大鲵性腺发育及Sox14基因表达特性研究

发布时间：2017-05-05 11:02

  本文关键词：大鲵性腺发育及Sox14基因表达特性研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：大鲵(Megalobatrachusdavidianus)是我国特有珍稀两栖动物,具有很高的药用价值、食用价值、经济价值和科学研究价值,然而野生大鲵资源量因自然环境的破坏和大量非法捕杀急剧下降,已成为国家二类保护水生野生动物。21世纪初,随着大鲵资源的进一步衰减和市场售价的攀升,大鲵人工养殖逐渐兴起,目前已成为部分地区的特色产业。但受制于对大鲵繁殖基础研究不足,加之大鲵性腺发育和繁殖的独特性,使得大鲵人工繁殖技术一直没有大的突破,其中亲鲵性腺发育慢、雄鲵成熟度差导致的繁殖率低,一直是大鲵繁育技术的瓶颈。为深入了解大鲵性腺发育规律和繁殖特性。本实验对大鲵脑垂体和精巢的组织特点,亲鲵的激素水平和代谢强度,以及Sox14基因的结构和表达特性进行了初步研究,获得如下结果:1.通过组织切片观察,结果显示:与鱼类及其他两栖动物相似,大鲵脑垂体包括神经垂体和腺垂体两部分。腺垂体分为结节部、中间部和远侧部,大鲵腺垂体中间部较发达,远侧部内按细胞嗜色性可分为嗜碱区、嗜酸区和混合区。大鲵精细管管腔狭长,精细管互相交错形成精巢网,这可能是大鲵排精量少、排精难的原因。大鲵同一个体性腺中精细胞发育不同步,不同个体之间性腺发育也不同步,造成大鲵人工繁殖过程中催产率、受精率低等问题。2.激素水平检测发现,大鲵性腺发育表现出三个特点:(1)成熟雌雄大鲵性腺发育规律基本一致,表现为春季随温度上升血清激素水平升高,且均在6月达到峰值,其后开始下降。表明人工养殖条件下雌雄亲鲵性腺发育较为同步,但繁殖期较短;(2)成熟雌雄大鲵性腺发育对温度的敏感性不同,其中睾酮随温度变化表现出剧烈变化,而雌二醇变化相对平缓。表明雄性性腺发育对温度更加敏感;(3)成熟雌雄大鲵生殖激素水平差异较大,3.血清生化指标检测表明,雌性大鲵的总胆固醇、甘油三酯、高密度胆固醇、低密度胆固醇含量总体水平显著高于雄性(P0.05),这些生化指标的雌雄差异对大鲵的雌雄鉴定和性腺发育时期鉴定具有指导意义。雌雄大鲵血清尿素含量的峰值不同步出现,可能是雌雄大鲵性腺发育不同步的原因之一。4.大鲵激素敏感性实验表明,成熟雌雄大鲵均对HCG敏感,注射后24h激素水平达到最高,其后开始下降,48小时后下降至较低水平;但雌雄成熟大鲵对LH-A2均不敏感,注射后48小时无显著变化。表明,HCG更适合用于大鲵人工催产。5.大鲵Sox14基因生物信息学和表达特性研究表明,大鲵SOX14基因cDNA全长1470bp,其中ORF720 bp,编码239个氨基酸,编码蛋白分子量为26.75kd,等电点为9.68,无信号肽和跨膜螺旋区,与热带爪蟾(X.topiciles)同源性为91%,与鱼类、人类等远源物种相似度都在80~90%之间。主要在性成熟大鲵性腺组织高表达,并随年龄的增加表达量增多。以上研究结果表明:1.大鲵脑垂体精巢内生殖细胞发育不同步可能是造成大鲵繁殖率低的主要原因;2.人工养殖大鲵性腺发育基本同步,但雄性大鲵对温度变化更为敏感,二者均对HCG敏感,HCG可用于大鲵人工催产;3.大鲵Sox14基因主要在性成熟大鲵的性腺中表达,和大鲵性腺发育相关,可作为大鲵性腺发育标志基因。
【关键词】：大鲵 性腺发育 生殖激素 代谢强度 Sox14
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S917.4
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-12
• 第一章 文献综述12-20
• 1.1 大鲵的研究进展12-19
• 1.1.1 大鲵脑垂体和精巢形态结构的研究进展12-13
• 1.1.2 性激素对大鲵性腺发育影响的研究13-16
• 1.1.3 雌雄大鲵生理代谢强度差异及其变化规律的研究进展16
• 1.1.4 雌雄大鲵体征差异的研究进展16-17
• 1.1.5 大鲵Sox14基因的研究进展17-19
• 1.2 研究的目的及意义19-20
• 第二章 大鲵垂体和精巢形态结构观察20-26
• 2.1 引言20
• 2.2 材料和方法20-21
• 2.2.1 实验动物20
• 2.2.2 实验材料和设备20
• 2.2.3 主要试剂20
• 2.2.4 实验方法20-21
• 2.3 实验结果21-24
• 2.3.1 大鲵脑垂体形态结构观察21-22
• 2.3.2 大鲵精巢的形态和结构观察22-24
• 2.4 讨论24-25
• 2.4.1 大鲵脑垂体的形态结构观察24
• 2.4.2 大鲵精巢的形态结构观察24-25
• 2.5 小结25-26
• 第三章 大鲵生殖激素变化规律及血清生化指标测定26-35
• 3.1 引言26
• 3.2 材料与方法26-28
• 3.2.1 实验动物26
• 3.2.2 实验设备和耗材26-27
• 3.2.3 试验方法27-28
• 3.3 实验结果28-32
• 3.3.1 大鲵生殖激素季节变化规律28-29
• 3.3.2 雌雄大鲵血清生化指标差异和变化规律29-31
• 3.3.3 大鲵对两种催情剂的敏感性31
• 3.3.4 雌雄大鲵体型特征差异31-32
• 3.4 讨论32-34
• 3.4.1 大鲵生殖激素变化规律32-33
• 3.4.2 雌雄大鲵血清生化指标差异及变化规律33-34
• 3.4.3 大鲵对两种催情剂的敏感性实验34
• 3.5 小结34-35
• 第四章 大鲵Sox14基因的表达研究35-46
• 4.1 引言35
• 4.2 材料和方法35-37
• 4.2.1 实验材料35-36
• 4.2.2 实验方法36-37
• 4.3 实验结果37-44
• 4.3.1 大鲵Sox14基因的生物信息学分析37-43
• 4.3.2 大鲵Sox14基因的组织表达43
• 4.3.3 大鲵Sox14在不同发育阶段的表达43-44
• 4.4 讨论44-45
• 4.4.1 大鲵Sox14基因的生物信息学分析及进化分析44
• 4.4.2 大鲵Sox14基因的组织表达44-45
• 4.5 小结45-46
• 第五章 结论与创新点46-48
• 结论46-47
• 创新点47-48
• 参考文献48-52
• 附录52-56
• 致谢56-57
• 作者简介57

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  本文关键词：大鲵性腺发育及Sox14基因表达特性研究，由笔耕文化传播整理发布。

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