大白菜BrCML49基因的分离鉴定及表达特征分析

发布时间：2021-11-04 04:44

　　类钙调蛋白（Calmodulin-like protein,CML）是植物细胞中一类非常重要的钙感受蛋白,且CML蛋白在花粉萌发和花粉管生长中起到重要作用。该研究以大白菜自交不亲和系‘91-125’自花授粉后柱头为材料,克隆获得大白菜BrCML49基因cDNA全长序列1 046 bp,包括960 bp开放阅读框,编码319个氨基酸,包含2个EF-hand保守结构域。序列分析发现,BrCML49蛋白为稳定的亲水蛋白,没有跨膜区。实时荧光定量（qRT-PCR）表达分析显示,BrCML49基因的表达量在‘91-125’的花药中最高,其次是全花和花瓣,在其他组织中表达量较低;BrCML49基因在大白菜自交亲和系‘14S23’的全花和柱头中表达量较高,在其他组织中表达量较低。亚细胞定位分析发现BrCML49主要定位于烟草叶片的细胞膜和细胞核中。该研究结果可为进一步研究大白菜BrCML49基因的功能奠定基础,并为阐明大白菜BrCML49基因参与自交不亲和花粉萌发及花粉管生长的信号机制提供理论依据。 

【文章来源】：西北植物学报. 2020,40(09)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

BrCML49蛋白的疏水性分析

BrCML49蛋白的磷酸化位点分析

以大白菜‘91-125’自花授粉后柱头cDNA为模板,用含有双酶切位点(KpnⅠ和XbaⅠ)的特异引物49F-KpnⅠ/49R-XbaⅠ进行PCR扩增,得到960 bp的BrCML49目的基因片段,双酶切后与pCAMBIA2300-GFP载体进行连接,构建亚细胞定位的重组载体。经双酶切验证表明重组载体构建成功(图9,A),将亚细胞定位的融合表达载体命名为35S-BrCML49-GFP(图9,B)。图9 大白菜BrCML49蛋白的亚细胞定位

【参考文献】：
期刊论文
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[7]大白菜喷施NaCl克服自交不亲和性的研究[J]. 宋尚伟,王兰菊,张晓伟,毛光志.  安徽农业科学. 2003(05)

博士论文
[1]甘蓝花粉管钙感受蛋白编码基因CML49的克隆及功能鉴定研究[D]. 许俊强.西南大学 2014



本文编号：3475029