库尔勒香梨自交不亲和SFBB基因RNAi表达载体的构建与转化

发布时间：2021-11-04 05:50

　　目的:‘库尔勒香梨’（Pyrus sinkiangensis Yü）,作为新疆的特色果树,梨属植物具有自交不亲和性,制约新疆梨产业的发展进程。本研究首先建立了库尔勒香梨叶片离体诱导再生的稳定高效再生体系,再利用基因工程技术,针对库尔勒香梨自交不亲和SFBB基因不同的两个区域构建干扰载体,为通过分子手段改良梨自交不亲和性状和培育自交亲和的梨品种奠定一定基础。方法:1、以库尔勒香梨离体培养的继代30天左右的无菌苗叶片为材料,1/2 MS为基本培养基,用TDZ与IBA或NAA分别组合设计配方,探讨不同生长调节剂质量浓度组合对愈伤组织形成率和不定芽形成率的影响,选取最优配方附加不同质量浓度的Ag NO3,获得不定芽再生的最佳培养基。用IBA和NAA分别组合设计生根生长调节剂的配比,根据生根率、平均生根数以及平均生根长度筛选最适宜生根的生长调节剂的配比,建立生根的培养体系。最终建立库尔勒香梨叶片诱导再生植株。2、以新疆自交不亲和梨品种‘库尔勒香梨’的花粉为材料,根据本实验室已获得的1344 bp SFBB基因（SFBBx-gamma（Gen Bank登录号:KU756268））设计引物,以SFB... 

【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

库尔勒香梨愈伤组织生长情况

A Bmg/L 愈伤组织诱导率均较高，为 97.78 %或 100%，这些配方之间生长效果差异不显著，但显著高于其他处理。总体来说 TDZ 与 含 NAA 的配方愈伤组织比 TDZ 与 含 IBA的配方愈伤组织的数量多、体积大、颜色更鲜绿。图 2-1 库尔勒香梨愈伤组织生长情况（A）10 d 的再生愈伤组织（B）25 d 的再生愈伤组织Fig.2-1 The growth of Korla Fragrant Pear callus.（A）10 days’regeneration of the tissue （B）25 days’regeneration of the tissue2.3.2 1.0 mg/L TDZ 与 IBA 或 NAA 组合对库尔勒香梨愈伤组织诱导不定芽的影响ABCDE

不同质量浓度的 AgNO3对再生不定芽形成率的影响2-2可以看出，附加AgNO3对不定芽再生的效果不一，含IBA的配方附3叶片再生不定芽率有明显提高（图 2-3-A），为 84.92 %，显著高于未芽率；附加 1.0 mg/L AgNO3时，不定芽形成率显著低于未添加 AgN不定芽的形成有抑制作用。但对含 NAA 的配方附加 0.5 mg/L 和 1.0 m进不定芽的再生，其再生率反而低于未添加 AgNO3的再生率（图 2-表 2-2 不同浓度 AgNO3和最优配方组合对库尔勒香梨叶片再生不定芽的影Table 2-2 The influence of different concentrations ofAgNO3and the optimformula on the regeneration of the leaf regeneration of the Korla pear处理Treatment浓度 concentration（ mg/L ） 不定芽形成率Frequency of adventitiousformation ( SE) / %TDZ IBA NAA AgNO31 1 0.5 0 75.55±1.92 b2 1 0.5 0.5 84.92±1.92 a3 1 0.5 1 65.55±1.92 c4 1 0.6 0 72.22±1.92 b5 1 0.6 0.5 41.11±1.92 e6 1 0.6 1 56.67±3.33 dAB


本文编号：3475128