百合花香分类、LhTPS基因表达与启动子克隆研究
发布时间：2021-10-15 13:46
百合是世界著名切花,香型丰富,具有很高的观赏价值和经济价值。为分析百合花香形成的原因,本文以12个杂交系41个品种百合作为研究材料,测定花瓣盛开期挥发性成分,研究不同杂交系百合香气成分的特征,对百合进行香型分类;通过实时荧光定量表达分析,结合挥发物种类及释放量差异,寻找单萜合成酶基因（TPS）表达与花香释放之间的联系;克隆两种不同香气百合品种单萜合成酶基因的启动子序列,并对序列进行生物信息学元件分析,初步研究单萜合成酶基因启动子功能。主要结果如下:1、12个杂交系41个品种百合共鉴定出46种香气成分,萜类、苯环类为主要类群。百合的主要挥发性成分为桉树脑、（E）-β-罗勒烯、芳樟醇和苯甲酸甲酯,无香的亚洲百合和亚喇百合挥发性成分的数量和含量显著低于其它类型百合,由杂交种彼此杂交得到的混杂交系结合了亲本的香气性状。2、根据主要花香成分的香韵类别、含量结合人体嗅觉感官,将41种百合分为6种香型:无香型、冰凉香型、果香型、麝香型、水果蜂蜜香型和百合香型。3、实时荧光定量PCR显示:无香百合单萜合成酶基因的表达水平显著低于有香百合。4、从无香百合AT6和有香百合O6中克隆得到三种LhTPS基因的...
【文章来源】：山西农业大学山西省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
接头PCR原理示意图
-6-图1.2TAIL-PCR原理示意图Fig.1.2PrincipleofTAIL-PCR反向PCR（I-PCR）指用限制性内切酶切割内部无切点的已知DNA序列，然后用DNA连接酶使DNA片段自连产生环状DNA片段，最后以环化产物为模板，使用根据已知序列设计的反向引物进行PCR扩增（图1.3）。运用反向PCR方法，Chen等从小麦中克隆了小麦花粉特异性TaPSG719基因启动子序列[47]，Tsafaris等从番红花中成功克隆出了CsatAP1／FUL启动子[48]。该方法引物设计简单，成本低，但PCR扩增的成功依赖于限制性酶切位点的位置，目标DNA片段的环化难以控制。图1.3I-PCR原理示意图Fig.1.3PrincipleofI-PCR现今，已有许多研究表明了启动子在基因表达调控中的重要性。许园园等在杜梨中鉴定了CBLs家族基因成员PbCBL10启动子的功能元件，探明PbCBL10在逆境下的表
-6-图1.2TAIL-PCR原理示意图Fig.1.2PrincipleofTAIL-PCR反向PCR（I-PCR）指用限制性内切酶切割内部无切点的已知DNA序列，然后用DNA连接酶使DNA片段自连产生环状DNA片段，最后以环化产物为模板，使用根据已知序列设计的反向引物进行PCR扩增（图1.3）。运用反向PCR方法，Chen等从小麦中克隆了小麦花粉特异性TaPSG719基因启动子序列[47]，Tsafaris等从番红花中成功克隆出了CsatAP1／FUL启动子[48]。该方法引物设计简单，成本低，但PCR扩增的成功依赖于限制性酶切位点的位置，目标DNA片段的环化难以控制。图1.3I-PCR原理示意图Fig.1.3PrincipleofI-PCR现今，已有许多研究表明了启动子在基因表达调控中的重要性。许园园等在杜梨中鉴定了CBLs家族基因成员PbCBL10启动子的功能元件，探明PbCBL10在逆境下的表
【参考文献】：
期刊论文
[1]百合品种的分类及遗传多样性研究[J]. 杜方,李兴桃,徐小晶,袁赟,常琳,张鲜艳. 山西农业大学学报(自然科学版). 2018(05)
[2]海岛棉单萜合酶基因克隆及其受黄萎病诱导的表达分析[J]. 杨璨,孙全,王微娜,耿帅鹏,江怀仲,蔡应繁. 南方农业学报. 2016(05)
[3]‘西伯利亚’百合单萜释放与Li-mTPS表达日变化动态分析（英文）[J]. 李天娇,胡增辉,郑健,冷平生,杨凯. 西北农业学报. 2016(05)
[4]浓香型和淡香型百合单萜合酶基因差异表达[J]. 唐彪,胡增辉,冷平生,闫金华,吴秀云. 北京农学院学报. 2016(02)
[5]玉簪属植物花香研究[J]. 刘倩,孙国峰,张金政,李晓东. 中国农业科学. 2015(21)
[6]荔枝多酚氧化酶基因启动子克隆与功能分析[J]. 王树军,刘保华,孙进华,肖茜,李焕苓,王家保. 果树学报. 2015(03)
[7]自然界气味关系图[J]. 林翔云,王丽萍,林君如,何丽洪,葛淑英,郑剑滨. 香料香精化妆品. 2015(01)
[8]茶树萜类香气物质代谢谱与相关基因表达谱时空变化的关系[J]. 刘晶晶,王富民,刘国峰,贺志荣,杨华,韦朝领,宛晓春,魏书. 园艺学报. 2014(10)
[9]杜梨PbCBL10基因表达与启动子功能分析[J]. 许园园,蔺经,李晓刚,李慧,常有宏. 果树学报. 2014(06)
