼,安华明,何任丹. 贵州农业科学. 2012(08)
[7]百脉根ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J]. 富新年,师尚礼,王赞,李俊,闫洪唯. 草原与草坪. 2012(03)
[8]百脉根种质苗期抗旱性鉴定及综合评价[J]. 赵海明,孙桂枝,王学敏,刘贵波. 草原与草坪. 2011(06)
[9]核桃青皮中单宁的类型及含量测定[J]. 王全杰,李超,王纯,张家树,王燕杰,王延青. 皮革与化工. 2011(03)
[10]缩合单宁功能性研究探讨[J]. 王俊宏,郑向丽,徐国忠. 热带农业科学. 2011(01)
博士论文
[1]百脉根种质评价、创制与LcSRA13耐盐调控机理研究[D]. 王丹.兰州大学 2018
硕士论文
[1]百脉根早熟品系农艺性状及组培再生体系研究[D]. 闫向忠.甘肃农业大学 2007
本文编号：3434854
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