甘蓝型油菜FT基因表达分析及A7-FT基因转录调控研究
发布时间：2021-11-03 23:00
缩短甘蓝型油菜的生育期具有重要的战略意义和经济价值,使得早熟油菜育种的研究成为重点,由于油菜的开花期与成熟期关系密切,所以油菜开花的分子机制也成为了研究的热点。开花关键基因FT（FLOWERING LOCUS T）是光周期途径、春化途径、自主途径的信号整合因子,但是目前关于甘蓝型油菜FT基因的表达调控研究不完善。由于甘蓝型油菜FT基因具有多个拷贝,本文针对A7-FT基因开展研究。1.利用实时荧光定量技术（RT-qPCR）研究FT基因在不同品种（品系）不同时期的表达规律,结果发现不同品种（品系）甘蓝型油菜FT基因表达模式基本一致,呈先上升后下降趋势,且在花期FT基因表达量最大;在苗期、花芽分化期、蕾薹期、花期弱冬性材料103、104、1358的FT基因表达量均高于冬性较强的湘油15号和中双11号,角果FT基因的表达量与甘蓝型油菜的生态型无明显规律。2.通过PCR技术从甘蓝型油菜湘油15号基因DNA中获得A7-FT基因启动子序列。利用PLACE和PlantCARE在线工具对该段序列的顺式作用元件进行预测,结果表明,A7-FT基因启动子除了存在启动子核心元件TATA-box、CAAT-box...
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 文献综述
1.1 植物开花的分子机理
1.1.1 光周期途径
1.1.2 春化途径
1.1.3 赤霉素途径
1.1.4 自主途径
1.2 开花关键基因FT的研究进展
1.2.1 开花关键基因FT的发现及发展
1.2.2 开花关键基因FT作用模式
1.3 植物开花信号途径整合因子FT
1.3.1 光周期途径对FT基因的调控
1.3.2 春化途径和自主途径对FT基因的调控
1.4 植物启动子研究现状
1.4.1 启动子的概述
1.4.2 启动子的克隆方法
1.4.3 启动子的生物信息学分析
1.5 目的与意义
第2章 甘蓝型油菜FT基因表达分析
2.1 实验材料
2.1.1 植物材料
2.2 试剂和仪器
2.2.1 主要试剂
2.2.2 主要仪器
2.2.3 设计荧光定量中使用的引物
2.3 实验方法
2.3.1 FT基因表达量检测
2.4 结果与分析
2.4.1 总RNA的提取
2.4.4 FT基因表达结果分析
第3章 A7-FT基因启动子的克隆、序列分析及缺失载体构建
3.1 实验材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 实验菌株
3.2 试剂和仪器
3.2.1 主要试剂
3.2.2 主要仪器
3.3 试验方法
3.3.1 A7-FT基因启动子的克隆
3.3.2 启动子序列分析及缺失载体构建
3.4 实验结果
3.4.1 启动子上顺式作用元件预测
3.4.2 不同片段长度启动子的克隆及PCR检测
3.4.3 启动子缺失载体的构建
3.4.4 5′端缺失载体转化农杆菌结果分析
第4章 拟南芥的转化和A7-FT启动子功能分析
4.1 实验材料
4.2 试剂和仪器
4.2.1 主要试剂
4.2.2 仪器设备
4.3 实验方法
4.3.1 拟南芥的培养
4.3.2 拟南芥转化
4.3.3 转化子筛选
4.3.4 GUS活性的组织化学检测
4.4 实验结果
4.4.1 拟南芥转化结果
4.4.2 GUS染色结果检测
第5章 讨论与结论
5.1 甘蓝型油菜FT基因表达分析
5.2 A7-FT启动子具有诱导基因表达的功能
参考文献
致谢
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]真核启动子研究进展[J]. 汤方,涂慧珍. 林业科技开发. 2015(02)
[2]“稻—稻—油”三熟制生产模式探讨[J]. 周训华,唐广心,朱志华,何华元. 作物研究. 2015(01)
[3]植物GI基因生理功能研究进展[J]. 唐维,刘亚菊,张允刚,王欣,后猛,闫会,马代夫,李强. 分子植物育种. 2014(05)
[4]植物SOC1/AGL20基因研究进展[J]. 马腾飞,林新春. 浙江农林大学学报. 2013(06)
[5]开花整合子SOC1花期调控的分子机制[J]. 鲜登宇,江为,赵夏云,汤青林,宋明,王志敏. 中国蔬菜. 2013(06)
