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越冬香梨优斑螟部分抗寒基因表达及氨基酸研究

发布时间:2021-10-21 15:51
  香梨优斑螟是新疆林果业重要害虫之一,以老熟幼虫在翘皮或为害处越冬,为探索香梨优斑螟滞育期间越冬幼虫的滞育特征,选择抗寒性相关基因—热激蛋白基因、脂肪酸去饱和酶基因、和其它滞育期关联基因如精氨酸激酶、乙酰辅酶A羧化酶、脂肪酸合酶、糖原磷酸化酶、己糖激酶和氨基酸为研究对象,研究其表达或变化规律,旨在促进探究香梨优斑螟滞育机制,为香梨优斑螟防控提供新思路。(1)香梨优斑螟滞育期及低温胁迫的内参基因筛选:在4℃低温胁迫下香梨优斑螟内参基因稳定性是UBQ>GAPDH>Actin>18s>TUB;在不同低温胁迫1h时香梨优斑螟内参基因的稳定性从大到小依次为UBQ>18s>GAPDH>Actin>TUB;在滞育过程中香梨优斑螟内参基因的稳定性依次为GAPDH>18s>UBQ>TUB>Actin。香梨优斑螟在短期温度胁迫时可选择UBQ作为内参基因,滞育研究中GAPDH作为内参基因比较理想。(2)热激蛋白(HSP60、HSP70、HSP90)基因表达特征:4℃低温胁迫后HSPs基因表达显著上调,1h达到最高峰值,3h后下降再上升,其... 

【文章来源】:塔里木大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】:79 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

越冬香梨优斑螟部分抗寒基因表达及氨基酸研究


所有滞育期及不同处理的RNA电泳图(每3个生物学重复之间随机选取一个)

溶解曲线,内参,基因


塔里木大学硕士学位论文第三章结果与分析2718sTUBActinGAPDHUBQ图3-2内参基因的溶解曲线Fig.3-2Dissolutioncurveofreferencegene表3-1扩增效率Table3-1PCRefficiency基因Gene线性相关系数R2Correlationcoefficient扩增效率(%)PCRefficiencyActin0.995998.77TUB0.9968105.88GAPDH0.9944110.4118s0.9886105.03UBQ0.994490.263.1.3内参基因稳定性分析3.1.3.1不同滞育期及处理下内参基因的表达水平(1)不同时期香梨优斑螟5个内参基因不同时期的Ct值较为稳定,变化趋势差异不大。18s内参基因表达丰度最高,Ct值5.87-6.89,GAPDH、Actin、TUB和UBQ基因表达丰度相对

趋势图,内参,基因,趋势


塔里木大学硕士学位论文第三章结果与分析28较低,Ct值14.01-20.54之间,总体趋势平稳,无明显的高表达或低表达现象(图3-3)。图3-3不同时期内参基因Ct值变化趋势Fig.3-3ChangesofCtvaluesofreferencegenesindifferentperiods(2)低温处理不同时长香梨优斑螟5个内参基因在低温处理不同时长下的Ct值也较为稳定,但在3h和24h时出现幅度较大波动,相比不同时期的表达,Ct值的稳定程度有一定下降。18s内参基因表达丰度依然是最高,Ct值5.87-6.89,GAPDH、Actin、TUB和UBQ基因表达丰度相对18s较低,Ct值14.01-20.54之间,于24h有较明显波动,Ct值增大,表达量降低,可能由于低温时间过长影响mRNA(图3-4)。图3-4低温处理不同时长内参基因Ct值变化趋势Fig.3-4ChangetrendofCtvalueofinternalreferencegeneinlowtemperaturetreatment(3)不同低温处理香梨优斑螟5个内参基因在不同低温处理下的Ct值也较为稳定,未出现明显的起伏。18s内参基因表达丰度依然是最高,Ct值8.12-12.54,GAPDH、Actin、TUB和UBQ基因表达丰度相对18s较低,Ct值17.33-26.41之间,总体趋势平稳,程度间于不同时期

【参考文献】:
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本文编号:3449289

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