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小尾寒羊三个慢型骨骼肌肌钙蛋白的基因克

发布时间:2021-10-19 08:00
  慢型骨骼肌肌钙蛋白基因主要包括肌钙蛋白C 1基因(Troponin C type 1,TNNC1)、肌钙蛋白I 1基因(Troponin I type 1,TNNI1)和肌钙蛋白T 1基因(Troponin T type 1,TNNT1),它们对骨骼肌的收缩、骨骼肌肌肉纤维特性及多种疾病的发生有密切关系。目前,有关绵羊的TNNC1、TNNI1和TNNT1基因的全长核酸序列未见报道。本试验采用RT-PCR、RACE、生物信息学分析、荧光定量PCR等技术方法,克隆了小尾寒羊TNNC1、TNNI1和TNNT1基因的全长序列,预测分析了其对应蛋白的序列和特性,构建了其在小尾寒羊和杜泊羊多种组织的表达谱,从分子水平上探索了小尾寒羊三个基因的主要结构和表达特性。主要结果如下:(1)克隆测序得到了小尾寒羊TNNC1、TNNI1和TNNT1基因的cDNA序列,其中TNNI1包含两个5′端有区别的序列,并分别命名为TNNI1a和TNNI1b。得到的TNNC1、TNNI1a和TNNT1基因的全长cDNA序列及TNNI1b基因的部分cDNA序列已提交至GenBank,并分别获得登录号为KR153938、KT... 

【文章来源】:山东农业大学山东省

【文章页数】:85 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

小尾寒羊三个慢型骨骼肌肌钙蛋白的基因克


TNNC1保守区、3′端及5′端片段电泳图

序列,全长cDNA,核苷酸,对应图


图 3-2 TNNC1 全长 cDNA 核苷酸和氨基酸对应图Fig.3-2 TNNC1 cDNA nucleotide sequence and the corresponding amino acid sequence3.1.2 TNNI1 基因克隆结果及序列特征3.1.2.1 TNNI1 基因克隆结果保守区片段经过普通 PCR 反应获得长度为 515 bp 和 523 bp 的序列片段。根据获得的中间片段序列获得的引物,3′ RACE 和 5′ RACE 结果符合试验预计片段,经测序,得到基因 TNNI1 的 cDNA 的 3′ 和 5′ 端片段,且长度分别为 429 bp 和 157 bp。试验结果均通过 GenBank 数据库比对验证。最后,通过 ContigExpress 序列拼接软件进行准确的序列拼接,获得基因全长序列。对于保守区处的两个不同的片段,经验证为基因亚型。TNNI1 三个片段的凝胶电泳结果如图 3-3 所示。

电泳图,保守区,片段,电泳图


图 3-2 TNNC1 全长 cDNA 核苷酸和氨基酸对应图Fig.3-2 TNNC1 cDNA nucleotide sequence and the corresponding amino acid sequence3.1.2 TNNI1 基因克隆结果及序列特征3.1.2.1 TNNI1 基因克隆结果保守区片段经过普通 PCR 反应获得长度为 515 bp 和 523 bp 的序列片段。根据获得的中间片段序列获得的引物,3′ RACE 和 5′ RACE 结果符合试验预计片段,经测序,得到基因 TNNI1 的 cDNA 的 3′ 和 5′ 端片段,且长度分别为 429 bp 和 157 bp。试验结果均通过 GenBank 数据库比对验证。最后,通过 ContigExpress 序列拼接软件进行准确的序列拼接,获得基因全长序列。对于保守区处的两个不同的片段,经验证为基因亚型。TNNI1 三个片段的凝胶电泳结果如图 3-3 所示。

【参考文献】:
期刊论文
[1]慢性肾脏病患者腺苷负荷心肌灌注显像及肌钙蛋白水平的临床分析[J]. 谢瑜,罗惠民,江勇,余亚琳,周晓萍.  昆明医科大学学报. 2015(06)
[2]鲁西黑头肉羊与小尾寒羊肉质性状的比较研究[J]. 王金文,崔绪奎,张果平,王德芹,孟宪锋.  家畜生态学报. 2012(04)
[3]杜泊羊的适应性生长规律观察报告[J]. 乌兰其其格,钮河.  畜牧与饲料科学. 2011(11)
[4]多种心肌损伤标志物联合检测在急性心肌梗死诊断中的应用价值分析[J]. 贺赞静.  中国医学创新. 2011(19)
[5]杜泊羊及其在我国初步利用效果[J]. 赵有璋.  现代畜牧兽医. 2011(01)
[6]心肌酶谱和肌钙蛋白I联合检测对诊断急性心肌梗死的临床应用价值[J]. 梁伟,易伟莲.  中国当代医药. 2010(12)
[7]小尾寒羊不同部位羊肉理化特性及肉用品质的比较[J]. 郭元,李博.  食品科学. 2008(10)
[8]杜泊肉绵羊良种培育及优良特性[J]. 曹斌云,赵敬贤,张若楠.  畜牧兽医杂志. 2004(01)
[9]小尾寒羊的品种特点及利用途径[J]. 杜建中.  草与畜杂志. 1990(02)

硕士论文
[1]杜泊羊种质特性初步研究[D]. 王建刚.西北农林科技大学 2006



本文编号:3444473

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