[10]岷江百合单萜合酶基因克隆与表达分析[J]. 李路路,王欢,孙明,张启翔. 福建农林大学学报(自然科学版). 2014(04)
博士论文
[1]百合不同器官转录组分析及SSR标记开发应用[D]. 杜方.浙江大学 2014
硕士论文
[1]黄瓜（Cucumis sativus L.）α-半乳糖苷酶基因启动子的克隆及序列分析[D]. 王奎山.扬州大学 2010
[2]百合查尔酮合成酶基因（CHS）及其启动子的克隆与分析[D]. 杨丽.西北农林科技大学 2006
本文编号：3438089
【文章来源】：山西农业大学山西省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
接头PCR原理示意图
-6-图1.2TAIL-PCR原理示意图Fig.1.2PrincipleofTAIL-PCR反向PCR（I-PCR）指用限制性内切酶切割内部无切点的已知DNA序列，然后用DNA连接酶使DNA片段自连产生环状DNA片段，最后以环化产物为模板，使用根据已知序列设计的反向引物进行PCR扩增（图1.3）。运用反向PCR方法，Chen等从小麦中克隆了小麦花粉特异性TaPSG719基因启动子序列[47]，Tsafaris等从番红花中成功克隆出了CsatAP1／FUL启动子[48]。该方法引物设计简单，成本低，但PCR扩增的成功依赖于限制性酶切位点的位置，目标DNA片段的环化难以控制。图1.3I-PCR原理示意图Fig.1.3PrincipleofI-PCR现今，已有许多研究表明了启动子在基因表达调控中的重要性。许园园等在杜梨中鉴定了CBLs家族基因成员PbCBL10启动子的功能元件，探明PbCBL10在逆境下的表
-6-图1.2TAIL-PCR原理示意图Fig.1.2PrincipleofTAIL-PCR反向PCR（I-PCR）指用限制性内切酶切割内部无切点的已知DNA序列，然后用DNA连接酶使DNA片段自连产生环状DNA片段，最后以环化产物为模板，使用根据已知序列设计的反向引物进行PCR扩增（图1.3）。运用反向PCR方法，Chen等从小麦中克隆了小麦花粉特异性TaPSG719基因启动子序列[47]，Tsafaris等从番红花中成功克隆出了CsatAP1／FUL启动子[48]。该方法引物设计简单，成本低，但PCR扩增的成功依赖于限制性酶切位点的位置，目标DNA片段的环化难以控制。图1.3I-PCR原理示意图Fig.1.3PrincipleofI-PCR现今，已有许多研究表明了启动子在基因表达调控中的重要性。许园园等在杜梨中鉴定了CBLs家族基因成员PbCBL10启动子的功能元件，探明PbCBL10在逆境下的表
【参考文献】：
期刊论文
[1]百合品种的分类及遗传多样性研究[J]. 杜方,李兴桃,徐小晶,袁赟,常琳,张鲜艳. 山西农业大学学报(自然科学版). 2018(05)
[2]海岛棉单萜合酶基因克隆及其受黄萎病诱导的表达分析[J]. 杨璨,孙全,王微娜,耿帅鹏,江怀仲,蔡应繁. 南方农业学报. 2016(05)
[3]‘西伯利亚’百合单萜释放与Li-mTPS表达日变化动态分析（英文）[J]. 李天娇,胡增辉,郑健,冷平生,杨凯. 西北农业学报. 2016(05)
[4]浓香型和淡香型百合单萜合酶基因差异表达[J]. 唐彪,胡增辉,冷平生,闫金华,吴秀云. 北京农学院学报. 2016(02)
[5]玉簪属植物花香研究[J]. 刘倩,孙国峰,张金政,李晓东. 中国农业科学. 2015(21)
[6]荔枝多酚氧化酶基因启动子克隆与功能分析[J]. 王树军,刘保华,孙进华,肖茜,李焕苓,王家保. 果树学报. 2015(03)
[7]自然界气味关系图[J]. 林翔云,王丽萍,林君如,何丽洪,葛淑英,郑剑滨. 香料香精化妆品. 2015(01)
[8]茶树萜类香气物质代谢谱与相关基因表达谱时空变化的关系[J]. 刘晶晶,王富民,刘国峰,贺志荣,杨华,韦朝领,宛晓春,魏书. 园艺学报. 2014(10)
[9]杜梨PbCBL10基因表达与启动子功能分析[J]. 许园园,蔺经,李晓刚,李慧,常有宏. 果树学报. 2014(06)
[10]岷江百合单萜合酶基因克隆与表达分析[J]. 李路路,王欢,孙明,张启翔. 福建农林大学学报(自然科学版). 2014(04)
博士论文
[1]百合不同器官转录组分析及SSR标记开发应用[D]. 杜方.浙江大学 2014
硕士论文
[1]黄瓜（Cucumis sativus L.）α-半乳糖苷酶基因启动子的克隆及序列分析[D]. 王奎山.扬州大学 2010
[2]百合查尔酮合成酶基因（CHS）及其启动子的克隆与分析[D]. 杨丽.西北农林科技大学 2006
本文编号：3438089
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