[6]LEAFY（LFY）基因在花发育网络调控中的研究进展[J]. 张亚萍,习珺珺,于丽霞,李斌,高则睿,鄢波. 现代农业科技. 2012(09)
[7]高等植物CO基因研究进展[J]. 付建新,王翊,戴思兰. 分子植物育种. 2010(05)
[8]光周期途径植物开花决定关键基因FT[J]. 郭春晓,田素波,郑成淑,王文莉,孙宪芝. 基因组学与应用生物学. 2009(03)
[9]植物LFY基因的研究进展[J]. 兰树斌,李建国. 广西农业生物科学. 2007(S1)
[10]植物开花光周期反应的分子调控机制[J]. 沙爱华,王英,刘志文,蔡铭,袁平该,陈宪成. 华北农学报. 2006(S1)
博士论文
[1]甘蓝型油菜3D基因组学的初步研究与应用[D]. 谢婷.华中农业大学 2016
[2]甘蓝型油菜花序生长调节因子基因BnTFL1的功能分析及遗传转化的优化[D]. 廖志强.湖南农业大学 2015
[3]春性甘蓝型油菜遗传连锁图谱构建及开花时间的QTL定位分析[D]. 柳海东.青海大学 2015
[4]甘蓝型油菜开花调控基因BnFLC.A10和BnFTs的功能分析[D]. 代书桃.华中农业大学 2015
[5]大豆生育期新基因E9的发现及FT/TFL互作蛋白的功能研究[D]. 南海洋.中国科学院研究生院（东北地理与农业生态研究所） 2014
[6]植物开花基因FT的遗传转化及其参与开花调控的研究[D]. 吕波.山东农业大学 2014
[7]大豆FT/TFL1基因克隆、表达模式及功能分析[D]. 胡瑞波.中国农业科学院 2009
硕士论文
[1]南方稻田机械起垄栽培对油菜氮素营养特性以及光合特性的影响[D]. 徐江林.湖南农业大学 2017
[2]甘蓝型油菜“丙409”光周期敏感性QTLs定位及转录组分析[D]. 崔艳科.华中农业大学 2017
[3]桑树FT基因启动子的克隆和功能分析[D]. 姚璐.西北农林科技大学 2016
[4]VRN1及Ppd-D1等位变异对小麦光合效率的效应及引进冬小麦种质的光合效率评价[D]. 刘政.西北农林科技大学 2016
[5]甘蓝型油菜BnFAD2-C5基因的表达及调控序列的功能分析[D]. 刘芳.湖南农业大学 2015
[6]小麦VRN2基因功能分析及长日照促进开花早期反应基因的鉴定[D]. 刘诚诚.山东农业大学 2014
[7]不同桑树品种的FT基因时空表达分析[D]. 朱大鹏.西北农林科技大学 2014
[8]普通小麦春化基因VRN1、VRN3过表达及RNA干扰载体的构建及遗传转化[D]. 朱灿灿.河南农业大学 2014
[9]甘蓝型油菜早熟相关性状QTL定位及开花基因BnGI的克隆[D]. 周晓晨.上海交通大学 2014
[10]苹果Flowering locus T （FT）基因及其启动子的克隆及表达分析[D]. 郑小一.南京农业大学 2010
本文编号：3474507
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 文献综述
1.1 植物开花的分子机理
1.1.1 光周期途径
1.1.2 春化途径
1.1.3 赤霉素途径
1.1.4 自主途径
1.2 开花关键基因FT的研究进展
1.2.1 开花关键基因FT的发现及发展
1.2.2 开花关键基因FT作用模式
1.3 植物开花信号途径整合因子FT
1.3.1 光周期途径对FT基因的调控
1.3.2 春化途径和自主途径对FT基因的调控
1.4 植物启动子研究现状
1.4.1 启动子的概述
1.4.2 启动子的克隆方法
1.4.3 启动子的生物信息学分析
1.5 目的与意义
第2章 甘蓝型油菜FT基因表达分析
2.1 实验材料
2.1.1 植物材料
2.2 试剂和仪器
2.2.1 主要试剂
2.2.2 主要仪器
2.2.3 设计荧光定量中使用的引物
2.3 实验方法
2.3.1 FT基因表达量检测
2.4 结果与分析
2.4.1 总RNA的提取
2.4.4 FT基因表达结果分析
第3章 A7-FT基因启动子的克隆、序列分析及缺失载体构建
3.1 实验材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 实验菌株
3.2 试剂和仪器
3.2.1 主要试剂
3.2.2 主要仪器
3.3 试验方法
3.3.1 A7-FT基因启动子的克隆
3.3.2 启动子序列分析及缺失载体构建
3.4 实验结果
3.4.1 启动子上顺式作用元件预测
3.4.2 不同片段长度启动子的克隆及PCR检测
3.4.3 启动子缺失载体的构建
3.4.4 5′端缺失载体转化农杆菌结果分析
第4章 拟南芥的转化和A7-FT启动子功能分析
4.1 实验材料
4.2 试剂和仪器
4.2.1 主要试剂
4.2.2 仪器设备
4.3 实验方法
4.3.1 拟南芥的培养
4.3.2 拟南芥转化
4.3.3 转化子筛选
4.3.4 GUS活性的组织化学检测
4.4 实验结果
4.4.1 拟南芥转化结果
4.4.2 GUS染色结果检测
第5章 讨论与结论
5.1 甘蓝型油菜FT基因表达分析
5.2 A7-FT启动子具有诱导基因表达的功能
参考文献
致谢
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]真核启动子研究进展[J]. 汤方,涂慧珍. 林业科技开发. 2015(02)
[2]“稻—稻—油”三熟制生产模式探讨[J]. 周训华,唐广心,朱志华,何华元. 作物研究. 2015(01)
[3]植物GI基因生理功能研究进展[J]. 唐维,刘亚菊,张允刚,王欣,后猛,闫会,马代夫,李强. 分子植物育种. 2014(05)
[4]植物SOC1/AGL20基因研究进展[J]. 马腾飞,林新春. 浙江农林大学学报. 2013(06)
[5]开花整合子SOC1花期调控的分子机制[J]. 鲜登宇,江为,赵夏云,汤青林,宋明,王志敏. 中国蔬菜. 2013(06)
[6]LEAFY（LFY）基因在花发育网络调控中的研究进展[J]. 张亚萍,习珺珺,于丽霞,李斌,高则睿,鄢波. 现代农业科技. 2012(09)
[7]高等植物CO基因研究进展[J]. 付建新,王翊,戴思兰. 分子植物育种. 2010(05)
[8]光周期途径植物开花决定关键基因FT[J]. 郭春晓,田素波,郑成淑,王文莉,孙宪芝. 基因组学与应用生物学. 2009(03)
[9]植物LFY基因的研究进展[J]. 兰树斌,李建国. 广西农业生物科学. 2007(S1)
[10]植物开花光周期反应的分子调控机制[J]. 沙爱华,王英,刘志文,蔡铭,袁平该,陈宪成. 华北农学报. 2006(S1)
博士论文
[1]甘蓝型油菜3D基因组学的初步研究与应用[D]. 谢婷.华中农业大学 2016
[2]甘蓝型油菜花序生长调节因子基因BnTFL1的功能分析及遗传转化的优化[D]. 廖志强.湖南农业大学 2015
[3]春性甘蓝型油菜遗传连锁图谱构建及开花时间的QTL定位分析[D]. 柳海东.青海大学 2015
[4]甘蓝型油菜开花调控基因BnFLC.A10和BnFTs的功能分析[D]. 代书桃.华中农业大学 2015
[5]大豆生育期新基因E9的发现及FT/TFL互作蛋白的功能研究[D]. 南海洋.中国科学院研究生院（东北地理与农业生态研究所） 2014
[6]植物开花基因FT的遗传转化及其参与开花调控的研究[D]. 吕波.山东农业大学 2014
[7]大豆FT/TFL1基因克隆、表达模式及功能分析[D]. 胡瑞波.中国农业科学院 2009
硕士论文
[1]南方稻田机械起垄栽培对油菜氮素营养特性以及光合特性的影响[D]. 徐江林.湖南农业大学 2017
[2]甘蓝型油菜“丙409”光周期敏感性QTLs定位及转录组分析[D]. 崔艳科.华中农业大学 2017
[3]桑树FT基因启动子的克隆和功能分析[D]. 姚璐.西北农林科技大学 2016
[4]VRN1及Ppd-D1等位变异对小麦光合效率的效应及引进冬小麦种质的光合效率评价[D]. 刘政.西北农林科技大学 2016
[5]甘蓝型油菜BnFAD2-C5基因的表达及调控序列的功能分析[D]. 刘芳.湖南农业大学 2015
[6]小麦VRN2基因功能分析及长日照促进开花早期反应基因的鉴定[D]. 刘诚诚.山东农业大学 2014
[7]不同桑树品种的FT基因时空表达分析[D]. 朱大鹏.西北农林科技大学 2014
[8]普通小麦春化基因VRN1、VRN3过表达及RNA干扰载体的构建及遗传转化[D]. 朱灿灿.河南农业大学 2014
[9]甘蓝型油菜早熟相关性状QTL定位及开花基因BnGI的克隆[D]. 周晓晨.上海交通大学 2014
[10]苹果Flowering locus T （FT）基因及其启动子的克隆及表达分析[D]. 郑小一.南京农业大学 2010
本文编号：3474507
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